1) Régulation de la mucine MUC4 par les miARN Identification de

Régulation de la mucine MUC4 par les miARN et identification de nouveaux miARN
comme cibles thérapeutiques dans le cancer du pancréas
F. Lahdaoui1,2 et I. Van Seuningen1,2
1 Inserm U837, Centre de Recherche Jean-Pierre Aubert, Equipe 5 « Mucines, différenciation
et cancérogenèse épithéliales », 59045 Lille Cedex, France.
2 Université Lille Nord de France, 1 Place de Verdun, 59045 Lille cedex, France.
Introduction : Le cancer du pancréas représente la quatrième cause de décès par cancer dans
les pays occidentaux. C’est un cancer de mauvais pronostic avec une médiane de survie de 6
mois et un taux de survie à 5 ans inférieur à 5%. La mucine membranaire MUC4 est néoexprimée dès les stades précoces de la cancérogenèse pancréatique. Son expression augmente
progressivement au cours de la carcinogenèse et atteint son maximum dans l’adénocarcinome.
Notre laboratoire a montré que le gène codant MUC4 fait l’objet de régulation
transcriptionnelle et également épigénétique (méthylation de l’ADN et modifications des
histones). En revanche, la régulation de MUC4 par les petits ARN non codants, notamment
par les microARN, est totalement inconnue à l’heure actuelle.
Objectifs : (i) établir le profil d’expression des miARN dans différentes lignées cellulaires
pancréatiques humaines cancéreuses (CAPAN-1, CAPAN-2, MiaPaCa2) et normales (HPNE,
HPDE) (ii) identifier les miARN inhibant l’expression de MUC4 (iii) étudier l’effet de ces
miARN sur les propriétés biologiques de la lignée CAPAN-2.
Méthodes : Le profil d’expression des miARN a été réalisé sur puce miARN (Agilent). Les
études in silico à l’aide des bases de données MiRBase, TargetScan, Microcosm et MiRanda
nous ont permis de sélectionner les miARN ciblant potentiellement MUC4. L’étude de la
régulation de MUC4 par ces miARN après transfection cellulaire a été étudiée par RT-PCR et
western-blotting. L’activité biologique des miARN sur les propriétés (prolifération, apoptose,
migration et invasion) des cellules CAPAN-2 a été évaluée in vitro.
Résultats : Les miARN candidats exprimés de manière différentielle entre cellules
cancéreuses et cellules « normales » sont les miARN let-7a, miR-21, miR-98, miR-145, miR155, miR-210 et miR-219-1-3p. L’expression de MUC4 est inhibée par miR-21, miR-210,
miR-155 et miR-219-1-3p. La sur-expression de miR-210, miR-155 ou miR-219-1-3p, dans la
lignée cellulaire CAPAN-2, entraîne une inhibition de la prolifération. En revanche,
l’introduction de miR-21 favorise la prolifération de ces cellules.
Conclusion : Nous montrons pour la première fois la régulation de MUC4 par les miARN
miR-21, miR-210, miR-155 et miR-219-1-3p. Ces quatre miARN apparaissent donc comme
des cibles d’intérêt dans le but de ralentir la progression tumorale dans le cancer du pancréas.
Recherche financée par la LNCC : Equipe labellisée LIGUE 2011
Mots clés : Pancréas, cancer, MUC4, miARN.