Stage proposé par Nom et adresse du Laboratoire ou de l’Unité

Stage proposé par
Nom et adresse du Laboratoire ou de l’Unité : UMR-S 1139 « physiopathologie et
pharmacotoxicologie placentaire humaine » Université Paris Descartes
Faculté de pharmacie, 4 avenue de l’observatoire 75006 Paris
Téléphone : 01 53 73 96 00
Mail : [e-mail]
Site internet :
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Dr Thierry Fournier
Intitulé de l ‘équipe d’accueil : Fonctions endocrines du placenta humain
Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Pr Jean Guibourdenche
Résumé du thème de recherche de l’équipe (une dizaine de lignes maximum)
Notre objectif général est d´accroître les connaissances sur la formation et les fonctions du placenta
humain afin d´améliorer le dépistage précoce (biomarqueurs) et la prise en charge des grossesses
pathologiques résultant une dysfonction placentaire d’origine endogène ou exogène.
Nos recherches sont ciblées sur l´étude du développement de la villosité choriale (unité structurale et
fonctionnelle du placenta humain) et de ses fonctions principalement endocrines qui évoluent au cours
de la grossesse. Nous nous focalisons sur le tissu spécifique de cette villosité, le trophoblaste et plus
particulièrement le trophoblaste endocrine, à savoir le cytotrophoblaste villeux qui se différencie en
syncytiotrophoblaste. Notre objectif est de caractériser l’ontogénèse du trophoblaste endocrine, les
mécanismes régulant son développement et son évolution au cours da la grossesse. Nous nous
intéressons à la modulation de ses fonctions endocrines tant physiologiques (flux sanguin dans la
chambre intervilleuse, shear stress, oxygénation…) que pathologique (toxiques, perturbateurs
endocriniens, traitements maternels...)
Titre du projet de stage : Effet des traitements anti-diabétiques (insuline, antidiabétiques oraux)
sur la fonction endocrine placentaire in vitro
Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail des Responsables du stage:
Jean Guibourdenche, tel : [phone], [e-mail]
Marilyse Herbert-Schuster tel [phone] [e-mail]
Projet de stage : (une vingtaine de lignes maximum)
Le placenta est un organe situé à l’interface du fœtus et de la mère qui assure différentes fonctions
notamment endocrines caractérisées par la production d’hormones stéroïdes (progestérone et
estrogènes) et protéiques (hCG, leptine, hormone de croissance placentaire). Cette activité endocrine
est assurée par le cytotrophoblaste villeux (CTV) et plus particulièrement le syncytiotrophoblaste (ST)
(Cronier et al, 1999). Elle est indispensable au maintien de la grossesse (actions utérines de l’hCG et
la progestérone), et à l’adaptation métabolique maternelle à la grossesse (estrogènes, leptine,
hormone de croissance placentaire). In vivo, on a observé des concentrations anormales de ces
hormones en cas de diabète maternel (Fatima SS et al, 2016) et une augmentation du risque de
fausse couche spontanée chez les mères traitées par certains anti-diabétiques oraux comme la
metformine. In vitro, la metformine est décrite comme perturbant la stéroïdogénèse des tissus
gonadiques (Tosca L et al, 2007 ; Hirsch et al, 2012) et l’insuline comme modulant la production des
protéines hormonales placentaires qui est de plus perturbée en cas de diabète maternel (Mnadi M et
al, 2002 ; Lappas M et al, 2005 ; Pérez-Pérez A et al, 2013).

L’objectif de ce travail est de caractériser in vitro les altérations fonctionnelles du tissu trophoblastique
endocrine induites par ces traitements (effet de l’insuline et de la metformine sur la synthèse et la
sécrétion des hormones stéroïdiennes et protéiques placentaires) puis d’en explorer les mécanismes
cellulaires sous-jacents.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire : culture cellulaire (culture primaire, lignées
trophoblastiques) ; dosages d’activité enzymatique intracellulaire, western blot ; immuno-histologie,
RT-qPCR ; ARNi ; étude du sécrétome (dosages immunologiques, LCMS/MS, HPLC)
Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années :
-Fournier T, Guibourdenche J, Evain-Brion D. Review: hCGs: different sources of production, different
glycoforms and functions.Placenta. 2015;36:S60-5.
