Techniques de microbiologie

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BTS 08 INI B
Vendredi 11 décembre
AFBB
Techniques de Microbiologie
NOM :
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Durée : 1 heure
Prénom :
Techniques de microbiologie
1) Compléter les légendes du schéma ci-dessous.
2) Identifier les deux types de ciliatures observés ci-dessous. Préciser la manière dont on différencie
ces bactéries lors de l’examen microscopique à l’état frais.
3) Interpréter l’expérience ci-dessous :
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Durée : 1 heure
4) Compléter le schéma ci-dessous en indiquant les étapes de la coloration de Gram. Indiquer la
correspondance entre la coloration observée et le caractère Gram + ou – d’une bactérie.
5) Lors de l’observation d’un frottis coloré au Gram, on observe l’image ci-dessous (le cytoplasme
est de couleur violette). Décrire la morphologie de la bactérie observée.
6) Quels sont les éléments décrits lors de la lecture d’un isolement sur milieu trypticase-soja en boite
de Pétri ? Illustrer cette description en prenant l’exemple de Staphylococcus aureus.
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7) Compléter le tableau ci-dessous :
TEST CATALASE
TEST OXYDASE
Substrat :
Substrat : N,N,N'N'-tétraméthyl-1,4-phénylènediamine
Equation de la réaction :
Equation simplifiée de la réaction :
Substrat ___________________  Produit ______________
Lecture d’un résultat positif :
Lecture d’un résultat positif :
Observation de bulles (O2)
8) Représenter les différents résultats que l’on peut obtenir après ensemencement et incubation d’un
milieu Viande-Foie et préciser les types respiratoires correspondants. Indiquer le résultat obtenu
pour les bactéries appartenant au genres Micrococcus, Staphylococcus, Streptococcus et
Enterococcus.
9) La composition du milieu de Hugh et Leifson est fournie ci-dessous.
-
Qu’est ce qu’une peptone ?
-
Expliquer la mise en évidence de la voie d’attaque du glucose d’une souche bactérienne
dans ce milieu.
Hugh et Leifson
Composition pour un litre de milieu :
peptone
bleu de bromothymol
chlorure de sodium
hydrogénophosphate de potassium
agar
pH = 7,1
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2,0 g
30 mg
5,0 g
0,3 g
2,5 g
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10) A partir de la formule du tryptophane, expliquer la mise en évidence de deux enzymes
bactériennes dont le substrat est le tryptophane.
11) Analyser la composition du milieu de Slanetz fournie ci-dessous. Justifier le choix de ce milieu
pour le dénombrement des Enterococcus dans l’eau (NB : le chlorure de triphényltétrazolium est
un indicateur d’oxydo-réduction, rouge en milieu réduit).
Composition pour un litre de milieu :
peptone
glucose
azide de sodium
chlorure de triphényltétrazolium
hydrogénophosphate de sodium
agar
pH = 7,2
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20,0 g
2,0 g
0,4 g
0,1 g
4,0 g
10,0 g
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12) L’ensemencement d’une microgalerie API 20 NE avec une souche bactérienne donne les résultats
suivants :
incolore
trouble
(ESCuline, GELatine, Para-Nitro-Phényl-Galactoside, auxanogramme : GLUcose et ARAbinose)
Interpréter les résultats obtenus (Justifier chaque réponse).
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13) Des cocci Gram positif, catalase positive, formant des colonies jaunes sur milieu de Chapman
(composition fournie ci-dessous) sont mis en évidence au cours d’une analyse.
Milieu de Chapman (composition pour un litre de milieu)
peptone
10,0 g
extrait de viande de boeuf
1,0 g
chlorure de sodium
75,0 g
mannitol
10,0 g
rouge de phénol
0,025 g
agar
15,0 g
pH = 7,4
13.1. Indiquer s’il s’agit d’un milieu empirique ou synthétique. Justifier la réponse.
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13.2. S’agit-il d’un milieu sélectif ? Justifier la réponse.
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13.3. Que peut-on déduire de la couleur des colonies observées ? Justifier la réponse.
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13.4. La photographie ci-dessous montre le résultat d’un test pratiqué pour poursuivre le
diagnostic (témoin à gauche, essai à droite).
Donner le principe de ce test, interpréter le résultat obtenu et conclure.
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