Glucose et hémoglobine glyquée (HbA1c) : mesure et référence

WHO Collaborating
Centre for Laboratory
Quality Assurance
SIS 051
FICHE TECHNIQUE 21
Glucose et hémoglobine glyquée
(HbA1c) : mesure et référence
À la fin de la lecture de ce document, vous devez :
¾ Connaître les différents échantillons possibles pour la
mesure du glucose et les concentrations
correspondantes
¾ Connaître les standards de mesure de l'HbA1c
¾ Comprendre l'importance des systèmes de référence
pour le glucose et l'HbA1c
1. Glucose
Le glucose est un des paramètres les plus mesurés dans le laboratoire. Cela s'explique par le fait que le
glucose constitue une des principales sources d'énergie de notre organisme et que sa concentration doit en
particulier être attentivement suivie chez les patients traités pour un diabète.
La concentration en glucose varie en fonction du type d'échantillons et du moment de prélèvement.
 Différents types possibles d'échantillons de sang
- Sang artériel : échantillon prélevé directement de l'artère, ou par une voie en place chez le patient
- Sang veineux (total ou complet) : échantillon de sang veineux non décanté, composé d’une phase
liquide (plasma) et d’éléments figurés en suspension (hématies, leucocytes, plaquettes).
 Plasma : surnageant obtenu de sang anticoagulé, après centrifugation et décantation.
 Sérum : il a la même composition que le plasma, mais est dépourvu de fibrinogène. Il est obtenu
après centrifugation et décantation d'un échantillon de sang coagulé.
- Sang capillaire : sang provenant du système veineux capillaire souvent utilisé avec les trousses de
dosage rapide (« POCT » - « Point of Care Testing » – « Dosage au lit du patient » – « Test rapide »).
Comme pour toute analyse, la conservation des échantillons pour la mesure du glucose doit être
méthodique. Pour un même échantillon, la concentration en glucose varie sensiblement selon le délai
entre le prélèvement et la mesure, la température de conservation, le type d'échantillon, l'utilisation ou
non d'un anticoagulant ou d'un inhibiteur de la glycolyse. Dans le sang total le glucose diminue dès 10
minutes après prélèvement. Dans le sérum fluoré et conservé à + 4 °C, le dosage doit être fait au plus
vite (maximum 24 h).
 À jeun
La concentration en glucose dans le sang capillaire est intermédiaire entre sang artériel et sang
veineux (+2 à 3% du sang veineux). La concentration de glucose est légèrement supérieure dans le
sang artériel (+ 5%) par rapport au sang veineux.
Avec un hématocrite physiologique, la concentration de glucose est d’environ 15% plus élevée dans
les échantillons de sérum et de plasma (y compris capillaire) par rapport au sang veineux total. Ceci
s'explique par le fait que le volume d'eau du plasma/sérum est plus faible que celui du sang total, d’où la
concentration en glucose plus élevée.
 Postprandial
La concentration dans le sang et le plasma capillaire augmente sensiblement après un repas. La
concentration de glucose dans le sang artériel peut augmenter de 50% par rapport à celle du sang
veineux.
 Système de référence
Dans les laboratoires de type hospitalier ou autres grands laboratoires, l'échantillon analysé est
essentiellement du plasma ou du sérum. Les valeurs usuelles correspondent.
Les appareils de type POCT réalisent généralement la mesure sur du sang capillaire. Cet échantillon
est moins concentré en glucose que le plasma/sérum utilisé dans les grands laboratoires. Certains
appareils réalisent alors une conversion vers une valeur "équivalente" à celle du plasma. D'autres
appareils donnent directement la concentration de glucose sans réaliser cette conversion.
AFIN D'ASSURER LE SUIVI D'UN PATIENT, IL EST IMPÉRATIF DE CONNAÎTRE LE SYSTÈME DE RÉFÉRENCE UTILISÉ
LORS DE LA MESURE. DE PLUS CHAQUE FOIS QUE POSSIBLE, LE PRÉLÈVEMENT DOIT SE FAIRE LE MATIN, À JEUN
ET TOUJOURS SUR LE MÊME TYPE D’ÉCHANTILLON.

