Bactériologie 3

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Laboratoire : Bactériologie (3)
MICROBIOLOGIE. SEMAINE 3 :
Observation des micro-organismes.
(techniques de prélèvement des micro-organismes)
Matériel
- Activité 3.1 : Collecte des résultats de la dernière séquence
- Géloses de la semaine 2
- Activité 3.2 : Observation microscopique de ton inconnu
- Microscope
- Papier kimwipes
- Huile à immersion
- Brûleur
- Anse de platine
- Briquet
- Géloses contaminées de la semaine 2
- Lames vierges
- 1 support à coloration
- 1 pince à coloration
- 1 flacon laveur
- 1 kit de coloration Gram
- papier buvard

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ACTIVITÉ 3.1 :
COLLECTE DES RÉSULTATS DES EXPÉRIENCES DE LA SEMAINE DERNIÈRE
Les étudiants procèdent à la collecte des résultats des expériences portant sur la rédaction
d’un rapport complet.
Chaque équipe consigne ses résultats sur une feuille; celle-ci est remise au professeur.
Le professeur compile les résultats de toutes les équipes, tous les groupes confondus, puis
transmet aux étudiants, dès le lendemain, les données de cette compilation
ACTIVITÉ 3.2 :
OBSERVATION MICROSCOPIQUE DE TON INCONNU
Après avoir procédé à la collecte de vos résultats, vous devez procéder à la recherche de
caractéristiques anatomiques de votre inconnu en utilisant diverses techniques de
coloration. Dans les circonstances, la seule coloration que vous effectuerez sera celle de
Gram; en voici la technique
Préparation du frottis :
1. dépose une goutte d’eau au centre d’une lame
2. prend stérilement, avec une anse de platine, un peu d’une colonie de ton inconnu (sur
une de tes géloses nutritives)
3. dépose ton prélèvement sur la lame (dans la goutte d’eau) puis étends-le délicatement
4. fixe le frottis en passant 2 à 3 fois la lame à travers la flamme à l’aide de la pince
5. laisse sécher à l’air libre.
Coloration de Gram :
1. Sur le support et au-dessus du plateau, inonder la lame avec le cristal violet
Attendre 1 minute
2. Rincer délicatement à l’eau distillée (à l’aide du flacon-laveur)
3. Inonder avec la solution iodée
Attendre 1 minute
4. Rincer la lame avec la safranine
5. Inonder avec la safranine
Attendre 30 secondes
6. Rincer délicatement à l’eau distillée
7. Sécher à l’ai ou à l’aide d’un papier buvard (sans frotter).
Examiner la forme et l’agencement des bactéries ainsi que leur couleur à un
grossissement de 1000X
*** Par déductions ou observations, essayez d’identifier quelques caractéristiques de votre bactérie
inconnue (faites-en mention dans votre rapport à la section »Résultats »)
Ex : forme, le Gram, spores, …

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Bactériologie : Travail à remettre
Nom : _____________________ Nom : _____________________
Questions :
1) Pour une infection bactérienne sur une table, quel(s) désinfectant(s) ne sont pas à
conseiller
2) Pour désinfecter un scalpel contaminé à la bactérie C, quel moyen de désinfection
conseillez-vous
3) Pour une infection interne (poumons, par exemple) dans un malade infecté avec la
bactérie A, quel moyen de désinfection conseillez-vous (soyez précis)
4) Quel est le nom scientifique de vos bactéries inconnues A, B et C
NOM SCIENTIFIQUE
Donner 2 raisons pour lesquelles vous pensez qu’il
s’agit de cette bactérie
A
B
C
Collecte des résultats, semaine 2
A
B
C
1 - ANTIBIOGRAMME
1
1
2
2
3
3
4
4
5
5
2 - RAYONS U-V
Témoin
30 sec.
3 min.

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Collecte des résultats, semaine 2
(suite)
A
B
C
3 - CHALEUR
Témoin
BACT
30 sec.
2 min.
8 min.
4 - DÉSINFECTANT
1
Témoin
30 sec.
2 min
8 min
2
Témoin
30 sec.
2 min
8 min
3
Témoin
30 sec.
2 min
8 min
4
Témoin
30 sec.
2 min
8 min
5
Témoin
30 sec.
2 min
8 min
6
Témoin
30 sec.
2 min
8 min
7
Témoin
30 sec.
2 min
8 min
5 - Faire un schéma (dessin rapide) de la forme des bactéries au microscope. Indiquez s’il
s’agit d’une coque ou d’un bâtonnet. Donner le grossissement. Vous pouvez, si vous
préférez, utiliser une photographie de votre bactérie inconnue et des 2 autres (mettre au
verso, et écrire verso dans les cases du tableau ci-dessous )
A
B
C
6 - Coloration de GRAM (positif ou négatif)
A
B
C