métabolisme des levures

Méthodes & Techniques ~ Sciences de la Vie et de la Terre Lycée Étienne Oehmichen
© J.Harlé
FICHE
TECHNIQUE
P
PR RO OT TO OC CO OL LE E = = M MÉ ÉT TA AB BO OL LI IS SM ME E D DE ES S L LE EV VU UR RE ES S
Matériel : ballon + suspension de levures à 80g.L-1 - Erlenmeyer de 150 mL (ou équivalent) - éprouvette graduée - 5 tubes à essai + portoir - tube de liaison coudé - bain-marie à 30°C -
Glucose - balance de précision - coupelle + spatule – 2 éthylotests avec notice - eau de chaux - bandelettes réactives de glucose avec la gamme de couleurs correspondante - pipette (ou
équivalent) – chronomètre – agitateur magnétique + MATERIEL DE NETTOYAGE
Protocole et test de détection de matières organiques
Au cours de la respiration et de la fermentation, les échanges réalisés entre les levures et leur milieu diffèrent :
 respiration cellulaire : absorption de glucose et de dioxygène ; rejet de dioxyde de carbone et d’eau. Cette réaction se déroule en milieu aérobie (avec O2)
Équation chimique de la respiration cellulaire : C6H12O6 + 6 O2  6 CO2 + 6 H2O (+ énergie) On parle d’oxydation complète de la matière organique
 fermentation alcoolique : absorption de glucose ; rejet de dioxyde de carbone et d’éthanol. Cette réaction se déroule en milieu anaérobie (sans O2)
Équation chimique de la fermentation alcoolique : C6H12O6  2 CO2 + 2 C5H5OH (+ énergie) On parle d’oxydation incomplète de la matière organique
Dans les deux cas, le dégagement de CO2 est observable par le rejet de bulles.
Protocole expérimental
Test de la présence d’éthanol
1. Réaliser un test de recherche d’éthanol sur la suspension de levures
2. Ajouter 1,5 g de glucose à la suspension de levures et agiter jusqu’à dissolution
complète grâce à l’agitateur magnétique
3. Réaliser un test de recherche de glucose sur la solution obtenue
4. Fermer l’Erlenmeyer avec le bouchon relié au tube coudé
5. Placer le tube à dégazement ‘gros tube à essai’’ rempli d’eau à la sortie du tube coudé
placé dans un cristallisoir rempli d’eau.
La sortie du tube coudé doit être immergée pour rendre le dispositif étanche
Montage expérimental
1. Prélever avec une pipette quelques gouttes de solution
2. Verser le prélèvement dans l’embout de l’éthylotest
3. Observer la coloration obtenue
Le virage net au vert caractérise la présence d’alcool : TEST POSITIF
Test de la présence de glucose
1. Prélever avec une pipette quelques gouttes de solution
2. Déposer quelques gouttes sur une bandelette test
3. Comparer la coloration à celle affichée sur la boîte contenant les bandelettes
(résultats exprimés en g.L-1)
Test de détection d’un dégagement de CO2
1. Retirer avec précaution le tube à dégazement du dispositif expérimental
2. Verser rapidement de l’eau de chaux dans le tube
3. Observer si l’eau se trouble ou non
Le précipité de carbonate de calcium troublant l’eau de chaux montre que le gaz
produit est du dioxyde de carbone.