2. Hémoglobine glyquée (HbA1c)
L'hémoglobine glyquée est un paramètre essentiel dans le suivi du diabète, il permet d'estimer le risque
de complications encouru par le patient.
 Qu'est ce que c'est ?
L'hémoglobine (Hb) est la protéine qui permet le transport de l'oxygène par les globules rouges.
L'hémoglobine glyquée est une hémoglobine sur laquelle s'est fixée de façon permanente une molécule de
glucose. La référence internationale est l'HbA1c où la molécule de glucose est fixée sur la chaîne β de
l'hémoglobine.
Il a été démontré que la quantité d'HbA1c était directement proportionnelle à la quantité de glucose
présente dans le sang et que la molécule de glucose restait liée à l'hémoglobine pendant toute la durée de
vie du globule rouge (environ 3 mois). Ainsi, la mesure de l'HbA1c reflète la glycémie moyenne d'une
personne au cours de cette période.
 Les différents standards
- DCCT (Diabetes Control and Complications Trials) : c'est le premier standard à avoir été utilisé.
C'est celui qui a permis, à la fin des années 1980, de montrer le lien entre HbA1c et les
complications possibles du diabète. C'est donc la référence historique s'appuyant sur les techniques
de mesure disponibles dans les laboratoires à cette période. Avec ce standard, le taux d'HbA1c est
exprimé en % de l'hémoglobine totale.
- NGSP (National Glycohemoglobin Standardization Program) : c'est une initiative américaine visant à
améliorer la corrélation des différentes méthodes disponibles (plus de 30) avec le standard DCCT.
Globalement, cela indique que les résultats trouvés par une méthode standardisée NGSP sont
directement comparables avec la méthode de référence DCCT.
- IFCC (International Federation of Clinical Chemistry) : à la fin des années 1990, cette organisation
faîtière internationale a décidé d'élaborer une meilleure standardisation de l'HbA1c en s'appuyant
sur des techniques analytiques plus performantes. Le standard IFCC, bien que plus tardif, constitue
la référence officielle.
 Le problème
Le même échantillon analysé par une méthode standardisée DCCT/NGSP et une méthode standardisée
IFCC donnera deux résultats différents : le résultat IFCC est de 1 à 2% plus faible que le résultat
DCCT/NGSP.
Comme dans le cas du glucose, on comprend donc facilement pourquoi :
IL FAUT IMPÉRATIVEMENT CONNAÎTRE LE SYSTÈME DE RÉFÉRENCE UTILISÉ LORS DE LA MESURE
 Recommandations actuelles
Il est actuellement recommandé d'utiliser systématiquement une méthode IFCC. Si l’on souhaite
convertir le résultat pour qu'il reflète une mesure DCCT/NGSP, il est possible d’utiliser la formule suivante :
DCCT/NGSP = (0,915 x IFCC) + 2,15
 Concentration moyenne en glucose
Comme nous l'avons vu, l'HbA1c reflète la concentration en glucose présente au cours d'une période
d'environ 3 mois. C'est pourquoi, il a été proposé d'utiliser la concentration en HbA1c pour calculer une
Concentration Moyenne en Glucose (CMG) à l'aide de cette formule :
CMG (mmol/l) = 1,84 x IFCC HbA1c
Cette formule a l'avantage de lier directement la mesure d'HbA1c à une concentration de glucose. Cela
facilite l'interprétation du résultat par le patient et augmente la perception des petites variations.
 Evolution
Devant la différence observée entre un résultat DCCT/NGSP et un résultat IFCC, il a été proposé
d'exprimer les résultats IFCC dans une autre unité (mmol d’HbA1c / mol d’Hb) pour l’HbA1c. Cela a
l'avantage de marquer clairement le type de standard utilisé, dès la lecture du résultat.
Septembre 2008 Mathias Maitrejean et André Deom
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