Induction de l`endoderme pre-hepatique par le

/. Embryol. exp. Morph., Vol. 12, Part 4, pp. 651-664, December 1964
Printed in Great Britain
Induction de l'endoderme pre-hepatique par le
mesoderme de Faire cardiaque chez Tembryon
de poulet
par NICOLE LE DOUARIN1
Laboratoire d'Embryologie experimentale du College de France
Directeur: Professeur Et. Wolff
AVEC DEUX PLANCHES
DANS des travaux anterieurs (Le Douarin, 1961, 1962) j'ai localise les territoires
presomptifs du foie chez l'embryon de Poulet de 9 a 15 somites. Ces territoires
s'etendent de part
et d'autre de l'axe somitique jusqu'au niveau du 15eme somite
environ et se reunissent sur la ligne medioventrale dans le repli cardiaque.
L'etude des potentialites histogenetiques des differentes regions de ces aires
hepatiques a montre que seules les parties contenant le repli cardiaque peuvent
fournir
du foie lorsqu'elles sont isolees et transplantees en greffes coelomiques
(Le Douarin, 1964). II est apparu ainsi que le territoire presomptif endodermique
du foie n'est pas aussi etendu que
le territoire mesodermique. II est localise des
un stade precoce dans
la levre anterieure de l'ombilic intestinal (Text-fig. 1).
Au stade de 20 a 22 somites, la premiere ebauche hepatique apparait dans la
levre anterieure de l'ombilic intestinal sous la forme d'une evagination de
l'endoderme (Keibel et Abraham, 1900; Brouha, 1898; Choronshitzky, 1900;
Hildebrandt, 1902; Kingsbury, Alexanderson et Kornstein, 1956). Cette
evagination donne, peu apres, naissance a deux bourgeons epitheliaux qui, par
rapport au ductus venosus, sont l'un cranial et l'autre caudal. C'est a partir de
ces bourgeons que se formeront les travees de cellules hepatiques qui envahissent
les villosites mesodermiques du septum transversum.
J'ai montre qu'il est possible d'isoler experimentalement une partie du mesen-
chyme hepatique en empechant son invasion par
les travees de cellules epitheliales
endodermiques (Le Douarin, 1962, 1963, 1964). J'obtiens ce resultat en placant
un obstacle mecanique transversal dans la partie anterieure du territoire presomp-
tif du mesenchyme hepatique chez des embryons de
9 a 13 somites.
Ayant ainsi isole
la composante mesodermique de l'ebauche du foie, j'ai pu
etudier son role dans l'organogenese hepatique et en particulier dans revolution
1Adresse
de Vauteur: Laboratoire d'Embryologie experimentale, College de France,
49 bis Avenue de la belle Gabrielle, Nogent-sur-Marne, France.

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N. LE DOUARIN
de l'endoderme (Le Douarin, 1963, 1964): le mesenchyme hepatique exerce une
double action sur l'ebauche epitheliale du foie en stimulant la proliferation de
ses cellules et en induisant leur differentiation en hepatocytes. Cependant, le
mesenchyme propre du foie ne peut exercer cette action inductrice que sur un
territoire endodermique deja determine. En effet, il
s'est revele incapable d'induire
la formation de cellules hepatiques a partir de fragments d'endoderme digestif
ou vitellin preleve chez des embryons de 10 a 20 somites.
aire presomptive du
:.•.•.•• mesenchyme hepatique.
MM» Endoderme
$w$ hepatique.
TEXT-FIG. 1. Embryon de 15 somites en vue ventrale montrant la repartition des aires
presomptives endodermique et mesodermique du foie.
J'ai cherche a quel stade et sous quelle influence s'effectue la determination
de l'endoderme hepatique.
I. Potentialites
histogenetiques de Vendoderme hepatique presomptif a diffirents
stades du
developpement
METHODE
Pour savoir si un fragment d'endoderme est determine a fournir du foie, je le
greffe dans l'aire presomptive du mesenchyme hepatique chez un embryon de

