Dosage immunologique par électrochimiluminescence

Elecsys® HE4
Dosage immunologique par électrochimiluminescence
(ECLIA) pour la détermination quantitative de la
protéine épididymaire humaine de type 4 (human
epididymal protein 4 - HE4) dans le sérum et le plasma
Indication
Le cancer de l’ovaire est la quatrième cause de décès par cancer chez la femme dans le monde. Les régions les plus avancées sur le
plan économique, dont l’Amérique du Nord, l’Europe, l’Australie et la Nouvelle-Zélande, enregistrent la plus forte incidence. Le cancer
de l’ovaire, forme la plus mortelle de cancer gynécologique, est potentiellement curable s’il est diagnostiqué précocement1 et pris en
charge par des chirurgiens ayant l’expérience du traitement de cette maladie.2, 3 Toutefois, les symptômes du cancer ovarien sont liés
à la présence de masses annexielles et sont souvent vagues et non spécifiques. Par conséquent, 70 à 75 % des cancers de l’ovaire
sont dépistés à un stade avancé. D’après le Centre international de recherche sur le cancer, le taux de survie à cinq ans des patientes
atteintes d’un cancer ovarien est de 46%. Or, lorsque la maladie est diagnostiquée plus tôt, ce taux augmente jusqu’à atteindre 94%.
La protéine HE4 fait partie de la famille des protéines acides du lactosérum à quatre ponts disulfures (whey acidic four-disulfide core -
WFDC) qui aurait des propriétés inhibitrices de la trypsine.4 Elle a d’abord été déterminée dans l’épithélium de l’épididyme distal. Ce biomar-
queur n’est que faiblement exprimé dans l’épithélium des tissus des appareils respiratoire et reproducteur, y compris ceux de l’ovaire, mais il
l’est fortement dans les tissus des tumeurs ovariennes. En outre, on retrouve des taux élevés de HE4 dans le sérum des patientes atteintes
d’un cancer de l’ovaire. Nouveau marqueur tumoral, la protéine HE4 devrait faciliter l’évaluation du risque lié au cancer épithélial de l’ovaire.
Principe du test: dosage en technique sandwich en une étape
Anticorps monoclonal
anti-protéine HE4 humaine
marqué à la biotine
9 min 9 min
Ru Ru
Ru
HE4 dans l’échantillon
Mesure
Anticorps monoclonal
anti-protéine HE4 humaine
marqué au ruthénium
Molécule tapissée
de streptavidine
Biotinylated monoclonal
antibody against human
HE4
9 min 9 min
Ru Ru
Ru
HE4 in the sample
Measurement
Ruthenylated
monoclonal antibody
against human HE4
Streptavidin
microparticle
Technologie Elecsys
L’ECL (électrochimiluminescence) est la technologie utilisée par Roche pour la détection par dosage immunologique. Reposant sur
cette technologie et associé à des dosages immunologiques sensibles, spécifiques et bien conçus, le système Elecsys offre des
résultats fiables. Le développement des dosages immunologiques par ECL s’appuie sur l’utilisation de ruthénium et de tripropylamine
(TPA). La réaction par chimiluminescence qui permet la détection du complexe réactionnel est déclenchée en appliquant une
tension électrique dans la solution de test, ce qui génère une réaction précisément contrôlée. La technologie ECL s’adapte au
principe de nombreux dosages immunologiques tout en offrant un niveau de performance supérieur.

Marqueur précoce de sensibilité accrue pour le diagnostic du cancer de l’ovaire
•Entantquemarqueurtumoralunique,HE4présentelasensibilitélaplusélevéepourdétecterlecancerdel’ovaire,enparticulier
au stade I, phase précoce et non symptomatique.5,6
•Enoutre,HE4montreunesensibilitéaccrueparrapportàCA125dansladétectionducancerdel’endomètredestadeprécoce.7, 8
•UntauxsériqueélevédeHE4associéàuntauxnormaldeCA125suggèrelaprésenced’uncancerdel’ovaireoud’autre
nature, par exemple un cancer de l’endomètre.8
Bonne discrimination entre masses ou kystes ovariens bénins et cancer de l’ovaire
•L’associationdesbiomarqueursHE4etCA125peutpermettrededéterminersiunemassepelvienneestbénigneoumaligne
chez la femme ménopausée ou non (voir la fiche technique ROMA).
