Mécanismes de protection immunitaire contre les infections

Mécanismes de protection immunitaire
contre les infections mycobactériennes
Rapport final de la semaine d’étude en biologie et
médecine
Rosalie Pitteloud
Lycée-Collège de la Planta
Sion (VS)
Responsables :
Irène Garcia
Maria Olleros
CMU (Genève)

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Introduction
Nous nous sommes intéressés, à travers ce projet, aux différents
mécanismes de protection immunitaire servant à lutter contre la
tuberculose. Grâce à l’observation de ces mécanismes, nous avons pu
différencier des cellules malades ou saines.
Mécanismes de défense immunitaire contre les
mycobactéries :
- après infection par les mycobactéries, phagocytose des bacilles par le
macrophage alvéolaire
- production de cytokines par les macrophages afin de prévenir le système
immunitaire de l’infection
- arrivée des lymphocytes T et autres cellules impliquant la formation de
granulomes
-le granulome emprisonne les bacilles et ainsi empêche l’infection de
nouvelles cellules
Granulome

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-les cytokines (interférons et TNF) vont activer la production d’oxyde
nitrique dans le granulome
- destruction des bactéries par l’oxyde nitrique
Le but sera de différencier des cellules infectées et non infectées par le
BCG en se basant sur les réponses immunitaires.
Méthodes et résultats
1ère méthode : Coupes histologiques
Nous avons observé grâce à un microscope des coupes histologiques de
foies et de poumons de souris infectées et non infectées par le BCG qui est
une mycobactérie comme le bacille de Koch.
Signes indiquant une infection :
- Présence d’un granulome (amas de cellules foncées formant un cercle
et entourant des cellules plus claires) sur les colorations
Hématoxiline-Eosine.
Cellule infectée

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-
-
- Présence de petits bâtonnets colorés en violet (colorant de Ziehl-
Neelsen) : ce sont les bacilles du BCG
Cellules de poumon d’une
souris infectée par le BCG :
présence d’un granulome
au centre
Cellules de poumon d’une
souris saine : le poumon
contient plus d’alvéoles, ce qui
montre qu’il est plus sain.
Cellules de poumon
d’une souris infectée
(bacilles en violet au
centre)

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2ème méthode : Détermination du taux de nitrite à partir de
surnageant de culture cellulaire
Une cellule infectée par le BCG produit de l’oxyde nitrique pour se défendre.
Matériel :
- Micropipettes
- Plaque 96 puits
- Lecteur de densité optique
- PBS ; NaNO2 ; réactif de Griess ; surnageant de culture de cellules
(macrophages)
Méthodologie :
Création d’un standard de couleur (le standard permet de savoir à quelle
densité optique correspond quelle concentration) :
- 50 microlitres de PBS dans toute la ligne A
- 50 microlitres de NaNO2 en 1A
- Dilution en série
- 50 microlitres du réactif de Griess
Plaque 96 puits
Dilution en série