AT3 - Colorations spéciales
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Activité Technologique 3 Biotechnologies Colorations spéciales Yves DABAT Ste-Anne ANGLET 1 : Définitions Définition La bactérie peut présenter deux types d’éléments facultatifs qui ne sont pas colorables à la coloration de Gram : - La capsule - La spore 1 : Définitions Capsule C’est un élément de pathogénicité. Elle protège la bactérie de la phagocytose et joue un rôle dans l’adhésion des bactéries aux cellules et dans la formation des biofilms. La capsule se forme lorsque les conditions sont favorables. La culture doit être « jeune ». 1 : Définitions Spore C’est un élément de résistance et de propagation. Elle protège la bactérie qui résiste aux fortes pressions, aux variations de températures, au manque d’eau et de nutriments. La spore se forme lorsque les conditions sont défavorables. La culture doit être « vieille ». J1 : Macroscopie Nous procédons à la macroscopie des deux souches présentées sur GNO. J1 : Macroscopie Souche A : Colonies brillantes, bombées, sphériques. Diamètre environ 3 mm. Translucides, couleur blanc nacré. Muqueuses (type M) au prélèvement. Souche B : Colonies mates et rugeuses (type R), plates, irrégulières. Diamètre environ 8 mm. Opaques, couleur blanc. Sèches au prélèvement. J1 : Macroscopie Souche A : Colonies brillantes, bombées, sphériques. Diamètre environ 3 mm. Translucide s, couleur blanc nacré. Muqueuses (type M) au prélèvement . J1 : Macroscopie Souche B : Colonies mates et rugeuses (type R), plates, irrégulières. Diamètre environ 8 mm. Opaques, couleur blanc. Sèches au prélèvement. J1 : Microscopie Souche A : On observe des petits bacilles gram négatifs (BGN). Taille 1 à 3 µm, droits, extrémités arrondis, coloration homogène rose. Coccobacilles. En amas irréguliers. Asporulés mais capsules possibles car colonies muqueuses. J1 : Microscopie Souche B : On observe des bacilles trapus gram positifs (BGP). Taille 4 à 6 µm, droits, extrémités arrondies, coloration homogène violette. En chaînettes. Acapsulés mais présence de nombreuses endospores et exospores. Les endospores sont ovalaires, non-déformantes, sub-terminales : Les bacilles appartiennent au groupe 1. J1 : Colorations spéciales Souche A : On décide de faire deux colorations spéciales : 1- Coloration à l’encre de Chine; 2- Coloration à la Fuschine de Ziehl. Ces deux colorations sont dites colorations négatives car les capsules restent incolores, c’est l’environnement des capsules qui se colore en noir ou en rose. J1 : Colorations spéciales Souche A : Coloration à l ’encre de Chine : Bactérie J2 : Colorations spéciales Souche A : Résultat de la coloration à la Fuschine de Ziehl. Plasma coloré en rose clair, bactérie colorée en rose foncé. Capsule incolore. J2 : Colorations spéciales Souche A : Résultat de la coloration à la Fuschine de Ziehl. Plasma coloré en rose clair, bactérie colorée en rose foncé. Capsule incolore. J2 : Colorations spéciales Souche B : Coloration spéciale au vert malachite : La chaleur permet au vert malachite de pénétrer dans les spores J2 : Colorations spéciales Souche B : Après coloration 1 minute à la Fuschine, les bactéries sont colorées en rose et les spores en vert : Exospore Endospore AT3 : Colorations spéciales Yves DABAT Ste-Anne ANGLET
