Arichi Bouchra Systèmes de sécrétion bactérienne Découverte du monde microbien LEEUWENHOEK EnAnton 1866,VAN HAECKEL crée le (1632-1723), terme de protistes (eucaryotes, procaryotes) pour désigner, drapier hollandais et grand entre le monde animaletet le amateur de loupes monde instruments d'optique, végétal, les êtres unicellulaires découvre et décrit entre et les1674 êtres pluricellulaires sans et 1687 le monde tissus différenciés microbien «les animalcules » Mais celui-ci n'est En 1878, SEDILLOT crée véritablement reconnu le terme de microbes parmi qu'à partir du milieu du lesquels on distinguera XIXe siècle à la suite des ensuite les bactéries travaux de Louis proprement dites et les PASTEUR et de ses virus,, élèves. Qu’est ce qu’une bactérie? o Microscopique (20nm -1µm) o Unicellulaire o Ubiquitaire o Procaryote ( dépourvue du noyau) o Grande capacité de multiplication (doublement de la population en 20mn). Capsule Paroi Membrane Plasmique Ribosomes Cytoplasme Plasmide Flagelle Chromosome(ADN) Pili Granulation de réserve Figure1, schéma montre la structure de la bactérie Les formes des bactéries? Forme incurvée ou spiralée Forme cylindrique arrondie les vibrions : Vibrio cholerae les coques: bacilles: Streptocoques Salmonella les spirochètes: Treponème (Syphilis) La paroi bactérienne o Une caractéristique importante des bactéries est la paroi cellulaire qui permet La forme et protection contre le milieu extérieur. Les échange entre la bactérie et le milieu environnemental. o Basées sur la différence de la structure et de la composition chimique de cette paroi cellulaire, les bactéries peuvent être divisées en deux groupes : Gram négatif et Gram positif. Les systèmes de sécrétion bactérienne Milieu extérieur Membrane externe Périsplasme Membrane interne Cytoplasme bactérien Macromolécules (protéines, nucléoprotéines) Le système SEC o La plus importante voie d’export de protéines,(chez les archées, les eubactéries et les eucaryotes) o Sa présence est indispensable puisque son absence est létale pour la bactérie. o Il permet le passage des protéines vers le périplasme mais il est aussi un des systèmes qui permet l’insertion des protéines dans la membrane interne(mi) Le système SEC o Le système comprend la protéine cytoplasmique SecA qui permet un apport d’énergie par l’hydrolyse de l’ATP nécessaire pour le fonctionnement de la machinerie, Le système Tat Twin Arginine Translocation. o Découvert dans la membrane des Thylakoïdes du maïs, o Un système alternatif fut mis en évidence chez E. Coli permettant la translocation de protéines repliées et activées au sein du cytoplasme et dont l’énergie dépend du (∆ Ph) transmembranaire Le système Tat o Ce mode est incompatible avec la nécessité pour certaines enzymes de fixer des cofacteurs cytoplasmiques pour devenir actives, notamment les métalloenzymes des chaînes respiratoires liées à la face périplasmique des membranes. Les types de systèmes de sécrétion Classés selon - Composition en protéines - Leurs similitudes en acides aminés - Leurs mécanismes de fonctionnement SST1 Se compose de trois protéines permettant la sécrétion d’exoprotéines en une seule étape : - La protéine ABC (ATP Binding Cassette), le moteur du système se localise au niveau de l’MI, - La protéine MFP (Membrane Fusion Protein) est Ha HA l’adaptateur entre l’ME et l’IM HA - La protéine OMP formant le pore de l’ME. SST1 Les T1SS permettent la sécrétion de protéines de différentes tailles et fonctions. (ex: α hémolysine (HlyA) chez E. coli) ME OMP Périsplasme MFP MI ABC Cytoplasme bactérien Ha HA HA WAAAA SST2 o A été identifié pour la première fois chez la bactérie K. Oxytoca en 1987. o Consiste en un assemblage de 12 à 16 protéines différentes comprenant ATPase, une Protéine Chaperonne et une Peptidase o Le sst2 met en jeu les deux systèmes de transport moléculaires : système SEC et TAT. SST2 SST2 Sécrétion transférées à travers la membrane Une fois dans le périplasme, les La sécrétion des protéines interne de bactérie par les protéines sontlaensuite transportées en deux systèmes de transport SEC ou TAT vers L’extérieur par étapes le SST2 Sec ou Tat Exportation SST2 : un facteur important de virulence des bactéries pathogènes et sécrète des protéines dans l’environnement extracellulaire où elles sont capables de dégrader des composés des cellules hôtes,(des protéines, des lipides et des sucres de la matrice extracellulaire), SST3 o Se compose d’une vingtaine de protéines formant une seringue permettant l’injection de protéines du cytoplasme de la bactérie directement dans la cellule de l’hôte où ils peuvent moduler une grande variété de fonction y compris les réponses immunitaire o deux parties : le corps basal et son prolongement qui selon les cas prend différents noms (filament, pilus ou aiguille). corps basal : SST3 - Un disque protéique, (ME) permettant la sécrétion de macromolécules - Un disque protéique permet un lien entre l’MI et l’ME en formant un pore - Une plateforme protéique, formée de protéines de la famille YscQ. en interaction avec le cytoplasme et l’MI, est en association avec l’ATPase de la plateforme , - L’hydrolyse de l’ATP