BTS ABM MICROBIOLOGIE (E4 – U42) BTS BLANC 2010 BREVET DE TECHNICIEN SUPERIEUR ANALYSES DE BIOLOGIE MEDICALE Epreuve E4 – Unité U42 Microbiologie Coefficient : 2 Documents interdits – Calculatrice interdite DUREE DE L’EPREUVE : 3h00 Il est demandé aux candidats de respecter la numérotation des questions. AFBB Page 1 / 8 BTS ABM MICROBIOLOGIE (E4 – U42) BTS BLANC 2010 AFBB Page 2 / 8 Les infections intestinales 1. Les infections virales Les virus peuvent être responsables d’intoxications alimentaires : entérovirus, virus de l’hépatite A, rotavirus, calicivirus... Un norovirus, le virus de Norwalk (document 1), transmis principalement par l’eau et les aliments (crustacés, salades), engendre des gastro-entérites. C’est un virus circulaire de 27 à 32 nm de diamètre, non enveloppé, dont l’ARN est monocaténaire de polarité positive. Il attaque les cellules épithéliales des villosités de l’intestin, ce qui entraîne une diarrhée. 1.1. Quel appareil a permis d’obtenir l’image du document 1 ? Justifier la réponse. 1.2. Représenter schématiquement un virus non enveloppé et un virus enveloppé. Préciser notamment la localisation respective des molécules impliquées dans la reconnaissance des cellules cibles. 1.3. Citer un exemple de virus enveloppé, et préciser sa famille. 1.4. Quels sont les différents types de symétrie observés chez les virus ? Expliquer succinctement chaque organisation. 1.5. Que signifie l’expression « ARN monocaténaire de polarité positive » ? 1.6. Les rétrovirus sont également des virus à ARN positif. Pourtant, leur stratégie de multiplication est différente de celle des autres virus à ARN +. Expliquer cette différence. 2. Les infections et intoxications d’origine bactérienne Les toxi-infections alimentaires d’origine bactérienne peuvent être dues à des bactéries Gram positives (Staphylococcus aureus, Clostridium perfringens, Bacillus cereus) ou Gram négatives (certaines souches d’Escherichia coli, Salmonella, Campylobacter…) 2.1. Sous forme de tableau, présenter la composition moléculaire de la paroi des bactéries Gram positives et Gram négatives. 2.2. Exposer les étapes de la coloration permettant de mettre en évidence la différence de composition. 2.3. Le document 2 représente les premières étapes de la synthèse d’un composant de la paroi. 2.3.1. Identifier ce composant et donner les légendes des éléments notés 1, 2, 3 et 4 sur le document 2. 2.3.2. Indiquer le mode d’action de la vancomycine à l’aide de ce document 2. 2.4. La paroi constitue la cible de plusieurs antibiotiques. 2.4.1. Donner le nom de l’enzyme qui catalyse la dernière étape de la synthèse du peptidoglycane et expliquer son rôle. 2.4.2. Citer trois d’exemples antibiotiques capables d’inhiber cette enzyme. 2.4.3. Ce type d’antibiotique est toutefois inefficace chez certaines bactéries. Présenter un mécanisme enzymatique de résistance des bactéries à ce type d’antibiotique. BTS ABM MICROBIOLOGIE (E4 – U42) 2.5. BTS BLANC 2010 AFBB Page 3 / 8 Le résultat partiel d’un antibiogramme par la méthode de dilution est fourni dans le document 3. 2.5.1. Donner le principe de cette méthode en précisant notamment la signification des lettres « c » et « C ». 2.5.2. Interpréter le résultat obtenu. 2.6. Staphylococcus aureus et Bacillus cereus produisent des exotoxines diarrhéiques et émétiques. Des kits immunoenzymatiques (ELISA) spécifiques permettent la détection rapide de l’entérotoxine staphylococcique dans les vomissements et les aliments incriminés. 2.6.1. Définir le terme « entérotoxine ». 2.6.2. Sous forme de schéma synthétique, représenter la détection immunoenzymatique de l’entérotoxine staphylococcique. 2.7. Les souches d’Escherichia coli pathogènes au niveau intestinal peuvent être toxinogènes (ETEC) ou invasives (EIEC). 2.7.1. Donner la signification de « ETEC » et de « EIEC ». 2.7.2. Présenter les mécanismes physiopathologiques aboutissant au symptôme diarrhéique lors d’une intoxication par une souche d’Escherichia coli toxinogène (les mécanismes sont les mêmes pour Vibrio cholerae). 2.7.3. Définir le pouvoir invasif d’un micro-organisme. 