BTS BIOANALYSES ET CONTROLES
TECHNIQUES DE MICROBIOLOGIE
1.7.Détermination de la voie d’attaque du glucose (VAG)
Dans un tube contenant 12 mL de milieu Hugh et Leifson (composition donnée en annexe), ajouter
stérilement 0,4 mL (soit 16 gouttes) de glucose à 30 % puis homogénéiser délicatement.
Ensemencer le tube avec quelques gouttes de la suspension « S ».
Incuber 24 heures à 37°C.
1.8.Mise en évidence de l’utilisation de glucides
1.8.1. Lactose
A partir de la suspension « S », ensemencer un milieu Kligkler-Hajna.
Incuber 24 heures à 37°C.
1.8.2. Mannitol
A partir de la suspension « S », ensemencer un milieu Mannitol Mobilité Nitrate.
Incuber 24 heures à 37°C.
1.8.3. Esculine
A partir de la suspension « S », ensemencer une gélose à l’esculine en tube fin.
Incuber 24 heures à 37°C.
1.8.4. Amidon
A partir de la suspension « S », ensemencer une gélose à l’amidon en petite boite de Pétri.
Incuber 24 heures à 37°C.
1.9.Mise en évidence de l’utilisation de substrats azotés
1.9.1. Urée et tryptophane
A partir de la suspension « S », ensemencer un milieu urée-indole.
Incuber 24 heures à 37°C.
1.9.2. Recherche des décarboxylases
A partir de la suspension « S », ensemencer les milieux LDC, ODC et ADH.
Incuber 24 heures à 37°C.
1.9.3. Caséine
Préparer, dans une petite boite de Pétri, une gélose trypticase soja au lait écrémé à 10 %.
Laisser solidifier.
A partir de la suspension « S », ensemencer la gélose au lait.
Incuber 24 heures à 37°C.