ECOSYSTEMES MICROBIENS COMPLEXES Laboratoire de Biotechnologies agroalimentaires et environnementales (LBAE-EA 4565) Directeur : Prof B.GABRIEL Les activités du Laboratoire de Biotechnologies Agroalimentaires et Environnementales (LBAE) concernent l’étude de systèmes microbiens complexes dans un contexte à la fois alimentaire (levains de panification) et environnemental (dépollution et traitement de l’eau) au travers des activités de deux équipes de recherche. Différentes approches sont mises en œuvre afin de caractériser et valoriser les activités métaboliques existant dans ces systèmes et notamment celles responsables de la production de biopolymères. Le LBAE, Equipe d’Accueil à l’Université Paul Sabatier, regroupe 8 enseignantschercheurs (2 Professeurs, 5 Maîtres de Conférences et 1 Professeur Associé à Temps Partiel) dans les domaines de la microbiologie, biochimie, et biologie moléculaire et biophysique. Il développe ses activités en collaboration avec des équipes du Laboratoire d’Ingénierie des Systèmes Biologiques et des Procédés (LISBP) de l’INSA de Toulouse et il est Laboratoire d’accueil de l’Ecole Doctorale SEVAB (Sciences Ecologiques, Vétérinaires, Agronomiques et Bioingénieries, ED458), Filière Microbiologie & Biocatalyse industrielles de Toulouse. D’autres collaborations ont été établies avec différents partenaires académiques et industriels notamment dans le cadre de programmes de l’Agence Nationale de la Recherche et de projets Région de Recherche et de Transfert de Technologies. enseignants-chercheurs DOSSAT-LETISSE Valérie FONTAGNÉ-FAUCHER Catherine GIRBAL-NEUHAUSER Elisabeth N’GUYEN VAN THOAI Michel personnels techniques ANGLADE Maryse AURET Eliane GABRIEL Bruno GABRIEL Valérie LEFEBVRE Dominique ROBERT Hervé LABADIE Laurent RABIER Philippe personnels non permanents (thèse, post-doc) AMARI Myriam BOUNAIX Marie-Sophie ROMAIN Claire-Emmanuelle RONDEL Caroline CAUDAN Cédric 1 Contacts LBAE Université Toulouse III Paul Sabatier IUT A - 24, Rue d’Embaquès 32000 Auch Tél : 05 62 61 63 02/05 Email : [email protected] Directeur : Pr. Bruno GABRIEL Tél : 05 62 61 63 13 AXE 1. ETUDE DES BACTÉRIES LACTIQUES IMPLIQUÉES CÉRÉALIERS (Responsable : Catherine Fontagné-Faucher) DANS LA FERMENTATION DES PRODUITS Mots-clés : Bactéries lactiques, Levain, Fermentation lactique, Ecologie microbienne, Biodiversité, Exopolysaccharides Culture de bactéries lactiques isolées de levain Pain au levain Méthode ancestrale de fabrication des spontanée ou par ajout de cultures produits céréaliers fermentés, l’utilisation sélectionnées, le levain renferme une de levain connaît depuis quelques années association complexe de microorganismes un regain d’intérêt. L’utilisation de levains associant diverses bactéries lactiques et des de panification permet en effet une levures. augmentation globale de la qualité des bactéries lactiques sur les principaux produits de boulangerie/viennoiserie (pain, constituants de la pâte joue un rôle brioche, pâte à pizza) par l’amélioration primordial sur l’aspect, la texture, le goût des qualités technologiques (fabrication), et la conservation des produits obtenus. La aromatiques (typicité), nutritionnelles flore lactique intervient principalement (meilleure disponibilité en sels minéraux, pour produire des baisse de l’index glycémique) ainsi que par entraînant une acidification importante, des une composés aromatiques et des substances augmentation de la durée de conservation (limitation du rassissement L’activité métabolique acides des organiques antimicrobiennes et antifongiques. et du développement de microorganismes indésirables). d’interactions Ces bénéfices complexes résultent entre Les études menées au laboratoire ont les pour but de mieux connaître la ingrédients, le procédé technologique et la composition en microorganismes des flore microbienne mise en œuvre levains naturels, écosystèmes microbiens Le levain est une pâte fermentée plus ou moins étudiés que les autres aliments moins liquide composée de farine et d’eau fermentés, qui sera ajoutée à la pâte au moment du enzymatiques des bactéries lactiques pétrissage. présentes et impliquées dans les différentes Obtenu par fermentation 2 ainsi que les activités caractéristiques des produits à base de Notre levain. équipe a développé des compétences dans l’utilisation de souches Ces travaux trouvent également une de bactéries lactiques sélectionnées pour la application dans l’amélioration de la fabrication de levains aussi bien à l’échelle maîtrise des procédés de fabrication et du donc de la qualité des produits céréaliers fabrication à base de levain par la sélection et l’emploi (collaboration avec le CRITT-CTCPA de ferments lactiques caractérisés. Auch) : analyses analyses biochimiques Ainsi notre équipe a réalisé une étude de la flore microbienne de 9 levains laboratoire qu’en de conditions pains au levain microbiologiques des de et principaux substrats et produits de fermentation. naturels de panification de la région Midi- Ces réalisations font partie de travaux