2.8. Depuis une dizaine d'années, les infections causées par les EHEC (Enterohaemorrhagic Escherichia coli), et plus particulièrement par le sérotype O157:H7, apparaissent comme un problème de santé publique en Europe. En France, une étude a montré que 86 % des cas de syndromes hémolytiques et urémiques (SHU) chez les enfants de moins de 15 ans étaient associés à une infection à EHEC. 2.8.1. Donner le principe général d’un sérotypage effectué au laboratoire. 2.8.2. A quoi correspondent les éléments O157 et H7 identifiés lors du sérotypage ? Expliquer de manière détaillée. 2.8.3. La détection des gènes de pathogénicité (gène stx en particulier) peut être effectuée directement sur des selles après un enrichissement de trois heures en eau peptonée. Des résultats obtenus avec cette méthode sont fournis dans le document 4. - Citer les étapes successives permettant d’obtenir l’image du document 4 à partir du milieu d’enrichissement. 2.9. Interpréter les résultats obtenus (essais E1 à E5). Les salmonelles ont encore une incidence importante en France. 2.9.1. Définir le terme « incidence ». 2.9.2. Présenter, sous forme de schéma, la ciliature d’une salmonelle, ainsi que le type de déplacement observé lors de l’examen microscopique à « l’état-frais ». 2.9.3. Quels sont les types trophiques des salmonelles vis à vis du carbone et de l’énergie ? Expliquer chaque terme. BTS ABM MICROBIOLOGIE (E4 – U42) BTS BLANC 2010 AFBB Page 4 / 8 2.9.4. La composition du milieu Hektoen est donnée dans le document 5. - Analyser la composition de ce milieu. - Indiquer l’aspect des colonies de Salmonella sur ce milieu en précisant les significations biochimiques de cet aspect. 2.9.5. A partir de colonies suspectes obtenues sur milieu Hektoen, quel test « rapide » peut être réalisé ? - Exposer le mode opératoire de ce test ainsi que les modalités de sa lecture. - Préciser le résultat obtenu pour Salmonella. Donnée : la formule du substrat utilisé est la suivante : 2.9.6. Le diagnostic d’espèce est ensuite confirmé par ensemencement d’une microgalerie API 20 E. Les Salmonella sont généralement ONPG - ; LDC + et citrate +. Compléter le document 6 (extrait du tableau de lecture de la galerie API 20 E). 3. Les parasitoses d’origine intestinale 3.1. Présenter les critères morphologiques (schéma bienvenu) permettant de différencier dans une selle en suspension formolée, les formes parasitaires suivantes : 3.2. - Kystes d’Entamoeba coli ; - Forme végétative d’Entamoeba histolytica ; - Œuf d’ascaris. Indiquez, le cas échéant, une coloration extemporanée, permettant de mieux visualiser les éléments parasitaires. 3.3. La toxoplasmose est une zoonose transmise par ingestion de viande crue ou mal cuite contaminée par les kystes du parasite. L'hôte définitif de ce parasite est en général le chat tandis que l’Homme constitue un hôte intermédiaire. 3.3.1. Donner les définitions de « zoonose », « hôte définitif » et « hôte intermédiaire ». 3.3.2. Donner le nom d’espèce en latin du parasite. 3.3.3. Dans quels cas la toxoplasmose est-elle une maladie redoutée ? 3.3.4. Le kit « TOXO-HAI » permet la détermination quantitative des anticorps sériques dirigés contre ce parasite. - Quel est le principe de ce test ? - Interpréter le résultat présenté sur le document 7. BTS ABM MICROBIOLOGIE (E4 – U42) BTS BLANC 2010 Document 1 Virus de Norwalk Document 2 Synthèse du peptidoglycane AFBB Page 5 / 8 BTS ABM MICROBIOLOGIE (E4 – U42) BTS BLANC 2010 Document 3 Antibiogramme par la méthode de dilution Document 4 Détection des gènes stx par PCR NB : le témoin négatif ne présente qu'une bande à hauteur de l'étalon interne. AFBB Page 6 / 8 BTS ABM MICROBIOLOGIE (E4 – U42) AFBB Page 7 / 8 BTS BLANC 2010 Document 5 Composition du milieu Hektoen Document 6 A rendre avec la copie Extrait du tableau de lecture de la galerie API 20 E TEST Substrat Caractère recherché ONPG LDC CIT Résultats Négatif Positif BTS ABM MICROBIOLOGIE (E4 – U42) BTS BLANC 2010 Document 7 Sérodiagnostic de la toxoplasmose NB : le témoin positif et le témoin négatif ont été réalisés et validés. 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