•LeduoCA125etHE4estunindicateurdemalignitéplusprécisquenel’estchaquebiomarqueuremployéseul.
Huhtinen et al. font état d’une sensibilité de 78,6 % à un taux de spécificité de 95 % dans la différenciation du cancer de
l’ovaire par rapport aux kystes endométriaux.8
Meilleure gestion du traitement du cancer de l’ovaire : HE4 renforce le potentiel de CA125 pour un meilleur suivi
du cancer de l’ovaire
•LaprotéineHE4peutêtreutiliséepoursurveillerl’évolutiondelamaladiechezlespatientesatteintesd’uncancerdel’ovaire.Le
taux de HE4 reflète la réponse clinique au traitement ou une récidive chez des femmes dont la maladie a été diagnostiquée par
tomodensitométrie9.LaprotéineHE4pourraitdoncêtreunprécieuxindicateurprécocederécidive.10-12
•Chezlaplupartdespatientesatteintesd’uncancerdel’ovaire,lesdeuxmarqueurssontexprimésdansdesproportions
significatives. Certaines femmes cependant ne sont positives qu’à l’un des deux, HE4 ou CA125. L’utilisation conjointe de
CA125 et HE4 pourrait ainsi faciliter la détection d’une maladie récidivante en réduisant le nombre de patientes négatives à
l’un des deux biomarqueurs, pour une plus grande précision de diagnostic.
Caractéristiques du dosage Elecsys® HE4:
Durée du test 18 min.
Principe Dosage en technique sandwich en une étape
Calibration HE4 EIA de Fujirebio Diagnostics, Inc.
Traçabilité Préparation internationale de référence, code NIBSC 98/574
Échantillons •Sérum recueilli dans des tubes à essai standard ou contenant un
gel séparateur
•Plasma Li héparine, plasma EDTA K2 - et EDTA K3
Volume d’échantillon 10 µL
Limite de détection (LdD) 15 pmol/L
Domaine de mesure (valeur minimale définie par la LdD) 15 – 1500 pmol/L
Variation intermédiaire Analyseur cobas e 411, analyseur Elecsys® 2010: 2,7 – 4,3 %
cobas e 601 / e 602 modules, E170: 2,6 – 3,4 %
Répétabilité Analyseur cobas e 411, analyseur Elecsys® 2010: 1,3 – 1,8 %
Modules cobas e 601 / e 602, E170: 1,5 – 1,9 %

Valeurs de référence
UneétudeconduitedansunecliniqueallemandesurlaréalisationdudosageElecsysHE4surlesérumde358femmes
apparemment en bonne santé a fourni les résultats suivants :
La répartition des valeurs du dosage HE4 déterminées chez 896 femmes dans deux cliniques, l’une en Espagne l’autre en
Allemagne, est synthétisée dans le tableau ci-après:
Dans cette étude, des valeurs égales ou inférieures à 140 pmol/l ont été relevées chez 98 % des femmes apparemment en
bonne santé. Il est recommandé à chaque laboratoire de définir sa propre valeur de référence applicable à la population
d’intérêt.
