Nom : Habert
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Stage proposé par Véronique MACHELON INSERM Nom et adresse du Laboratoire ou de l’Unité : UMR_S 996 CYTOKINES, CHIMIOKINES ET IMMUNOPATHOLOGIE 32, rue des Carnets 92140 Clamart Téléphone : 01 41 28 80 04 Mail : [email protected] Site internet : http://mac-gratuit.fr/site/U996/ Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Marc PALLARDY Intitulé de l ‘équipe d’accueil : La chimiokine SDF-1/CXCL12 et ses récepteurs Prénom et NOM du Responsable de l’équipe :Karl BALABANIAN Résumé du thème de recherche de l’équipe (une dizaine de lignes maximum) Our activities are focused on molecular and functional aspects of the interactions established between the alphachemokine CXCL12 and its receptors, CXCR4 and CXCR7, in human disorders, and especially in two rare immunodeficiencies, the Idiopathic CD4 T cell Lymphocytopenia (ICL) and the WHIM syndrome (WS), and in Epithelial Ovarian Cancers (EOC). We recently revealed that EOC produce CXCL12 (Zou et al., Nat Med, 2001; Machelon et al., BMC Cancer, 2011), express the intracellular protein GILZ (Redjimi et al., Mol Cancer, 2009), and use both factors to promote their growth and malignancy. This malignant process was up to now considered via an exclusive CXCL12/CXCR4 axis. However, our recent works that have identified RDC1/CXCR7 as a second receptor for CXCL12 (Balabanian et al., J Biol Chem, 2005, Top 1%) and then characterized CXCR4/CXCR7 heterodimers (Levoye et al., Blood, 2009), challenge this view and prompt us to determine the respective contribution of CXCR4 and CXCR7 to CXCL12-dependent EOC progression. Titre du projet de stage : Identification et rôle de l’isoforme gamma de la chimiokine CXCL12 dans les tumeurs ovariennes Responsable du stage: Véronique MACHELON, 01 41 28 80 04, [email protected] Projet de stage : Ce travail s’intègre dans un projet (Labex LERMIT) qui a pour but d’évaluer l’impact des différentes isoformes de CXCL12 dans le cancer epithélial des ovaires, une cause majeure de mortalité par cancer gynécologique. Bien que la chimiokine Stromal cell-Derived Factor 1 (SDF-1/CXCL12) produite par les cellules tumorales, joue un rôle clef dans la réponse immunitaire de l’hôte, dans l’angiogenèse tumorale [1,2], et dans le contrôle de la prolifération des cellules tumorales, l’expression de l’isoforme alpha (la forme la plus courante) mesurée en immunohistochimie n’a pas de valeur pronostique en elle-même [3]. Une des hypothèses est que différentes isoformes ou formes tronquées de la chimiokine CXCL12, associées à des effets différents, sont produites dans les tumeurs ovariennes. L’isoforme gamma de CXCL12 a été identifié récemment [4]. Elle est caractérisée par une extension de sa partie C terminale, ce qui lui confère une affinité accrue pour les glycosaminoglycans (GAGs), sans modifier son affinité pour le récepteur CXCR4 (partie N terminale). Ceci peut induire localement une augmentation de la quantité de chimiokine, modifier le recrutement des cellules du système immunitaire impliquées dans la réponse de l’hôte contre la tumeur, et augmenter les effets autocrines comme la prolifération des cellules tumorales. A ce jour, rien n’a été publié concernant l’expression de l’isoforme gamma de CXCL12 dans les tumeurs ovariennes. Dans une étude préliminaire, nous rechercherons par immunohistochimie au moyen d’un anticorps reconnaissant spécifiquement l’isoforme gamma, l’expression de l’isoforme gamma de CXCL12 sur des coupes de tumeurs ovariennes provenant d’une cinquantaine de patientes (Hôpital