informations complémentaires

Stage proposé par Odile MULNER-LORILLON
Directeur de Recherche CNRS, HDR
Nom et adresse du Laboratoire ou de l’Unité :
UMR Mer&Santé CNRS/UPMC 7150
Station Biologique
29250 ROSCOFF
Téléphone : 02 98 29 23 66
Mail : [email protected]
Site internet : http://www.sb-roscoff.fr/CCD/
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Patrick CORMIER
Intitulé de l ‘équipe d’accueil : Equipe Traduction, Cycle Cellulaire et Développement
Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Patrick CORMIER
Résumé du thème de recherche de l’équipe
La thématique de recherche de l'équipe est l’étude de la régulation de l’expression des gènes
au niveau de la traduction au cours du développement précoce. L’objectif est de caractériser les
mécanismes moléculaires qui coordonnent la traduction des ARN messagers en protéines avec le
déroulement des cycles cellulaires après la fécondation. Nous utilisons l'embryon d'oursin qui est
historiquement un modèle de choix à la fois pour l'étude du développement embryonnaire et celle des
mécanismes moléculaires de la régulation traductionnelle de l'expression des gènes (Mathews et al.
2007, in Translational control in biology and medecine, CSH Press, NY, pp369-400). Nous avons
obtenu des résultats originaux sur l’implication de modifications quantitatives (ex : dégradation) et
qualitatives (ex : phosphorylation) de facteurs de traduction et de leur régulateurs dans la régulation de
la lecture des messagers (recrutement et traduction).
Titre du projet de stage : Régulation de l’expression des gènes et division cellulaire chez
l’embryon d’oursin
Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage:
Odile MULNER-LORILLON, 02 98 29 23 37, [email protected]
Projet de stage :
Un acteur clé de la régulation de la traduction est le facteur d’initiation eIF4E (eukaryotic
Initiation factor 4E) responsable du recrutement des messagers sur les polysomes. Il est couramment
admis que l’activité d’eIF4E est régulée principalement par sa séquestration par des protéines
inhibitrices, les 4E-BPs (eIF4E-binding proteins), cibles majeures de voies de signalisation cellulaire
comme l’axe PI3K/Akt/mTOR (Sonenberg and Hinnebush 2009 Cell 136, 731-45). De plus, notre
équipe a démontré un rôle critique de la dégradation de 4E-BP pour libérer eIF4E et induire la reprise
de l’activité de synthèse protéique dans les embryons après la fécondation (revue Oulhen et al 2007 J.
Soc. Biol. 201, 297-306). Parallèlement, un rôle de la phosphorylation d’eIF4E par les kinases Mnks
(mitogen-activated protein kinases (MAPK)-interacting kinases) dans la fonction de eIF4E a été
largement documenté, mais reste encore inexpliqué et parfois controversé. Nous avons des résultats
préliminaires indiquant l’existence dans l’embryon d’oursin d’un pool de eIF4E phosphorylé après la
fécondation. De plus, nos travaux ont mis en évidence que le CGP57238, un inhibiteur de Mnk,
empêche de façon reproductible le déroulement de la première division après fécondation. L’objectif
du stage est de caractériser précisément l’action du CG 57238 sur la phosphorylation de eIF4E et son
effet sur la synthèse protéique au cours de la première division de l’embryon.
Les résultats obtenus permettront de préciser le rôle de Mnk et/ou de la forme phosphorylée
de eIF4E dans les mécanismes de régulation de la synthèse protéique. Compte tenu que eIF4E est
reconnu comme un véritable oncogène et qu’une activation anormale de la protéine a été impliquée
dans les mécanisme de transformation maligne des cellules et dans le développement et la
progression des cancers, nos recherches auront des retombées majeures dans le domaine de la
recherche conter le cancer.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire :
Les recherches feront appel à des approches en biologie cellulaire (suivi de cinétique de
division cellulaire en présence de l’inhibiteur à différentes doses et à différents moments après
fécondation, suivi des cellules en immunofluorescence, microinjection des embryons, ….), à des
approches biochimiques (étude de la phosphorylation de protéines par immunorévélation ou marquage
radioactif, suivi de la synthèse protéique in vivo ou en en lysat, ) à des approches de biologie
moléculaire (production des protéines d’intérêt sauvages ou mutantes sur les sites remarquables,
identification de messagers recrutés sur les polysomes par Q-PCR et Northern blot ).
Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années :
- LE BOUFFANT, R., CORMIER, P., CUEFF, A., BELLE. R. and MULNER-LORILLON, O. (2007). Sea
urchin embryos as a model for analysis of the signaling pathways linking DNA damage checkpoint, DNA repair
and apoptosis. Cell. Mol. Life Sci., 64, 1723-1734.