par l’ATPase permet de fournir de l’énergie à la sécrétion. Cette plateforme aurait aussi un rôle à jouer dans la reconnaissance des effecteurs, SST3 Milieu extérieur Membrane externe Périsplasme Membrane interne Disque protéique Disque protéique Plateforme protéique ATP Cytoplasme bactérien SST4 o Composé d’au moins 11 protéines o Servent au transport de protéines les complexes macromoléculaires (composés de protéines seules ou bien associées à de l’ADN) formant un canal à travers la paroi bactérienne, o On peut ainsi diviser les T4SS en trois familles Les systèmes systèmes dites de de conjugaison transport de « compétence depermettant protéines » assurant lequi transfert d’adn exportent l’échange d’ADN les molécules vers avecunele cellule milieu effectrices réceptrice extracellulaire du pathogène cible en Cettevers sécrétion par les T4SS peut être dépendante du établissant les cellules un contact eucaryotes directdurant (conjugaison). l’infection. système Sec avec une périplasmique peutaaussi Récemment, uneétape autre famille demais T4SS été se faire en une seule étape (du cytoplasme au milieu Le système La découverte plupart lequi demieux ces permettrait T4SS caractérisé injectent le transfert est leur le système substrat d’îlot de extracellulaire ou dans le cytosol de la cellule cible). virb d’agrobacterium directement pathogénicité dans entrelelescytosol bactéries tumefaciens de la cellule(bactérie eucaryote phytopathogène comme pour les T3SS. responsable de la formation de tumeurs du collet) SST4 Le pilus se localisant au niveau de la surface de la bactérie est composé de VirB2 et VirB5. Le canal transmembranaire composé d’une dizaine de protéines VirB. VirB1(transglycolase permettant une lyse localisée de la paroi bactérienne pour permettre la mise en place du T4SS) VirB7 et VirB9 (hétérodimère )localisé au niveau de l’ME, VirB8, VirB10 : protéines de l’IM avec un large segment périplasmique. SST4 Pilis Membrane externe Périsplasme Membrane interne Cytoplasme bactérien Canal transmembranaire Milieu extérieur SST5 Autotransporteurs (Va ou AT-1) Les familles du système V structure et mode de biogénèse similaires des différentes protéines de ces systèmes. la particularité de fonctionner en absence d’ATP, Système chaperonne- les systèmes à deux usher (Vc ou AT-2). partenaires (Vb) SST5 Les autotransporteurs sont constitués d’une seule protéine comprenant plusieurs domaines Domaine β Traverse la membrane externe bactérienne, Domaine passager Domaine extracellulaire Région de liaison Située entre ces deux domaines Va Atps Vb Vc SecD EFGY SEC Va : autotransporteur(AT-1) NTP Vb: système à 2 protéines(tps) Vc :autotransporteur trimériqu ( AT-2) SEC Domaine B Domaine passager Molécule effectrice Région de liaison Représentation schématique du système de sécrétion de type V SST6 Ce système de sécrétion a été proposé par Pukatzki et ses collaborateurs (2006) Composé de 12 à 25 protéines Responsable de la sécrétion des protéines HCP (Hemolysin-Coregulated Protein) et est codé par les gènes Vas (virulence-associated secretion) SST6 o La découverte de ce système étant récente, les données sur la composition, son mode d’assemblage et sa topologie sont très pauvres. o A cause de cela, les hypothèses sur les caractéristiques des T6SSs sont très variées et peuvent se contredire d’un travail à un autre. SST7 Composé de 12 à 25 protéines A été caractérisé pour la première fois chez Cholerae de Vibrio et Pseudomonas Aeruginosa Présent chez les bactéries Gram + SST7 Bien que les bactéries Gram + ont seulement une seule membrane, certaines espèces, notamment les mycobactéries, ont une paroi cellulaire qui est fortement modifiée par les lipides, appelé Mycomembrane. En conséquence, les génomes de ces espèces encodent une famille de systèmes de sécrétion spécialisés collectivement appelés les systèmes de type VII section (T7SS) canal de translocation membranair e interne Formé par la protéine membranaire intégrale rv3877 canal distinct dans le mycomembra ne Les modèles actuels de ce Composé de protéines encore inconnues système suggèrent Chaperone -like atpases Ancré à la membrane interne de la lier c-terminales des effecteurs, qui sont invariablement sécrétée comme hétérodimères. Conclusion Les bactéries sont présentes partout sur Terre ,sur le sol, les murs, dans l’eau, sur nos aliments et même a l’intérieur de notre organisme Mais beaucoup de bactéries sont inoffensives et utiles pour nous ,elles nous aident à: Bactéries inoffensives Bactéries pathogènes Bacille de,koch Malgré leur petitesse elles jouent un (La tuberculose) rôle très important et immense dans antibiotiques notre vie , Digérer en dégradent certaines molécules d’aliments que nous ne savons pas dégrader clostridium tétanie Produisent (le tétanos) en échange des molécules que nous absorbons(la vitamine K qui est en partie fabriquée par les bactéries de notre tube digestif (coagulation du sang) Elles sont responsables de la biodégradation sans ces bactéries, tout ce qui s’accumule sur terre depuis des millénaires formerait un amas de déchets qui atteindrait la lune. Fermentation Fabrication du fromage Merc