Stage proposé par « Prénom NOM

Stage proposé par Véronique MACHELON
Nom et adresse du Laboratoire : UMR_S 996, Labex LERMIT, 32 rue des Carnets, 92140 Clamart
Téléphone : 01 41 28 80 04
Mail : [email protected]
Directeur du Laboratoire : Marc PALLARDY
Titre : Identification et validation des chimiokines comme marqueurs sériques dans le suivi
thérapeutique des cancers ovariens
Projet de stage : : situation du sujet, objectif du stage, approches expérimentales
Le projet a pour but d’évaluer l’impact des chimiokines et de leurs récepteurs dans le cancer epithélial des
ovaires, une cause majeure de mortalité par cancer gynécologique. Des travaux antérieurs dont un certain
nombre ont été réalisés dans l’équipe depuis 10 ans, montrent l’impact de la production dans le
microenvironnement tumoral de chimiokines, des protéines de faible poids moléculaire généralement impliquées
dans la migration cellulaire. Ainsi la chimiokine Stromal cell-Derived Factor 1 (SDF-1/CXCL12) produite par
les cellules tumorales, joue un rôle clef dans la réponse immunitaire de l’hôte et dans l’angiogenèse tumorale
[1,2], mais elle n’a pas de valeur pronostique en elle-même [3]. D’autres chimiokines, comme la
fractalkine/CX3CL1 qui a été récemment identifiée par notre équipe comme une chimiokine produite par les
cellules épithéliales ovariennes et du tractus génital, saines et cancéreuses, sont directement impliquées dans la
croissance tumorale [4]. La question est la suivante : est-ce que la production de chimiokines par les cellules
tumorales, dosables dans le serum, sont l’indice d’une bonne ou d’une mauvaise réponse aux traitements par
chimiothérapie. Parallèlement au dosage sérique réalisé par multiplex, au laboratoire nous réalisons une
quantification de la production de chimiokines par les tumeurs par immunohistochimie sur lames, par cytométrie
de flux sur cellules tumorales, et par PCR en temps réel (light cycler). Sur un modèle cellulaire in vitro nous
mesurons la réponse des cellules tumorales en terme d’apoptose au taxol et au cisplatine, couramment utilisés
dans les traitements. Les réponses moléculaires sont parallèlement analysées par cytométrie de masse.
[1] Zou et al, Nature Medicine, 2001
[2] Krysckek et al, Cancer Research 2005
[3] Machelon et al, BMC Cancer, 2011
[4] Nomé et al., PlosOne, 2011
Techniques mises en œuvre par le stagiaire :
Cultures cellulaires (lignées tumorales ovariennes BG1, SKOV3, OVCAR3) ; mesure de l’apoptose en
cytométrie de flux (annexine V) et par western blot ; immunohistochimie sur coupes de tumeurs
incluses en paraffine; cytométrie en flux sur cellules de tumeurs dilacérées.
Publications du responsable de stage au cours des 5 dernières années :
Kryczek I, Frydman N, Gaudin F, Krzysiek R, Fanchin R, Emilie D, Chouaib S, Zou W, Machelon M. The
Chemokine SDF-1/CXCL12 contributes to T lymphocyte recruitment in human preovulatory follicles and
coordinates with lymphocytes to increase granulosa cell survival and embryo quality. Am J Reprod Immunol,
2005, 54 : 270-283.
KRYCZEK I, LANG A, MOTTRAM P, ALVAREZ X, CHENG P, HOGAN M, MOONS L, WEI S, ZOU L,
MACHELON V, EMILIE D, TERRASSA M, LACKNER A, CURIELL TJ, CARMELIET P, ZOU W. CXCL12 and
VEGF Synergistically Induce Neoangiogenesis in Human Ovarian Cancers. Cancer Res, 2005, 65 : 464-472.
Véronique MACHELON, Cellules de la granulosa et indicateur de la qualité ovocytaire. J Gynecol Obstet Biol
Reprod, 2006, 35, 14-18
Marie-Pierre Belot, Latifa Abdennebi-Najar, Françoise Gaudin, Dominique Emilie, Véronique MACHELON.
Progesterone increases CSK HOMOLOGOUS KINASE in HMC-1560 human mast cells and reduces cell
proliferation. J Cell Biochem., 2007,102:1271-80
Marie-Pierre Belot , Latifa Abdennebi-Najar, Françoise Gaudin, Michèle Lieberherr, Véronique Godot , Joelle
Taïeb , Dominique Emilie , Véronique MACHELON. Progesterone reduces the migration of mast cells towards
the chemokine stromal cell-derived factor-1/CXCL12 with an accompanying decrease in cxcr4 receptors. Am J
Physiol Endocrinol Metab. 2008, 292 :1410-1417.
Véronique MACHELON. Immunologie et Fonctions ovariennes (review). Reproduction humaine et hormones.
2008, XXI, 28-35.
Nadir Benslimane, Thomas Portnoy, Françoise Gaudin, Mathilde Soulez, Véronique MACHELON. Les
mécanismes de la réponse immunitaire anti-tumorale dans les tumeurs épithéliales ovariennes. Revue
Algérienne d’Immunologie. 2008, 1, 1-6.
V. MACHELON. Immunologie et Fonctions ovariennes (review). Reproduction humaine et hormones. 2008, XXI,
28-35.
Nadir Benslimane, Thomas Portnoy, Françoise Gaudin, Mathilde Soulez, Véronique MACHELON. Les
mécanismes de la réponse immunitaire anti-tumorale dans les tumeurs épithéliales ovariennes. Revue
Algérienne d’Immunologie. 2008, 1, 1-6.
Redjimi N, Gaudin F, Touboul C, Emilie D, Pallardy M, Biola-Vidamment A, Fernandez H, Prévot S, Balabanian K,
Machelon V. Identification of glucocorticoid-induced leucine zipper as a key regulator of tumor cell proliferation
in epithelial ovarian cancer. 2009. Molecular Cancer, 8, 83.
Filali M, Frydman N, Belot MP, Hesters L, Gaudin F, Tachdjian G, Emilie D, Frydman R, Machelon V. Oocyte invitro maturation: BCL2 mRNA content in cumulus cells reflects oocyte competency. Reprod Biomed Online.
2009;19 Suppl 4:4309.
Véronique Machelon (corresponding author), Françoise Gaudin, Sophie Camilleri-Broët, Salam Nasreddine,
Laurence Bouchet-Delbos, Eric Pujade-Lauraine, Jerôme Alexandre, Laurence Gladieff, Fernando ArenzanaSeisdedos, Dominique Emilie, Sophie Prévot, Philippe Broët, and Karl Balabanian, BMC Cancer. 2011, 11:97.
Françoise Gaudin, Salam Nasreddine, Anne-Claire Donnadieu, Dominique Emilie, Sophie Prévot, Véronique
Machelon (corresponding author) and Karl Balabanian. Identification of the chemokine CX3CL1 as a new
mediator of the proliferation of malignant cells in epithelial ovarian cancer. PLoS one, 2011, 6(7):e21546.