induction de V endoderme pre-hepatique
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9 a 13 somites. La greffe est effectuee en arriere d'un obstacle place vers le tiers
anterieur de l'aire hepatique laterale droite. Cet obstacle empeche l'invasion
du mesenchyme de Phote par ses propres travees endodermiques. Dans des
experiences anterieures j'avais utilise un fragment de membrane coquilliere
inseree dans un fente transversale interessant les trois feuillets embryonnaires.
Cette methode entraine un fort pourcentage de mortalite, c'est pourquoi j'ai
Z.F.
Z.exc.
Z.M.H.
TEXT-FIG. 2. Schema de l'intervention pratiquee sur un embryon de 12 somites en vue d'obtenir
le developpement du mesenchyme hepatique depourvu de cordons epitheliaux. Une
partie de l'aire laterale est excisee (Z. exc.) du cote droit au niveau des somites 3 a 6. Cette
excision joue
le role d'un obstacle. En arriere de la region operee, l'endoderme dont on veut
eprouver les potentialites histogenetiques est greffe (Gr.), il se developpe au contact du
mesenchyme hepatique de l'hote. Z.F. = zone ou le foie se differencie.
cherche a lui substituer un procede permettant d'obtenir une meilleure survie des
embryons. J'excise un fragment rectangulaire de l'aire pellucide dans la region
anterieure droite du territoire hepatique. Ce fragment s'etend de l'axe somitique
a l'aire opaque au niveau des somites 3 a 6 (Text-fig. 2). Chez
1'embryon de 5
jours d'incubation, on peut voir que la cicatrisation a provoque la soudure des
trois feuillets embryonnaires au niveau des levres de la plaie. Les mouvements
morphogenetiques de ces feuillets ont ete arretes, et la blessure a joue le role
d'un obstacle. Ainsi, le repli cardiaque ne
se deplace pas vers l'arriere, et l'intestin
anterieur reste ouvert ventralement jusqu'a l'ombilic intestinal. Le foie se forme

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du cote non opere et, du cote opere, le mesenchyme hepatique reste vide
(Planche 1, Figs. A, B et C). L'endoderme hepatique ayant besoin pour evoluer
d'etre associe a du mesenchyme homologue,
les fragments endodermiques dont on
veut eprouver les potentialites en ce qui concerne l'histogenese hepatique sont
greffes en arriere du niveau de l'ablation.
Deux series experimentales ont ete realisees.
1. L'endoderme du repli cardiaque est preleve chez des embryons de 16 a 5
somites.
2. L'endoderme est preleve dans les aires hepatiques presomptives bilaterales
aux stades du prolongement cephalique et du repli cephalique transverse.
Association au mesenchyme hepatique de Vendoderme du repli cardiaque
d'embryons de 16 a 5 somites
L'endoderme hepatique est localise, des un stade precoce du developpement,
dans la levre anterieure de l'ombilic intestinal. Au stade de 21 somites, auquel
debute l'organogenese du foie, nous savons deja qu'il est apte a reagir a l'influence
morphogene du mesenchyme propre du foie en se differenciant et en proliferant.
Je me suis demande s'il possede deja cette propriete a des stades plus precoces.
Le repli cardiaque preleve chez des embryons de 5 a 16 somites est soumis a
l'action de la trypsine (solution a
1 % dans du liquide de Tyrode depourvu de
calcium et de magnesium) pendant 20 min. a la temperature de 2°C. environ.
Ainsi l'endoderme se decolle du mesenchyme sous-jacent. II est ensuite greffe
dans le territoire du mesenchyme hepatique chez un embryon de 10 a 13 somites.
L'examen histologique est pratique au 5eme jour de l'incubation de l'hote.
Les resultats obtenus sont indiques dans le Tableau 1. On voit que sur 23 cas
2 seulement n'ont pas fourni de foie. L'examen histologique de ces deux exemp-
PLANCHE 1
FIG. A. Coupe transversale d'un embryon de 5 jours d'incubation. Une aire laterale (du
cote droit) a ete enlevee au niveau des somites
3 a 6 au stade de 10 somites. La coupe passe
au niveau de l'ablation. On voit que la splanchnopleure dans laquelle
s'est differencie le
gesier (G.) s'est soudee (en S.) a la somatopleure. Le foie (F.) et le poumon (Po.) ne se sont
formes que du cote non opere. Le coeur (Co.) est place a gauche. La cavite coelomique
gauche est divisee en cavite hepato-enterique (C.H.E.) et pleuro-peiitoneale (C.p.p.).
FIG. B. Meme embryon: au-dessous du niveau de l'ablation, le mesenchyme hepatique
(M.H.) reste vide de cordons epitheliaux. P.d. = pancreas dorsal. B.H. = Bourgeon
hepatique. C.Coe. = Cavite coelomique. Autres abreviations, comme precedemment.
FIG. C. Mesenchyme hepatique (M.H.) vu a un plus fort grossissement. E. Coe = Epithelium
coelomique. t.m. = travees mesenchymateuses. S.S. = sinus sanguins. Mes. = meso-
nephros.
FIG. D. Mesenchyme hepatique (M.H.) colonise par les cordons epitheliaux de foie (C.H.)
issus d'un fragment d'endoderme pre-hepatique greffe dans l'aire presomptive du foie chez
un embryon de 10 somites, en arriere de la zone excisee. (Le schema experimental est
represente sur la figure 4 du texte). Cet endoderme etait accompagne de cellules du meso-
derme precardiaque qui ont suffi a l'induire, et a partir desquelles s'est developpe un nodule
de tissu cardiaque (T.C.).

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