Antoine Béclère). Nous mesurerons son niveau d’expression par des techniques que nous avons utilisées précédemment pour les chimiokines CXCL12 et CX3CL1, nous établirons le rapport CXCL12 gamma/CXCL12 totale et nous le corrélerons à l’expression du marqueur de prolifération KI-67 et à différents paramètres cliniques utilisés en routine. Dans une étude parallèle sur des lignées de tumeurs ovariennes nous quantifierons les ARNm par PCR en temps réel et la protéine par western blot en fonction de l’expression d’un facteur intracellulaire GILZ (glucocorticoid induced leucine zipper) qui contrôle la prolifération [5] et modifie l’expression transcriptionnelle d’un certain nombre de protéines dont le récepteur CXCR4 dans ces cellules. [1] Zou et al, Nature Medicine, 2001 [2] Krysckek et al, Cancer Research 2005 [3] Machelon et al, BMC Cancer, 2011 [4] Pueda K, Balabanian K et al, PLoSONE, 2008 [5] Redjimi N, et al., Mol Cancer, 2009 Techniques mises en œuvre par le stagiaire : immunohistochimie. analyse statistique, culture cellulaire, PCR en temps réel, mesure de la prolifération, western blot. Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années : Marie-Pierre Belot, Latifa Abdennebi-Najar, Françoise Gaudin, Dominique Emilie, Véronique MACHELON. Progesterone increases CSK HOMOLOGOUS KINASE in HMC-1560 human mast cells and reduces cell proliferation. J Cell Biochem., 2007,102:1271-80 Marie-Pierre Belot , Latifa Abdennebi-Najar, Françoise Gaudin, Michèle Lieberherr, Véronique Godot , Joelle Taïeb , Dominique Emilie , Véronique MACHELON. Progesterone reduces the migration of mast cells towards the chemokine stromal cell-derived factor-1/CXCL12 with an accompanying decrease in cxcr4 receptors. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2008, 292 :1410-1417. Véronique MACHELON. Immunologie et Fonctions ovariennes (review). Reproduction humaine et hormones. 2008, XXI, 28-35. Nadir Benslimane, Thomas Portnoy, Françoise Gaudin, Mathilde Soulez, Véronique MACHELON. Les mécanismes de la réponse immunitaire anti-tumorale dans les tumeurs épithéliales ovariennes. Revue Algérienne d’Immunologie. 2008, 1, 1-6. V. MACHELON. Immunologie et Fonctions ovariennes (review). Reproduction humaine et hormones. 2008, XXI, 28-35. Nadir Benslimane, Thomas Portnoy, Françoise Gaudin, Mathilde Soulez, Véronique MACHELON. Les mécanismes de la réponse immunitaire anti-tumorale dans les tumeurs épithéliales ovariennes. Revue Algérienne d’Immunologie. 2008, 1, 1-6. Redjimi N, Gaudin F, Touboul C, Emilie D, Pallardy M, Biola-Vidamment A, Fernandez H, Prévot S, Balabanian K, Machelon V. Identification of glucocorticoid-induced leucine zipper as a key regulator of tumor cell proliferation in epithelial ovarian cancer. 2009. Molecular Cancer, 8, 83. Filali M, Frydman N, Belot MP, Hesters L, Gaudin F, Tachdjian G, Emilie D, Frydman R, Machelon V. Oocyte in-vitro maturation: BCL2 mRNA content in cumulus cells reflects oocyte competency. Reprod Biomed Online. 2009;19 Suppl 4:4309. Véronique Machelon (corresponding author), Françoise Gaudin, Sophie Camilleri-Broët, Salam Nasreddine, Laurence Bouchet-Delbos, Eric Pujade-Lauraine, Jerôme Alexandre, Laurence Gladieff, Fernando Arenzana-Seisdedos, Dominique Emilie, Sophie Prévot, Philippe Broët, and Karl Balabanian, BMC Cancer. 