Biologie fondamentale UE 2.1 - 2010 La cellule et les organites intracellulaires Jean-Charles Deybach & Hervé Puy Biochimie & Biologie Moléculaire Rappel sur l’évolution Soupe prébiotique = 6 éléments essentiels C H O N S P 1ères molécules = ARN - Acides aminés acides gras – sucres ADN énergie, membranes et métabolisme Double couche phospholipidique =sélection de chaînons membrane cellulaire métaboliques efficaces plus d’énergie Adaptation à l’environnement par symbiose de 2 systèmes différents Respiration aérobie et anaérobie Evolution spécifique et fonctionnelle des cellules Organisation pluricellulaire Tailles et formes des cellules Réception de signaux issus de 100.000 autres cellules Différents exemples de cellules A : cellule nerveuse humaine B : paramécie C : cellules de jeune plante (tige) D : bactérie minuscule E : neutrophile englobant un globule rouge lignine cellulose Globule blanc polynucléaire neutrophile Globule rouge Cils vibratiles Cellules procaryotes : 1 à 10 µm Plus petits procaryotes : ~ 0,1 à 1 µm Bactéries d'environ 1 à 2 µm de diamètre vues au microscope optique (X1000) Cellules eucaryotes : 10 à 100 µm Plus petite cellule humaine = spermatozoïde (~ 3 µm) Plus grande cellule humaine = ovule (~ 100 µm) Si une cellule animale avait la taille d'un immeuble de six logements 1 µm = 1/1000 mm 1 nm = 1/1000 µm Virus (50 à 100 nm) Bactérie (2 µm) Protéine ~ 3 nm Les éléments de la cellule Structure générale d'une cellule animale eucaryote 1. Les membranes Composition des membranes • Lipides (phospholipides et cholestérol) (~43%) Forment le squelette des membranes Pas de cholestérol chez les procaryotes • Protéines (récepteurs, transporteurs, enzymes) (~49%) Attachés plus ou moins fortement aux phospholipides (liaisons ioniques, hydrophobes, ponts hydrogène etc.) • Glucides (glycoprotéines ou glycophospholipides) (~8%) 1. Les membranes Fonctions de la membrane plasmique • La compartimentation (séparation de l’extérieur et l’intérieur de la cellule). • Les échanges d’information avec d’autres cellules (récepteurs hormonaux, jonctions gap). • La régulation du transport des ions, protéines, sucres graisses, etc.. • Les mouvements cellulaires (pseudopodes, endocytose-exocytose). • Les phénomèmes de reconnaissance (antigène de surface) • La régulation du métabolisme (transduction intracellulaire des signaux extracellulaires) • Un site pour les réactions chimiques ne pouvant pas se produire dans un environnement aqueux 1. Les membranes Cholestérol 1. Les membranes 1. Les membranes La compartimentation membranaire Pour une cellule eucaryote Surface de la membrane plasmique 1500 mm2 Surface des membranes internes 45 000 mm2 Surface du cytosquelette 150 000 mm2 1. Les membranes La couche bi-lipidique agit comme une barrière perméable mais sélective Les protéines membranaires sont indispensables pour le transport des • molécules polaires • ions Modèle de la membrane plasmique Glycoprotéine Cholestérol Phospholipides Glycophospholipide GLYCOCALYX 7. 5 nM Protéines intégrées ou intrinsèques Protéine extrinsèque Structure trilaminaire de la bicouche lipidique (microscopie électronique) Fonctions de la membrane plasmique La compartimentation (séparation de l’extérieur et l’intérieur de la cellule). Les échanges d’information avec d’autres cellules (récepteurs hormonaux, jonctions gap). La régulation du transport des ions, protéines, sucres graisses, etc.. Les mouvements cellulaires (pseudopodes, endocytoseexocytose). Les phénomèmes de reconnaissance (antigène de surface) La régulation du métabolisme (transduction intracellulaire des signaux extracellulaires) Procure un site pour les réactions chimiques ne pouvant pas se produire dans un environnement aqueux Protéines membranaires • Chaque membrane possède son lot de protéines spécifiques lui permettant d’effectuer ses fonctions propres. • Les protéines membranaires sont intégrées, ou associées. • La plupart des protéines intégrées possèdent au moins un domaine transmembranaire (en conformation hélice-α) • D’autres protéines intégrées sont liées de façon covalente à des chaînes de carbone (queue hydrophobe). • Les protéines associées interagissent avec la membrane via les protéines intégrées. Les récepteurs sont regroupés en quatre principales classes Figure 20-3a,b Les récepteurs sont regroupés en quatre principales classes (suite) … c) Récepteurs associés à des enzymes tyrosine kinase d) Récepteurs avec activité enzymatique intrinsèque e) TOLL-Like Receptors Les récepteurs couplés aux protéines G et leurs effecteurs • Chez les mammifères, un grand nombre de récepteurs de surface sont couplés à une protéine G trimérique pour transmettre les signaux • Le ligand active le récepteur, qui lui active la protéine G, qui elle active une enzyme effectrice pour générer un ‘second messager’. • Tous les récepteurs couplés aux protéine G possèdent 7 domaines transmembranaires avec leur extrémité ‘N’ à l’extérieur et l’extrémité ‘C’ à l’intérieur de la membrane. • Ces récepteurs sont impliqués dans tout un spectre de voies métaboliques incluant: détection de la lumière, l’odorat, réponses à certaines hormones et neurotransmetteurs. Le récepteur B2-adrénergique humain est une glycoprotéine formée de 7 domaines transmembranaires (tm1-tm7) Sites de glycosylation Liaison S-S (e2- e3) e1 e4 e3 La noradrénaline, l’adrénaline, les agonistes et/ou les antagonistes se lient dans une cavité formée par tm3-tm6 Noradr. Noradr. tm1 tm2 tm3 tm4 Couplage avec Gs [i3(tm5-tm6)-i4] i1 Désensibilisation si phosphorylation de certains AA (seulement B1 et B2) i4 i2 Transduction des signaux: GTPase Figure 20-5a La protéine G trimérique lie le récepteur b-adrénergique et l’adénylate cyclase Figure 20-16 Transduction du signal de l’AMP cyclique au processus de transcription Figure 20-48a Transduction des signaux: Protéines adaptatrices Protéines de transport Exemple de transporteur: chez les mammifères, GLUT1 transporte le glucose à l’intérieur des cellules Figure 15-7 Transport par les uniporteurs • Les uniporteurs accélèrent un phénomène qui est déjà thermodynamiquement favorable (comme les enzymes) • Ce type de transport est appelé ‘transport facilité’ ou ‘diffusion facilitée’ • Trois caractéristiques distinguent le transport facilité de la diffusion passive – Le taux de diffusion est de beaucoup augmenté en présence de transporteurs – Transport est spécifique – Transport se fait via un nombre limité de transporteurs Transport actif par les pompes à ATP La Ca2+ ATPase pompe les ions Ca2+ du cytosol dans le réticulum sarcoplasmique Composition de la Na+/K+ ATPase Les symporteurs liés au Na+ importent les acides aminés et le glucose dans plusieurs cellules Modèle proposé pour le fonctionnement du ‘deux Na+/unglucose’ symporter Différentiations de la membrane cellulaire -Jonctions serrées -Jonctions “gap” -Desmosomes 2 cellules épithéliales de l’intestin Cavités de l’intestin Bordure en brosse (800nm) Jonctions serrées Desmosome de ceinture (plakoglobulines) Desmosomes ponctuels Microvillosités Filaments d’actine Tonofilaments (kératine) (desmoplakines et plakoglobulines) Jonctions gap Fluide interstitiel Lame basale Hémidesmosome (pas de plakoglobulines) Jonctions serrées 2 membranes plasmiques cellule 1 cellule 2 600 nm Rangées de protéines Espace intercellulaire de 0 nm Moitié cytoplasmique de la bicouche lipidique Jonctions gap Espace intercellulaire de 2-4 nm ouvert tunnel de 2 nm de diamètre Jonction gap constituée de 2 x 6 molécules de connexine (2 connexons) formant un tunnel de 2 nm de diamètre • Permettent le passage de molécules de PM < 1000 • Régulation ouvert-fermé par le Ca et le pH • Pas de barrière au passage du fluide interstitiel fermé Ca2+ Ca2+ pH pH Desmosome ponctuel Membrane plasmique Plaque cytoplasmique (desmoplakines et plakoglobines) Espace intercellulaire de 20 nm Tonofilaments (kératine) 500 nm cellule 2 cellule 1 cadhérines • Boulons intercellulaires • Pas de barrière au passage du fluide interstitiel