- BELLE, R., LE BOUFFANT, R., MORALES, J., COSSON, B., CORMIER, P. and MULNER-LORILLON, O.
(2007). Sea urchin, DNA-damaged cell cycle checkpoint and the mechanism at the origin of cancer development.
J. Soc Biol., 201, 317-327.
- OULHEN, N., MORALES, J. COSSON, B., MULNER-LORILLON, O. BELLE AND CORMIER, P. Gene
expression regulation at the translational level: contribution of marine organisms. J. Soc. Biol, 201, 297-306.
- SAAD, H. BELLE, R., MORALES, J., COSSON, B. MULNER-LORILLON, O., BERTHOU, C. AND
CORMIER, P. Initiation factors 4 : from sea urchin embryonic development to chronic lymphocytic leukemia. J.
Soc. Biol, 201, 307-315.
- LE BOUFFANT, R, MULNER-LORILLON, O., MORALES, J., CORMIER, P. and BELLE, R. (2008).
Chromium(III) triggers the DNA-damaged checkpoint of the cell cycle and induces a functional increase of 4EBP. Chem Res Toxicol, 21, 542-549
- LE BOUFFANT, R. L., BOULBEN, S., CORMIER, P., MULNER-LORILLON, O., BELLE, R., AND
MORALES, J. (2008). Inhibition of translation and modification of translation factors during apoptosis induced
by the DNA-damaging agent MMS in sea urchin embryos. Exp Cell Res 314, 961-968
- OUHLEN, N., MULNER-LORILLON, O. and CORMIER, P. (2010) eIF4E-binding proteins are differentially
modified after ammonia versus intracellular calcium activation of sea urchin unfertilized eggs. Mol. Reprod.
Develop., 77, 83-91
- BELLE, R., PLUCHON, P-F., CORMIER, P. and MULNER-LORILLON, O. (2011) Identification of a new
isoform of eEF2 whose phosphorylation is required for completion of cell division in sea urchin embryos.
Develop. Biol., 350, 476-483.
- BRUNEEL, A. WENDUM, D., LABAS, V., MULNER-LORILLON, O., VINH, J., BOSSELUT, N.,
BALLOT, E., BAUDIN, B., HOUSSET, C., DABERNAT, S., LACOMBE, M-L. and BOISSAN, M. (2011)
Proteomic analysis of NME1/NDPK A null mouse liver : evidence for a post-translational regulation of annexin
IV and eEF1Bα. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 384, 407-19.
- BELLE, R., MARC, J., MORALES, J. P CORMIER, P. and MULNER-LORILLON, O. Letter to the Editor :
Toxicity of Roundup and Glyphosate. J. Toxicol. Environ. Health, B Crit Rev. 15, 233-237.
Autres informations:
Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez
le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement
Thèse
GOSSELIN
Pauline
Patrick CORMIER /Bertrand
COSSON
2009- soutenance en
octobre 2012
ED Complexité du Vivant
UPMC
Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des
six dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de l’étudiant, l’année
du début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le devenir de l’étudiant.
Nom et Prénom de
l’étudiant
Nom du responsable
Année
d’inscription
M2
SAAD Hussam
Patrick CORMIER
2005-2006
M2
GIRARD
Julia MORALES
2006-2007
Anne
Université
M2 Biologie-Santé
Versailles/StQuentin
BMC UPMC
Devenir
Thèse UMR7150
Thèse
M2
Claire
COSTACHE
Vlad
GOSSELIN
Pauline
PLUCHON
Pierre-François
MASSE Maxime
M2
SULTAN Laure
Odile
MULNER_LORILLON
2010-2011
Thèse
Le BOUFFANT
Ronan
OUHLEN
Nathalie
SAAD Hussam
Odile
MULNER_LORILLON
Patrick CORMIER
2004-2007
ED VAS Rennes I
MC Paris VI
2005-2008
ED VAS Rennes I
Post Doc USA
Patrick CORMIER
2006-2010
ED VAS Rennes I
COSTACHE
Vlad
Julia MORALES
2008-2011
Sciences Mer et
Littoral UBO
Praticien Hospitalier,
CHU Brest
Thèse UMR7150
M2
M2
M2
Thèse
Thèse
Thèse
Patrick CORMIER
2007-2008
Bertrand COSSON
2008-2009
Odile
MULNER_LORILLON
Bertrand COSSON
2008-2009
2008-2009
Sciences Mer et
Littoral UBO
Magister Génomique
Paris VII
BMC Paris VI
Thèse UMR7150
Master Pro
Génétique,Génomique
Biotechnologie UBO
M2 Reproduction et
Développement Paris
VII
Ingénieur
Thèse UMR7150
Thèse IFREMER
Thèse ISRAEL
Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin
ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ?
Spécifiquement un scientifique, médecin ou vétérinaire
Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ?
oui