Énergie - Mitochondries
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PRESENTATION DE LA CELLULE PROCARYOTE (pas de noyau) EUCARYOTE (noyau) Echelle Les Dimensions valeur (en notation scientifique) Sous-multiples du mètre préfixe Millième m illi 10 Millionième m icro 10 Milliardième nan o 10 Millième de milliardième p ico 10 -3 -6 -9 - 12 Symbole m µ n p Procaryotes Eucaryotes Caractéristiques: Pas de membrane nucléaire Pas d’organites Caractéristiques: Membrane nucléaire Organites (membrane) Bâtonnets Coques Bactéries Extrémophiles Endosymbiose: origine des eucaryotes 1.7 million d’années • Mitochondries Autorépicatives circulaire ADN comme les bactéries. • Procaryote aurait été ingéré par Eucaryote primitif • Symbiose La Cellule Animale La Cellule Végétale Taille d'éléments cellulaires Cellules 10-30 µm n Noyau 5-10 µm n Mitochondries 1-4 µm n Ribosomes 15-20 nm n Microtubules 24 nm n Microfilaments 8 nm n Membranes 5-10 nm n Protéines filamenteuses (collagène) 100 nm n Protéines globulaires (myoglobine) 3-4 nm n Double hélice d'ADN 2 nm n Atome d'hydrogène 0.1 nm n Théorie cellulaire Schleiden - Schwann (1839) • La cellule est la plus petite entité vivante. • Tout être vivant est composé de cellules. • Toute cellule provient d'une autre cellule. 1884 Premier périodique Sur la cellule NOTIONS DE BASE THERMODYNAMIQUE CHIMIE BIOCHIMIE Physique Chimie Cytologie Histologie Biologie Cellulaire Techniques de biologie cellulaire • Microscopie optique - Lumière visible • (classique, contraste de phase, confocale Immunofluorescence - ) - Lumière Monochromatique • Immunohistochimie (microscopie) • Microscopie électronique (transmission et balayage) • Séparation d'éléments cellulaires • Cultures de cellules • Marquages par isotopes radioactifs • ..... TECHNIQUE LA MICROSCOPIE Robert Hooke 1665 Cellule Micrographia (recueil de dessins où apparaît pour La première fois le mot « Cellule » Antonie Van Leeuwenhoek 1673 À nouvel instrument, " nouvel Univers ", Huygens Contraste de Phase - Principe Préparation tissulaire et cellulaire 1 Fixation : Préservation de la structure et de l'architecture de la cellule ou du tissus suivi d ’une coloration. Agents chimiques : formol, acétone Agent physique : congélation azote liquide à -180° C 2 Inclusion : Donne aux pièces la rigidité nécessaire à la coupe (Paraffine) Déshydratation par bain d ’Alcool, Toluol (car paraffine n'est pas miscible dans l'alcool) 3 Coupe : Permet l ’observation au microscope microtome de 1 à 8 µm ultratome de 0.02 à 0.1 µm (Microscopie électronique) cryostat pour préparation congelée Microscopie électronique Principe Diminution limite de séparation entre deux points par la diminution de la longueur d’onde ( utilisation des électrons à la place des photons) Microscopie électronique • Principe: – Agrandissement par utilisation de lentilles électromagnétiques et d'un faisceau d'électrons: résolution 0.2 nm • Fixation – Glutaraldéhyde et tétroxyde d'osmium • Inclusion et coupes – Résines époxy – Ultramicrotomes (coupes de 25 à 100 nm) • Colorations aux métaux lourds – a)Acétate d'uranyle, citrate de plomb Microscopie à Fluorescence Immuno- Fluorescence Mitochondries (Rouge) Noyau (Bleu) Cytosquelette (vert) Deux types de microscope électronique • Transmission • Balayage • Identique au microscope photonique, faisceau d’ électrons au travers d’un spécimen • Électrons diffractés • Électrons pase au travers de l’échantillon et frappe un écran fluorescent • Excellente résolution • Résolution moins bonne • Images en relief Microscopie Electronique (Cryodécapage) TECHNIQUES PRÉPARATION DES TISSUS Coloration Microscopie Photonique les colorants acides : éosine orange les colorants basiques : hématoxyline et bleu de toluidine Microscopie Electronique imprégnation métallique par des sels de métaux lourds Microscope à Fluorescence Réaction immunologique à l ’aide d ’Anticorps marqué par une substance fluorescente
