crevette

L.

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E.S.I.T.P.A.
Ecole Sup é ri eure d'Ing é ni eurs et de Techniciens Pour l'Agriculture
Rue Grande
27 106 V
AL DE REUIL
ETUDE EXPERIMENTALE DE L'INFLUENCE
DE DEUX STRESS ENVIRONNEMENTAUX
SUR LES DEFENSES IMMUNITAIRES ET
LA RESISTANCE A LA V/BR/OSE
DE LA CREVETTE PENAEUS STYLIROSTRIS
GANGNERY Al in e
St age effectué du 13 mai au 3 J août 19 96 au
Centre Océanologique du Pacifique
BP 7 004 TARA V AO
TAHITI
Promotion 92

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INSTITUT FRANCAIS DE RECHERCHE
POUR L'EXPLOITATION DE LA MER
Adr esse: IFREMER
BP 7004
TARA VAO
T 1 .. P 1 ' . F
a 11t1 - olyn es te rançatse
AUTEUR (S): Aline Gangnery
DIRECTION DES RESSOURCES
VIVANTES
DEPAR TE MENT RESSOURCES AQUACOLES
ST ATION/LABORATOIRE TAHITI
C ODE :
DRV/AQrfAH 96.57
GLM/AG
TITRE : Etude expérimenta le de l'influence de deux stress date : Aout 1996
environnementaux sur les défenses immunitaires et la
Tirage : 20 ex
ré s istance à la vibriose de la crevette Penae us stylirostris.
Nb pages: 34
Nb figures :13
Nb photos:
CONTRAT DIFFUSION:
(intitul é)
Libre
ŒJ
Re s treinte D
No :
confid entielle D
RESUM E Ce tte ét ude a pour o bj ec ti f de mesurer ch ez la crevette Penaeus stylirostris l 'ef f et
de deux stress environnementau x, ammoniaque et hypoxie, sur les défenses immunitaires
(hémocytes et pr
op hénoloxydase) et la résistan ce à l' inf ection par la bactérie Vi br io penaeicidae.
Les crevettes, sé lec ti onnées en stade C du cycle de mue, ont été soumises pendant 24 heures à
p
lu sie ur s doses d'amm o ni aque N.NH3 ( 1, 1 .5, 2, 2.5 et 3 m g/ 1) ou placées en situa ti on d' hypoxie
( 1 ppm vs 6ppm en normoxie). L
'ef fet du stress a été éva lu é à 24 h par la mesure de la capacité
osmorég
ul atri ce a in si que les paramètr es immunitaire s.
Les r és ultats montrent que l 'a mm o ni aque à 3 mg N.NH3/I in duit une diminution significa ti ve du
nombre t
ota l d es hémocytes, c epe ndant que l'activité de la prophénolox yda se ne varie pas
signifi
cat ivemcnt. Le comptage différentiel montre que la diminution du nombre d es hémocyt es
est li ée à une baisse du nombre des ce llules hyalines, alors que l es types cellulaires (LGC et
SGC) contenant Je système pr ophénoloxydase ne va ri ent pas. L'h ypoxie a pour effet d'in d ui re
une bai
sse significative de l 'ac tivité de la prophénoloxydase, alors que la baisse du nombre total
des hémocyt
es n 'es t pas signifi ca ti ve.
Les crevett
es stressées soumises ~~ J'inf ec ti on ne présentent pa s de mortalité signifi ca tivement
dil'rérente des animaux témo in s dans le cas des deux st ress. Cependant, les résultats des
cha
ll enges bactériens sont di scutés et ne semblent pas définitivement acquis.
mots cl
és : Penaeus stylirostris, Vibrio pen.aeicidae, immunité, hémocyte, prophénoloxydase,
inf
ec ti on bactérienne, capacité osmorég ul atrice, a mm oniaque, hypoxie.

