C3 est retenu par la colonne.
1) Reconstituer le peptide P.
2) Quels sont les différents états d’ionisation pour les peptides T1, T2 et donner les pIs de
ces 2 peptides.
3) Quelle colonne utiliseriez-vous pour séparer T1 et T2 à PH 6 ?
4) Calculer les différentes formes (en %) de T1 à pH 4,5 (intervalle 2 de pH).
Le PM moyen pour un aa est de 125.
EXERCICE 3
Déduisez la séquence en acide aminé d’un polypeptide à l’aide des informations suivantes.
1) Hydrolyse acide : Ala, Val ,Arg, Lys x2, Met, Leu, Ser x2
2) Carboxypeptidase A : Ala
3) Trypsine : a) Val,Arg b) Lys, Leu, Ser c) Lys d) Ala, Met, Ser
4) Bromure de Cyanogene : a) Val, Arg, Lys x2, Met, Leu, Ser b) Ala, Ser
5) Thermolysine : a) Val, Met, Ala, Ser, Arg b) Lys, Leu c) Ser, Lys
EXERCICE 4
Une protéine peut être réduite pour donner 2 peptides.
Chaîne 1 : Ala-Cys-Val-Pro-Lys-Arg-Leu-Cys-Arg-Arg-Leu-Cys
Chaîne 2 : Cys-Iso-Cys-Val-Cys
La protéine native (ponts disulfures intacts) est digérée avec la Thermolysine et les peptides
suivant sont obtenus.
a) Ala, Cys x2, Leu b) Arg,Lys,Val,Pro c) Arg x2,Cys x2,Leu, Iso d) Cys x2, Val
Indiquer la position des ponts disulfure dans la protéine native.
EXERCICE 5
Au cours de la maladie dite du « trou de mémoire » deux hormones ont été isolées chez des
patients alors qu’une seule été isolée chez le sujet sain. En fait, le patient infecté possède à
la fois la protéine saine et une autre protéine mutante.
Protéine normale Arg-Met-Gly-Trp-Tyr-Asp-His-Lys
Protéine mutée : Arg-Met-Gly-MET-PHE-Asp-His-Lys
1/ Faire un tableau de l’évolution des charges en fonction du pH pour et et donner les
pI des deux peptides en indiquant la formule utilisée.
2/ Écrire complètement la forme la plus protonnée de .
3/ Comment feriez-vous pour séparer ces deux peptides (colonne, pH, type d’élution) ?
4/ Calculer en % les différentes fractions de et à pH7 (intervalle 2 de pH).