-Barbaux S, Erwich JJ, Favaron PO, Gil S, Gallot D, Golos TG, Gonzalez-Bulnes A, Guibourdenche J,
Heazell AE, Jansson T, Laprévote O, Lewis RM, Miller RK, Monk D, Novakovic B, Oudejans C, Parast
M, Peugnet P, Pfarrer C, Pinar H, Roberts CT, Robinson W, Saffery R, Salomon C, Sexton A, Staff
AC, Suter M, Tarrade A, Wallace J, Vaillancourt C, Vaiman D, Worton SA, Lash GE. IFPA meeting
2014 workshop report: Animal models to study pregnancy pathologies; new approaches to study
human placental exposure to xenobiotics; biomarkers of pregnancy pathologies; placental genetics
and epigenetics; the placenta and stillbirth and fetal growth restriction.Placenta. 2015 ; 36:S5-
-Aldaz-Carroll L, Richon S, Dangles-Marie V, Cocquebert M, Fournier T, Troalen F, Stevens D, Guery
B, Hersant AM, Guibourdenche J, Nordor A, Pecking A, Bellet D. Specific detection of type II human
chorionic gonadotropin beta subunit produced by trophoblastic and neoplastic cells. Clin Chim Acta.
2015 ;444:92-100.
-Leguy MC, Brun S, Pidoux G, Salhi H, Choiset A, Menet MC, Gil S, Tsatsaris V, Guibourdenche J.
Pattern of secretion of pregnancy-associated plasma protein-A (PAPP-A) during pregnancies
complicated by fetal aneuploidy, in vivo and in vitro.Reprod Biol Endocrinol. 2014 ;12:129-133
-Thomas-Schoemann A, Blanchet B, Boudou-Rouquette P, Golmard JL, Noé G, Chenevier-Gobeaux
C, Lebbe C, Pages C, Durand JP, Alexandre J, Goldwasser F, Guibourdenche J, Vidal M.Soluble
VEGFR-1: A new biomarker of sorafenib-related hypertension ?J Clin Pharmacol. 2014 ; 10.1002
-Dunand C, Hoffmann P, Sapin V, Blanchon L, Salomon A, Sergent F, Benharouga M, Sabra S,
Guibourdenche J, Lye SJ, Feige JJ, Alfaidy N.Endocrine gland-derived endothelial growth factor (EG-
VEGF) is a potential novel regulator of human parturition. Biol Reprod. 2014;91:73-78
-Pavlov N, Frendo JL, Guibourdenche J, Degrelle SA, Evain-Brion D, Badet J. Angiogenin expression
during early human placental development; association with blood vessel formation. Biomed Res Int.
2014: 781632
-Brun S, Leguy MC, Bruneel A, Fournier T, Anselem O, Guibourdenche J. hCG in screening for
aneuploidy: a possible role for its glycoforms?Placenta. 2014 ;35:425-427
-Libé R, Arlt W, Louiset E, Waintrop C, Guibourdenche J, Sibony M, Clauser E, Groussin L. A
feminizing adrenocortical carcinoma in the context of a late onset 21-hydroxylase deficiency. J Clin
Endocrinol Metab. 2014;99:1943-1944
-Seror J, Amand G, Guibourdenche J, Ceccaldi PF, Luton D. Anti-TPO antibodies diffusion through the
placental barrier during pregnancy.PLoS One. 2014; 31: 9:e8464710.1371/journal.pone.0084647.
eCollection 2014.
-Luton D, Delezoide AL, Leguy MC, Gobeaux C, Vuillard E, Grangé G, Guibourdenche J. Foetal
serum but not urinary β2-microglobulin correlates with histological injury to the kidney. Clin Biochem.
2013;46:1607-1610
-Desgrelle SA, Guibourdenche J, Galland F, Bidard JM, Fournier T, Evain-Brion D. Iodide transporters
expression in early human invasive trophoblast. Placenta 2013 ; 34 : 29-34.

-Sibiude J, Guibourdenche J, Dionne MD, Le Ray C, Anselem O, Serreau R, Goffinte F, Tsatsaris V.
