Devoir 1-2

NOM : Mardi 18 octobre 2016
Prénom : CORRECTION Note : / 20
Interrogation Biotechnologies N°1-2
Sécurité, manipulations aseptiques et colorations
On procède à des colorations spéciales sur une souche « A » de 72 heures en BCC et une souche « B » de 24
heures isolée sur une gélose lactosée au BCP.
On observe des bacilles sporulés sur un frottis A et des bacilles capsulés sur un frottis B.
1). Donner la signification de BCC : Bouillon cœur-cervelle (2 points)
2). Dans la fiche milieu jointe, trouver quel(s) élément(s) : (2 points)
Apporte de l’azote et du carbone organiques : peptone et extrait de viande
Est un inhibiteur : absent (le milieu est donc non-sélectif)
Apporte de l’énergie à la bactérie : lactose
3). La gélose au BCP contient du « lactose » : (2 points)
Dans quelle catégorie biochimique le classez-vous ? : le lactose est un ose
4). Donner le nom de la troisième étape (alcool 3 secondes) de la coloration de Gram : (2 points)
La troisième étape est appelée étape de différenciation.
5). Donner le nom d’une coloration des capsules : (2 points)
Coloration à la fuschine (ou à l’encre de Chine).
6). Donner le rôle de la capsule : (2 points)
Structure de résistance. Elle permet à la bactérie de résister à la température,
aux fortes pressions, aux antibiotiques.
7). Dans quelles conditions de culture apparaît la capsule ? : (2 points)
La capsule apparaît quand les conditions sont idéales. La culture doit être jeune.
8). Donner les étapes de la coloration des capsules à la fuschine : (3 points)
Faire une suspension riche en mélangeant une parcelle de colonie dans du plasma de lapin.
Poser une goutte à l’extrémité d’une lame propre et dégraissée.
Faire un frottis à l’aide d’une petite lamelle.
Sécher à la chaleur (flamme jaune).
Recouvrir le frottis d’alcool 2 à 3 minutes.
Égoutter et immédiatement flamber.
Tremper dans la fuschine 1 minute.
Rincer à l’eau.
Sécher.
Observer à l’objectif x100 à l’immersion.
9). Faire un dessin annoté du résultat obtenu (voir feuille 2) lors de la coloration d’un bacille capsulé. (3
points)
Bonus Donner le nom (genre) d’une bactérie de classe 2 (groupe 2) : + 1 ou 2 points
Staphylocoque doré (Staphylococcus aureus), Escherichia coli, …

Schéma de la coloration des capsules à la fuschine de Ziehl :
Remarque : c’est une coloration,
Les bactéries sont mortes.
Fond rose unis
Bacille rose
Capsule incolore