amplide x - Theradiag

Theradiag propose un
nouvel outil de biologie
moléculaire performant
permettant de diagnostiquer
les patients porteurs de
répétitions CGG anormales
sur le gène FMR1.
AMPLIDE X™
Génétique
Une méthode
R A P I D
R A P I D E E
S I M P L
S I M P L E E
F I A B L
F I A B L E E
de diagnostic
du syndrome
de l’X fragile
Diagnostic des pathologies liées à l’X

PATHOLOGIES LIÉES AU GÈNE FMR1
(CGG)n Mutation Transmission
<45 Normal Pas de phénotype particulier.
45-54 Intermédiaire Instabilité possible lors de la transmission.
Conseil génétique indiqué.
55-200 Pré-mutation Instabilité lors de la transmission.
Risque d'évolution vers une mutation complète.
Conseil génétique indiqué.
>200 Mutation complète Instabilité lors de la transmission.
Risque de transmission de la mutation complète.
Conseil génétique indiqué.
Le syndrome de l’X fragile (FXS)
 Chez les patients porteurs d’une mutation complète (plus de 200 répétitions).
 Ce syndrome se caractérise par un retard mental plus ou moins important, des
troubles autistiques et des problèmes émotionnels et psychiatriques.
 Premier syndrome génétique connu associé à un retard mental et à l’autisme.
3 millions d’européens de tous âges sont touchés par une pathologie liée au gène FMR1
situé sur le chromosome X.
Ces pathologies se caractérisent par des répétitions anormales du codon CGG sur le gène
FMR1.
Insuffisance ovarienne prématurée liée à l'X fragile (FXPOI)
 Chez les patientes portant une pré-mutation (entre 55 et 200 répétitions).
 Cause majeure de dysfonctionnement ovarien.
Syndrome d’ataxie et de tremblement lié à l’X fragile (FXTAS)
 Chez les patients porteurs d’une pré-mutation (entre 55 et 200 répétitions).
 Associé à une démence et à un syndrome parkinsonien après 50 ans.

UNE TECHNIQUE RAPIDE ET SIMPLE EN 3 ÉTAPES
Méthode moléculaire basée sur :
 L’amplification par PCR.
 L’électrophorèse capillaire.
 L’analyse par le logiciel GeneMapper®.
Durée moyenne de 10 heures pour un temps
de manipulation réduit.
AMPLIFICATION PERFORMANTE DU GÈNE FMR1
Un programme de PCR permettant d’amplifier jusqu’à 1300 répétitions CGG.
Deux PCR au choix :
 Une PCR classique permettant d’amplifier le gène FMR1 grâce à deux amorces (sens et
anti-sens).
 Une seconde intégrant une troisième amorce CGG permettant de détecter les insertions
de codon AGG, facteur pronostic positif de la stabilité du gène.
Faible quantité d’ADN nécessaire : 20-80 ng.
Possible sur différents thermocycleurs : ABI 9700, ABI Veriti, MJ PTC-200, Mastercycler
d’Eppendorf, Biometra, Biorad C1000.
ADN extrait Temps de manipulation
Temps instruments
PCR FMR1 EC* Analyse
30 min 30 min 30-60 min
6 hrs 1-6 hrs
* Electrophorèse Capillaire
Total: environ 10 heures
Sang total
AMPLIFICATION JUSQU’À 1300 CGG ET QUANTIFICATION PRÉCISE DES RÉPÉTITIONS JUSQU’À 200 TRIPLETS
DÉTERMINATION DE LA ZYGOTIE CHEZ LES PATIENTES
IDENTIFICATION DES TRIPLETS AGG INTERCALÉS
UTILISATION DE QUANTITÉS RÉDUITES D’ADN (20-80 NG)
SENSIBILITÉ ANALYTIQUE DE L’ORDRE DE 1%
TEMPS DE MANIPULATION RÉDUIT (DE L’ORDRE DE 10H DONT 2H DE TEMPS TECHNICIEN)
POSSIBILITÉ DE S’AFFRANCHIR DU SOUTHERN BLOT
7 POINTS CLÉS

Theradiag SA:
4-6 bd de Beaubourg
CS 90136 CROISSY BEAUBOURG
77435 MARNE LA VALLEE CEDEX 2
Tel: [phone]
Fax: [phone]
email: [email protected]om
http://www.theradiag.com/
Référence Désignation Conditionnement Technique
ASU 76008 Amplide X FMR1 100 tests
EVALUATION DE LA TAILLE DES AMPLICONS PAR ÉLECTROPHORÈSE CAPILLAIRE
L’électrophorèse capillaire permet d’évaluer précisément la taille des fragments amplifiés
jusqu’à 200 répétitions et de détecter les mutations complètes.
Réalisable sur ABI 3130(xl), ABI 3500(xl), ABI 3730(xl) sur des capillaires de 36 ou 50 cm
(POP7 requis).
INTERPRÉTATION FIABLE DES RÉSULTATS
Analyse simplifiée sur le logiciel GeneMapper®, permettant la détection de la zygotie chez
les femmes.
Détection des mutations dites en mosaïque.
Sensibilité analytique de l’ordre d’1% en dilution supérieure au southernblot.
Exemple de pré-mutations en « mosaïque »
accompagnées d’une mutation complète
chez une patiente hétérozygote.
Exemple d’une patiente hétérozygote présentant
une mutation complète. Visualisation des codons
AGG intercalés.
ASU76008 - V.01/2013
Asuragen Inc (USA)
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