WHO Collaborating Centre for Laboratory Quality Assurance SIS 051 FICHE TECHNIQUE 21 Glucose et hémoglobine glyquée (HbA1c) : mesure et référence À la fin de la lecture de ce document, vous devez : ¾ Connaître les différents échantillons possibles pour la mesure du glucose et les concentrations correspondantes ¾ Connaître les standards de mesure de l'HbA1c ¾ Comprendre l'importance des systèmes de référence pour le glucose et l'HbA1c 1. Glucose Le glucose est un des paramètres les plus mesurés dans le laboratoire. Cela s'explique par le fait que le glucose constitue une des principales sources d'énergie de notre organisme et que sa concentration doit en particulier être attentivement suivie chez les patients traités pour un diabète. La concentration en glucose varie en fonction du type d'échantillons et du moment de prélèvement. Différents types possibles d'échantillons de sang - - Sang artériel : échantillon prélevé directement de l'artère, ou par une voie en place chez le patient Sang veineux (total ou complet) : échantillon de sang veineux non décanté, composé d’une phase liquide (plasma) et d’éléments figurés en suspension (hématies, leucocytes, plaquettes). Plasma : surnageant obtenu de sang anticoagulé, après centrifugation et décantation. Sérum : il a la même composition que le plasma, mais est dépourvu de fibrinogène. Il est obtenu après centrifugation et décantation d'un échantillon de sang coagulé. Sang capillaire : sang provenant du système veineux capillaire souvent utilisé avec les trousses de dosage rapide (« POCT » - « Point of Care Testing » – « Dosage au lit du patient » – « Test rapide »). Comme pour toute analyse, la conservation des échantillons pour la mesure du glucose doit être méthodique. Pour un même échantillon, la concentration en glucose varie sensiblement selon le délai entre le prélèvement et la mesure, la température de conservation, le type d'échantillon, l'utilisation ou non d'un anticoagulant ou d'un inhibiteur de la glycolyse. Dans le sang total le glucose diminue dès 10 minutes après prélèvement. Dans le sérum fluoré et conservé à + 4 °C, le dosage doit être fait au plus vite (maximum 24 h). À jeun La concentration en glucose dans le sang capillaire est intermédiaire entre sang artériel et sang veineux (+2 à 3% du sang veineux). La concentration de glucose est légèrement supérieure dans le sang artériel (+ 5%) par rapport au sang veineux. Avec un hématocrite physiologique, la concentration de glucose est d’environ 15% plus élevée dans les échantillons de sérum et de plasma (y compris capillaire) par rapport au sang veineux total. Ceci s'explique par le fait que le volume d'eau du plasma/sérum est plus faible que celui du sang total, d’où la concentration en glucose plus élevée. Postprandial La concentration dans le sang et le plasma capillaire augmente sensiblement après un repas. La concentration de glucose dans le sang artériel peut augmenter de 50% par rapport à celle du sang veineux. Système de référence Dans les laboratoires de type hospitalier ou autres grands laboratoires, l'échantillon analysé est essentiellement du plasma ou du sérum. Les valeurs usuelles correspondent. Les appareils de type POCT réalisent généralement la mesure sur du sang capillaire. Cet échantillon est moins concentré en glucose que le plasma/sérum utilisé dans les grands laboratoires. Certains appareils réalisent alors une conversion vers une valeur "équivalente" à celle du plasma. D'autres appareils donnent directement la concentration de glucose sans réaliser cette conversion. AFIN D'ASSURER LE SUIVI D'UN PATIENT, IL EST IMPÉRATIF DE CONNAÎTRE LE SYSTÈME DE RÉFÉRENCE UTILISÉ LORS DE LA MESURE. DE PLUS CHAQUE FOIS QUE POSSIBLE, LE PRÉLÈVEMENT DOIT SE FAIRE LE MATIN, À JEUN ET TOUJOURS SUR LE MÊME TYPE D’ÉCHANTILLON. 