HE4 (pmol/L)
Age (en années) n Médiane 95 e percentile
< 40 127 42,0 60,5
40-49 65 44,3 76,2
50-59 60 4 7, 9 74,3
60-69 60 55,0 82,9
≥ 70 46 62,1 104,0
Valeurs obtenues avec Elecsys
HE4 (pmol/L)
0,0 – 70,0 70,1 – 140,0 140,1 – 500,0 500,1 – 1500,0 > 1500,0
n (répartition en pourcentage)
Apparemment en bonne santé
Pré-ménopausées 90 76 (84,4 %) 13 (14,4 %) 1 (1,1 %) 0 (0,0 %) 0 (0,0 %)
Ménopausées 106 63 (59,4 %) 40 (37,7 %) 3 (2,8 %) 0 (0,0 %) 0 (0,0 %)
Affections bénignes
Pré-ménopausées 177 160 (90,4 %) 16 (9,0 %) 1 (0,6 %) 0 (0,0 %) 0 (0,0 %)
Ménopausées 102 62 (60,8 %) 31 (30,4 %) 9 (8,8 %) 0 (0,0 %) 0 (0,0 %)
Grossesse 50 50 (100 %) 0 (0,0 %) 0 (0,0 %) 0 (0,0 %) 0 (0,0 %)
Maladie non
gynécologique
35 16 (45,7 %) 6 (17,1 %) 6 (17,1 %) 7 (20,0 %) 0 (0,0 %)
ICCa23 9 (39,1 %) 11 (47,8 %) 3 (13,0 %) 0 (0,0 %) 0 (0,0 %)
Cancer
CaOv b, préménopausique 39 12 (30,8 %) 7 (17,9 %) 13 (33,3 %) 5 (12,8 %) 2 (5,1 %)
CaOv, postménopausique 97 10 (10,3 %) 19 (19,6 %) 34 (35,1 %) 28 (28,9 %) 6 (6,2 %)
C. endométrial 49 8 (36,7 %) 20 (40,8 %) 9 (18,4 %) 1 (2,0 %) 1 (2,0 %)
C. mammaire 47 22 (46,8 %) 19 (40,4 %) 5 (10,6 %) 1 (2,1 %) 0 (0,0 %)
C. gastro-intestinal 46 9 (41,3 %) 20 (43,5 %) 6 (13,0 %) 1 (2,0 %) 0 (0,0 %)
C. pulmonaire 23 5 (21,7 %) 7 (30,0 %) 10 (43,5 %) 1 (4,3 %) 0 (0,0 %)
C. vésical 12 3 (25,0 %) 4 (33,3 %) 4 (33,3 %) 1 (8,3 %) 0 (0,0 %)
a CHF = insuffisance cardiaque congestive
b Cancer de l’ovaire

COBAS, COBAS E, ELECSYS et LIFE NEEDS ANSWERS
sont des marques de Roche.
©2011 Roche
Roche Diagnostics (Suisse) SA
CH-6343 Rotkreuz
www.roche-diagnostics.ch
Suivi de l’évolution de la maladie chez les patientes atteintes du cancer de l’ovaire
L’efficacité du dosage Elecsys HE4 en tant qu’outil de suivi de l’évolution de la maladie chez les patientes atteintes d’un cancer de l’ovaire
a été déterminée en évaluant les variations du taux de HE4 par rapport à celles de l’état pathologique sur des séries d’échantillons de
sérum prélevés chez 100 patientes. Cette étude de suivi a rassemblé au total 375 échantillons à raison d’au moins trois échantillons par
patiente. Il a été établi qu’une variation positive de la protéine HE4 correspondait à une augmentation de son taux d’au moins 20 % par
rapport au dosage précédent. Ce niveau de variation prend en compte la variabilité du dosage ainsi que la variabilité biologique.
58,0 % (soit 29 sur 50) des échantillons patientes montrant une variation positive ont coïncidé avec une progression de la maladie
alors que 84,0 % (273 sur 325) des séries d’échantillons ne montrant aucune variation significative du taux de HE4 ont corroboré
une absence d’évolution.
Le taux de concordance totale a été de 80,5 % (302 sur 375). Le tableau suivant présente les données selon un schéma de
classification de 2 x 2.
Variation de l’état pathologique par paire séquentielle
Augmentation de la concentration de HE4 Progression Absence de progression Total
≥ 20% 29 52 81
< 20% 21 273 294
Total 50 325 375
Références des réactifs:
Matériel Configuration produit Numéro de matériel
Elecsys HE4 100 Tests 05950929 190
Elecsys HE4 CalSet 4 x 1 mL 05950945 190
PreciControl HE4 2 x 1 mL 05950953 190
DiluentUniversal 2 x 16 mL diluant pour échantillon ou
2 x 36 mL diluant pour échantillon 11732277 122 ou 03183971 122
Références:
1 Pickle,L.W.,etal.AnewmethodofestimatingUnitedStatesandstate-levelcancer
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3 Engelen, M.J., et al. Surgery by consultant gynecologic oncologists improves survival
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4 Kirchhoff, C. Molecular characterization of epididymal proteins. Rev. Reprod.
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ian carcinoma in patients with a pelvic mass. Gynecologic Oncology, 2008; 108, 402-408.
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prediction of ovarian cancer in patients with a pelvic mass. Gynecologic Oncology,
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