NOM : Mardi 18 octobre 2016 CORRECTION Prénom : Note : / 20 Interrogation Biotechnologies N°1-2 Sécurité, manipulations aseptiques et colorations On procède à des colorations spéciales sur une souche « A » de 72 heures en BCC et une souche « B » de 24 heures isolée sur une gélose lactosée au BCP. On observe des bacilles sporulés sur un frottis A et des bacilles capsulés sur un frottis B. 1). Donner la signification de BCC : Bouillon cœur-cervelle (2 points) 2). Dans la fiche milieu jointe, trouver quel(s) élément(s) : (2 points) Apporte de l’azote et du carbone organiques : peptone et extrait de viande Est un inhibiteur : absent (le milieu est donc non-sélectif) Apporte de l’énergie à la bactérie : lactose 3). La gélose au BCP contient du « lactose » : Dans quelle catégorie biochimique le classez-vous ? : le lactose est un ose (2 points) 4). Donner le nom de la troisième étape (alcool 3 secondes) de la coloration de Gram : La troisième étape est appelée étape de différenciation. (2 points) 5). Donner le nom d’une coloration des capsules : Coloration à la fuschine (ou à l’encre de Chine). (2 points) 6). Donner le rôle de la capsule : Structure de résistance. Elle permet à la bactérie de résister à la température, aux fortes pressions, aux antibiotiques. (2 points) 7). Dans quelles conditions de culture apparaît la capsule ? : La capsule apparaît quand les conditions sont idéales. La culture doit être jeune. (2 points) 8). Donner les étapes de la coloration des capsules à la fuschine : Faire une suspension riche en mélangeant une parcelle de colonie dans du plasma de lapin. Poser une goutte à l’extrémité d’une lame propre et dégraissée. Faire un frottis à l’aide d’une petite lamelle. Sécher à la chaleur (flamme jaune). Recouvrir le frottis d’alcool 2 à 3 minutes. Égoutter et immédiatement flamber. Tremper dans la fuschine 1 minute. Rincer à l’eau. Sécher. Observer à l’objectif x100 à l’immersion. (3 points) 9). Faire un dessin annoté du résultat obtenu (voir feuille 2) lors de la coloration d’un bacille capsulé. points) Bonus Donner le nom (genre) d’une bactérie de classe 2 (groupe 2) : + 1 ou 2 points Staphylocoque doré (Staphylococcus aureus), Escherichia coli, … (3 Schéma de la coloration des capsules à la fuschine de Ziehl : Fond rose unis Bacille rose Capsule incolore Remarque : c’est une coloration, Les bactéries sont mortes.