2011, 11:97. Françoise Gaudin, Salam Nasreddine, Anne-Claire Donnadieu, Dominique Emilie, Sophie Prévot, Véronique Machelon (corresponding author) and Karl Balabanian. Identification of the chemokine CX3CL1 as a new mediator of the proliferation of malignant cells in epithelial ovarian cancer. PLoS One, 2011, 6(7):e21546. Autres informations: Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement - Vincent Biajoux (2ème année de thèse) : Ecole doctorale ED425, Université Paris Sud, Innovation thérapeutique : du fondamental à l’appliqué. Directeur de thèse : K.Balabanian. - Alexandre Bignon (1ère année de thèse) : Ecole doctorale ED425, Université Paris Sud, Innovation thérapeutique : du fondamental à l’appliqué. Directeur de thèse : K.Balabanian. - Christelle Freitas, Master 2 Reproduction et Développement, Paris 7, Directeur : V. Machelon Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des six dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de l’étudiant, l’année du début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le devenir de l’étudiant. Thèses dirigées par V. Machelon au cours des 6 dernières années : - Marie-Pierre BELOT, effets de la progestérone sur la migration des mastocytes HMC-1 en réponse à la chimiokine CXCL12 et sur leur prolifération spontanée, thèse soutenue le 21 novembre 2006. Ecole doctorale ED425, université Paris-Sud. Actuellement en post-doct à l’hôpital St Vincent de Paul à Paris. - Nassima REDJIMI, Rôle du glucocorticoid-induced leucine zipper (GILZ) dans le cancer épithélial de l’ovaire, thèse soutenue le 18 décembre 2009. Actuellement en post-doct dans l’équipe de Danila Valmori, Université de Nantes - Salam NASREDDINE, Etude de deux chimiokines CXCL12/SDF-1 et fractalkine CX3CL1 dans le cancer épithélial des ovaires. Soutenance le 6 juin 2011. Actuellement enseignante à l’Université Libanaise de Beyrouth. Masters 2 dirigés par V. Machelon depuis 2005 : - - Christelle FREITAS, Identification du récepteur de chimiokine CXCR7 dans les tumeurs ovariennes. M2 Recherche “Reproduction et Développement”, Univ. Paris 7. Soutenance, juin 2012. Sandrine MARY, Identification de GILZ (glucocorticoid-induced leucine zipper) comme un inhibiteur de l’expression de l’urokinase-type plasminogen activator (uPA) dans les cancers épithéliaux ovariens (EOC). M2 BTIGF Immunologie - Université Paris Sud. Soutenance, 21 juin 2010. Thomas PORTNOY, GILZ et immunité anti-tumorale, modèle des adénocarcinomes de l’ovaire. M2 Biologie cellulaire, Physiologie et pathologie, spécialité reproduction et développement – Université Paris 7. Soutenance juin 2008. Cyril TOUBOUL, Rôle du facteur GILZ dans le microenvironnement des tumeurs épithéliales de l’ovaire. M2 Sciences chirurgicales, spécialité cancérologie, Université Paris-Sud. Soutenance juin 2007. Nadir BENSLIMANE, GILZ et micro-environnement tumoral dans les tumeurs épithéliales de l’ovaire, M2, Biologie et thérapeutiques innovantes des grandes fonctions, spécialité immunologie – Université Paris Sud. Soutenance juin 2006. Meryem FILALI, Ovaires polykystiques : apoptose des cellules de la granulosa et maturation in vitro, M2 Biologie cellulaire, Physiologie et pathologie, spécialité reproduction et développement – Université Paris 7. Soutenance juin 2005. Anne-Claire DONNADIEU, Production de fractalkine (CX3CL1) dans les tumeurs épithéliales des ovaires et infiltration lymphocytaire. M2 Sciences chirurgicales, spécialité cancérologie, Université Paris-Sud. Soutenance septembre 2005. Mathilde SOULEZ, Rôle du facteur GILZ dans les tumeurs de l’ovaire. M2, Biologie et thérapeutiques innovantes des grandes fonctions, spécialité immunologie – Université Paris Sud. Soutenance juin 2005. Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ? Stage ouvert à tous les profils Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ? Oui.