Circulating PlGF for the prediction of preeclampsia and adverse outcomes in patients with suspected
preeclampsia or intrauterine growth restriction. PloS One 2012; e50208
-Luton D, Azria E, Polak M, Carré A, Vuillard E, Delezoide AL, Guibourdenche J. Thyroid function in
fetuses with Down syndrome. Horm Res Paediatr 2012; 78: 88-93.
-Baudry C, Coste J, Bou Khalil R, Silvera S, Guignat L, Guibourdenche J, Abbas H, Legmann P,
Bertagna X, Bertherat J. Efficiency and tolerance of mitotane in Cuching’s disease in 76 patients from
a single center. Eur J Endocrinol 2012; 167: 473-81.
-Coquebert M, Berndt S, Segond N, Guibourdenche J, Murthi P, Aldaz-Carroll L, Evain Brion D.
Fournier T. Comparative expression of hCG - genes in human trophoblast from early and late first-
trimester placentas. Am J Physiol Endocrinol Metab 2012; 303: E950-8.
-Ceccaldi PF, Saada J, Nicolas M, Ducarme G, Blot P, Guibourdenche J, Luton D. Modulation of free
corticotrophin-releasing hormone, adrenal and placental steroid hormone levels induced by
mifepristone during pregnancy. Fetal Diagn Ther 2012; 32: 267-70.
-Pidoux G, Gerbaud P, Cocquebert M, Segon N, Badet J, Fournier T, Guibourdenche J, Evain-Brion
D.Human trophoblast fusion and differentiation : lessons from trisomy 21 placenta. Placenta. 2012;
-Gallot D, Goffinet F, Sapin V, Guibourdenche J, Jouannic M, Langer B, Doret M, Subtil D, Fernandez
H. Comment and reply on : guidelines for the management of spontaneous preterm labor:
identification of spontaneous preterm labor, diagnosis of preterm premature rupture of membranes,
and preventive tools for preterm birth. J Maternal Fetal Neonatal Med. 2011.
-Libé R, Fratticci A, Lahlou N, Jornayvaz FR, Tissier F, Louiset E, Guibourdenche J, Vieillefond A,
Zerbib M, Bertherat J. A rare cause of hypertestoteronemia in a 68 yera old patient : a leydig cell
tumor due to a somatic GNAS activating mutation. J Androl. 2011; s10
-Gerbaud P, Pidoux G, Guibourdenche J, Pathirage N, Costa JM, Badet J, Frendo JL, Murthi P, Evain-
Brion D. Mesenchymal activin A reverses abnormal trisomy 21 trophoblast fusion and differentiation.
Endocrinology. 2011; 152: 5017-28.
-Bou Khalil R, Baudry C, Guignat L, Carrasco C, Guibourdenche J, Gaillard S, Bertagna X, Bertherat
J. Sequential hormonal changes in 21 patients with recurrent Cushing’s disease after successful
pituitary surgery. Eur J Endocrinol. 2011; 165: 729-37.
-Luton D, Alberti C, Vuillard E, Ducarme G, Oury JF, Guibourdenche J. Iodine deficiency in the
northern Paris area : impact on fetal thyroid size. PLoS One. 2011; 6: 14707.
Autres informations:
Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez
le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement
Isabelle Hernandez : thèse de sciences 2015-2018 – ED Bio SPC – Pr JL Beaudeux
Hussein Shoaito : thèse de sciences 2015-2018 – ED Bio SPC – Dr T Fournier
Anne-Gael,Cordier : thèse de sciences 2015-2017 – ED Bio SPC – Pr S Gil
Edouard Lecarpentier : thèse de sciences 2012-2016 – ED GC2ID – Pr V Tsatsaris
Camille Fraichard : M2 2015-2016 - Pr Jean Guibourdenche
Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des
six dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de l’étudiant, l’année du
début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le devenir de l’étudiant.