Pyrénées ce qui a permis de créer une de sélection de collection de 300 isolats de bactéries technologique artisanal et industriel lactiques. (vitesse de souches croissance, d’intérêt capacités L’ensemble de ces souches a été d’acidification) dans le cadre de contrats identifié par des méthodes classiques de avec des sociétés productrices de ferments microbiologie ainsi que des approches microbiens. moléculaires. Nos travaux ont démontré la Actuellement, notre équipe s’intéresse très grande biodiversité de la flore lactique plus particulièrement au potentiel de de ces levains traditionnels (nombreuses production de composés polysaccharides espèces différentes et coexistence de (polymère de sucres) par les souches de plusieurs espèces bactériennes dans même bactéries lactiques des levains. L’activité levain). métabolique de certaines bactéries lactiques peut en effet conduire à la sécrétion de polysaccharides qui permettent d’améliorer la texture des Exemple de bactéries lactiques présentes dans les levains (F. Breidt, NCSU, X 10000) produits et de limiter les phénomènes de rassissement, pouvant ainsi réduire l’emploi d’additifs technologiques. Les travaux de recherche de l’équipe concernent donc l’étude de ces polymères et la caractérisation des enzymes responsables de leur production, ces 3 dernières étant des biocatalyseurs microbiens d’intérêt dans différents domaines des biotechnologies industrielles. AXE 2. ANALYSE STRUCTURALE ET FONCTIONNELLE DES AGRÉGATS BIOLOGIQUES UTILISÉS DANS LE TRAITEMENT DES EAUX (Responsable Elisabeth NEUHAUSER) Mots-clés : Environnement, Epuration des eaux, Agrégats biologiques (biofilms, granules, flocs, boues activées), Exopolymères, Activités hydrolytiques Station d’épuration des eaux (Source FNDAE) matières sèches issues de boues de station Les eaux usées contiennent de la d’épuration. matière organique et minérale et sont Dans ce contexte, trois approches sont actuellement épurées dans des filières développées au sein de notre équipe : comprenant généralement un traitement - étude de la structure d’agrégats (flocs, biologique. Au sein du bassin biologique, des agrégats, composés de granules, biofilms) et optimisation de leur micro- activités épuratrices ; organismes et de substances organiques de - mise au point de nouveaux procédés de type protéines et glucides, vont utiliser la pollution comme substrat afin de procédés de réduction ou de valorisation des boues biologiques ; l’éliminer. Ainsi, la dépollution maitrise impose des une - recherche de nouveaux traitements « propres » pour l’élimination de biofilms meilleure indésirables présents dans les canalisations. connaissance de la structure et de l’activité de ces agrégats. De plus, l’assainissement Le premier axe de nos recherches des effluents liquides industriels ou urbains concerne est responsable de la production de grandes protéiques responsables de la cohésion quantités de déchets biologiques. A titre des différents types agrégats biologiques. d’exemple, France La complexité du milieu étudié nous a produit plus d’un million de tonnes de conduits à mettre au point une stratégie chaque année, la 4 l’analyse des polymères filières de biologiques valorisation en tant des que boues ressources contrôlées de carbone, d’azote et de phosphore pouvant être utilisées comme intrants agricoles. Au travers de la troisième approche, on se propose de mettre au point un produit consommable biologique naturel capable d’extraction des polymères. La d’inhiber la formation de biofilms dans caractérisation des protéines extraites à des tours aéroréfrigérantes en particulier, partir de divers agrégats biologiques produit applicable dans une large gamme obtenus en bioréacteurs de laboratoire a de secteurs industriels. Les solutions à la ensuite été réalisée. Cette approche a mise permis de corréler la présence de au point technologiquement certaines familles de protéines à la viable structure des agrégats. passent d’un et par procédé économiquement la sélection et l’optimisation de l’efficacité d’enzymes pertinentes. Floc bactérien observé au microscope (Equipe Symbiose, LISBP) Compte tenu des conjonctures actuelles liées aux énergies renouvelables, la deuxième approche consiste à étudier des mécanismes impliqués dans la réduction de la production de boue. En effet, les procédés permettant de convertir la boue en méthane présentent un intérêt industriel mais ne permettent Canalisation recouverte de biofilm (Equipe Symbiose, LISBP) qu’un abattement au mieux de 50 % de la matière organique. Ainsi, notre action de recherche est focalisée sur l’identification L’étude de la nature biochimique des de biofilms industriels couplée à l’optimisation nouvelles enzymes ou la sélection de de l’accessibilité des enzymes au sein des bactéries capables d’hydrolyser la matière organique difficilement biofilms devrait permettre la mise au point de biodégradable. solutions alternatives à l’utilisation de produits Parallèlement, nous étudions de nouvelles chimiques nocifs pour l’environnement. 5