2. Hémoglobine glyquée (HbA1c) L'hémoglobine glyquée est un paramètre essentiel dans le suivi du diabète, il permet d'estimer le risque de complications encouru par le patient. Qu'est ce que c'est ? L'hémoglobine (Hb) est la protéine qui permet le transport de l'oxygène par les globules rouges. L'hémoglobine glyquée est une hémoglobine sur laquelle s'est fixée de façon permanente une molécule de glucose. La référence internationale est l'HbA1c où la molécule de glucose est fixée sur la chaîne β de l'hémoglobine. Il a été démontré que la quantité d'HbA1c était directement proportionnelle à la quantité de glucose présente dans le sang et que la molécule de glucose restait liée à l'hémoglobine pendant toute la durée de vie du globule rouge (environ 3 mois). Ainsi, la mesure de l'HbA1c reflète la glycémie moyenne d'une personne au cours de cette période. Les différents standards - DCCT (Diabetes Control and Complications Trials) : c'est le premier standard à avoir été utilisé. C'est celui qui a permis, à la fin des années 1980, de montrer le lien entre HbA1c et les complications possibles du diabète. C'est donc la référence historique s'appuyant sur les techniques de mesure disponibles dans les laboratoires à cette période. Avec ce standard, le taux d'HbA1c est exprimé en % de l'hémoglobine totale. - NGSP (National Glycohemoglobin Standardization Program) : c'est une initiative américaine visant à améliorer la corrélation des différentes méthodes disponibles (plus de 30) avec le standard DCCT. Globalement, cela indique que les résultats trouvés par une méthode standardisée NGSP sont directement comparables avec la méthode de référence DCCT. - IFCC (International Federation of Clinical Chemistry) : à la fin des années 1990, cette organisation faîtière internationale a décidé d'élaborer une meilleure standardisation de l'HbA1c en s'appuyant sur des techniques analytiques plus performantes. Le standard IFCC, bien que plus tardif, constitue la référence officielle. Le problème Le même échantillon analysé par une méthode standardisée DCCT/NGSP et une méthode standardisée IFCC donnera deux résultats différents : le résultat IFCC est de 1 à 2% plus faible que le résultat DCCT/NGSP. Comme dans le cas du glucose, on comprend donc facilement pourquoi : IL FAUT IMPÉRATIVEMENT CONNAÎTRE LE SYSTÈME DE RÉFÉRENCE UTILISÉ LORS DE LA MESURE Recommandations actuelles Il est actuellement recommandé d'utiliser systématiquement une méthode IFCC. Si l’on souhaite convertir le résultat pour qu'il reflète une mesure DCCT/NGSP, il est possible d’utiliser la formule suivante : DCCT/NGSP = (0,915 x IFCC) + 2,15 Concentration moyenne en glucose Comme nous l'avons vu, l'HbA1c reflète la concentration en glucose présente au cours d'une période d'environ 3 mois. C'est pourquoi, il a été proposé d'utiliser la concentration en HbA1c pour calculer une Concentration Moyenne en Glucose (CMG) à l'aide de cette formule : CMG (mmol/l) = 1,84 x IFCC HbA1c Cette formule a l'avantage de lier directement la mesure d'HbA1c à une concentration de glucose. Cela facilite l'interprétation du résultat par le patient et augmente la perception des petites variations. Evolution Devant la différence observée entre un résultat DCCT/NGSP et un résultat IFCC, il a été proposé d'exprimer les résultats IFCC dans une autre unité (mmol d’HbA1c / mol d’Hb) pour l’HbA1c. Cela a l'avantage de marquer clairement le type de standard utilisé, dès la lecture du résultat. Septembre 2008 Mathias Maitrejean et André Deom CSCQ 2008. Aucune copie, même partielle, de ce document n'est autorisée sans l’accord du CSCQ. CSCQ, 2 CHEMIN DU PETIT-BEL-AIR, CH - 1225 CHÊNE-BOURG