Marie Clémence Leguy: M2 2009-2010 : Dr T Fournier, GC2ID, médecin
Laurent Vandenbroucke: M2 2010-2011 : Dr T Fournier, GC2ID, médecin
Vanessa Garnier: M2 2010- 2011 : Dr T Fournier, GC2ID, thèse (Grenoble)
Mélanie Cocquebert : M2 2008-2012 : Dr T Fournier, GC2ID, thèse de sciences
Audrey Menault: M2 2011-2012: Dr G Pidoux, GC2ID
Stephanie Brun: M2 2011-2012: Dr T Fournier, GC2ID, médecin
Jessica Saal: M2 2011-2012: Dr T Fournier, GC2ID, médecin
Alexandra Letourneau: M2 2011-2012: Dr T Fournier, GC2ID, médecin
Sabine Chauveau : M2 2012-2013 Dr. T. Fournier, GC2ID en thèse (Clermont)
Asma Omarjee : M2 2012-2013 : Dr. T. Fournier, GC2ID, médecin
Edouard Lecarpentier : Thèse de science 2012-2015 : Pr. V. Tsatsaris, GC2ID
Paul Berveiller : Thèse de science 2010-2014 : Pr. S. Gil, GC2ID
Sarah Veillefosse: M2 2013-2014 : Pr. V. Tsatsaris, GC2ID
Maud Brossard : M2 2013-2014 : Pr. S. Gil, GC2ID
Lola Vigouroux : M2 2013-2014 : Dr. G. Pidoux
Anthony Atallah : M2 2014-2015 : Pr V Tsatsaris
Arthur Jallet : M2 2014-2015 : Pr S Gil
Isabelle Hernandez : M2 2014-2015 : Dr A. Zerrad-saadi
Camille Fraichard : M2 2015-2016 : Pr J Guibourdenche
Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin
ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ?
Cette proposition de stage est ouverte à tous les profils (scientifique, sage-femme, médecin,
vétérinaire)
Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ?
A priori non

Projet de stage : (une vingtaine de lignes maximum)
Le placenta humain est un organe complexe dont la structure et les fonctions physiologiques
notamment endocrines évoluent au cours de la grossesse. Le trophoblaste et plus particulièrement le
syncytiotrophoblaste est un site actif de stéroïdogénèse. Il exprime également les principaux
récepteurs à ces hormones stéroïdiennes impliquées ainsi dans une régulation autocrine et paracrine
essentielle à son développement. Le placenta est cependant un organe endocrine incomplet qui
nécessite une coopération enzymatique entre le fœtus, le placenta et la mère, indispensable et qui
évolue tout au long de la grossesse. Dès les premières semaines, le placenta est ainsi la source
principale de progestérone, et d’œstrogènes (estrone [E1], estradiol [E2], estriol [E3]. Dans les
grossesses dont le fœtus est atteint de trisomie 21, la concentration sérique maternelle en E3 est
diminuée faisant de l’E3 un marqueur sérique maternel de trisomie 21 fœtale. L’origine de cette
diminution n’est toujours pas clairement établie et peu de données sont disponibles concernant d’une
part les autres aneuploïdies (trisomie 18 et 13) et d’autre part les autres stéroïdes (progestérone,
prégnénolone…).
L’objectif de notre projet est d’explorer in vitro chaque étape de la synthèse placentaire des
œstrogènes et des progestatifs au cours des grossesses normales mais aussi compliquées
d’aneuploidies fœtales et ce, à différents âges gestationnels.
Dans un premier temps, nous analyserons sur un plan qualitatif et quantitatif (techniques
immunoenzymatique et de spectrométrie de masse LC-MS- MS) le profil des stéroïdes sécrétés in
vitro
par le trophoblaste villeux isolé de placenta normaux ou aneuploïdes à différents âges gestationnels.
Nous étudierons parallèlement en intracellulaire l’expression des principales enzymes impliquées
dans chaque voie de la stéroïdogénsèse
Dans un second temps, nous déterminerons le profil d’expression trophoblastique des principaux
récepteurs aux œstrogènes (ERα et ERβ) et à la progestérone (PR-A, -B, -C,- S), afin d’étudier leur
modulation et leur implication éventuelle dans la physiopathologie placentaire de ces aneuploïdies.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire : culture cellulaire, dosages d’activité enzymatique,
western blot, dosages immunologiques, LCMS MS, HPLC, immunohistologie, qPCR…
Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années :