La microscopie optique SARRAZIN Pauline MEHIDI Mohamed El Amine GIRARDEAU Paul
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La microscopie optique SARRAZIN Pauline MEHIDI Mohamed El Amine GIRARDEAU Paul Bordeaux le 18 octobre 2010 I Rappels de bases I Rappels de bases Propriétés physique de la lumière Onde électromagnétique 380nm 780nm Phase Amplitude (t) I Rappels de bases Optique géométrique n1 n2 i1 Réfraction i2 Lois de Snell-Descartes n1 sin i1 = n2 sin i2 I Rappels de bases Optique géométrique Oculaire Objectif B A A’’ Fim F’im A’ B’ B’’ II Microscopie optique en lumière transmise Les éléments du microscope L’oculaire Des objectifs Vis macrométrique et micrométrique Le condenseur Diaphragme de champ Une source de lumière blanche II Microscopie optique en lumière transmise Numerical aperture (NA) Huile α Objectif 2 α = ouverture angulaire NA = n sinα n = indice de réfraction dans lequel se trouve la lentille (neau = 1,33 nhuile = 1,56) II Microscopie optique en lumière transmise Le contraste de phase λ λ/4 λ/2 II Microscopie optique en lumière transmise Le contraste interférentiel différentiel Polarisateur Prisme de Wollaston Prisme de Wollaston Polarisateur III Microscopie optique à fluorescence Le diagramme de Jablonski S’1 S1 S0 Dissipation d'énergie hνEX hνEM λEM>λEX III Microscopie optique à fluorescence Les éléments du microscope Filtre d’émission Miroir dichroïque Filtre d’excitation Lampe à mercure Déplacement de Stokes Type de microcopie Avantages -Utilisation simple Microscopie optique -Rapide en lumière transmise classique Limites -Résolution(100nm) -Les aberrations liées aux lentilles Le contraste de phase -Cellules vivantes -Aucune coloration -Pas de fluorophores ( non destructif) -Résolution(100nm) -Les aberrations liées aux lentilles Le contraste interférentiel différentiel -Cellules vivantes -Aucune coloration -Pas de florophores (non destructif) -Résolution(100nm) -Les aberrations liées aux lentilles -Prise en main facile Microscopie optique -Acquisition rapide -FRAP/FRET à fluorescence -Traitement image -Bleaching -Quenching -Les aberrations liées aux lentilles