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REMERCIEMENTS
Je lie/ls viveme /lt à remercier :
- MES MAÎTRES de stage : Messieurs Jean-Claude COCHARD et Gilles LE MOULLAC. Si
le duo fait parfois des étincelles, ils n'en restent pa s moins très complémentaires !
-Dominique ANSQUER
... Bretonne pure souche, amie et confide nt e. Sans oublier Ranouil et
Gros minet.
-Axoubidouchou, stagiaire d'infortune comme
mOI , solidaire dans presque toutes les
circonstances ...
-Jacquouille
ma fripouille, bête de Mac (mais ça , ça devient banal dans les remerciements des
rapports de stage), papa des VAT et confident aussi.
-Sharky LA syntaxe error, imbattable
au jeu des citations .... mais qu'est-ce-qu'on s'ennuierait
sans
lui!
-Le p'tit Stan, V AT du premier et du dernier jour , marmotte et tête de cochon à ses heures !
-La Pouvrette, thésard
fê tard du front de mer, adepte acharné de la secte MARAMU 1 avec
son compagnon
de galère le Père Fouras.
-Mizou-mizou l'homme aux pieds froids, sans oublier
la p'tite Gègène et Tapu.
-George Nédelecuzo
n, OOOK ALOOORS !!!
-Félix le chat, futur informaticien du COP. Une bonne dose d'énergie, une cuillerée de reggae
et surtout la tête dans les nuages.
Et aussi tous les autres : l'équipe des gardiens sympas (Théo, Doug, Daniel),
le Dieu lanceur de
cafetière, Pierrette, Peva
.. .. .
Enfin, tous ceux qui de près ou de loin ont contribué à rendre ce séjour inoubliable.
Ah ça non 1 Je ne suis pas prête d'oublier!

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SOMMAIRE
1 NTRO D U CT! ON ....................................... .. .. .... .. .. .. .......... ......................................... 1
1. RAPPELS DES CONNA ISSANCES SUR LA BIOLOGIE DES CREVETTES ... 3
1.
1. Systématique de l'espèce Pe l1a eus slylirosl/'is .... ................ ... .... ....................... 3
1.2. Morphologie et cycle biologiquc
.. ........................................ .. ............ .. ............. 3
1.3.
La mue et la croissance ..................................................................................... 4
1.4 . La régulation du milieu intérieur: l 'osmorég ulalion ........................................ 5
1.4.1.
Les différents types d·osmorégulation ................................ .. ...................... 5
1 .4.2. Physiologie de l' hYPo-oSlllorégulation
.. .. .. ................................................. 6
1
.4 .3. La capaci té osmorégulaltice ........................ .. ............................................. 6
1 .5. Physiologie de l 'excrétion
.. .. .......................................................................... .. . 7
1.6. Les défcnscs immunitaircs ................................................................................ 7
1 .
6. 1. Les défenses ccllula ircs .............................................................................. 8
1.6.2. Les défenses non ccllulaircs ..........................
.. ........................................... 9
1.6.3. Lcs mécanismcs dc défcnsc dcs c
ru stacés face à unc infection ........ .. ....... 9
2.
MA TERlEL ET METHO D ES .............. .. .. .. ........................................................... 10
2.1. 1 ntox icalion à l'ammoniaque .... .. .. .. .................... .. .. .. .... .. .............. .. .. .. .. .. ......... 10
2 .1 .1. Protocole expérimental ............................................................ .. ............... 10
2. 1.2. Dosage de l'azote ammoniacal .. .. ...... .. .. .... .......... .. ...... .. ...... .... ................. 10
2.2. Strcss par hypoxie .......................... ................................ .. ............................... 12
2.3. Contrôle de la pression osmotique .................................................................. 12
2.3. 1. Les prélèvements d'hémolymphe .............................................................
12
2.3.2. Mesure de la prcssion osmotiquc .................................... .. ....................... 12
2.4. La mcsurc des defcnscs iml11unitaires .............................................................
13
2.4. 1. Les comptages hémocytai l'CS totaux et di fférentiel s ........................ .. .... .. . 13
2.4.2. Dosagc dc l'activité phénoloxydase .. ........................................................ 13
2.5. Les infections bacterienncs expérimentales .. ...... .. .......................................... 14
2.5. 1. Mil icu de culture .. .... ...... .......................................................................... 14
2.5.2. Détcrmination de la do sc bactéricnnc pour la balnéatioll .. .. ..................... 14
2.5.3. La balnéation .............................
.. .. .. .............. .. .. .. .. ................................... 14
2.6. ANALYSE STA TJSTI QUE DES RESULTATS .......... .. ................................ 15
3. RES UL TA TS ...................................... .. .............................. ................................... 16
3.1.
Expé riences réalisées sur l'ammoniaque .......................... .. ............................. 16