TP : La glycémie et sa régulation. I- Introduction La régulation de la glycémie dans le système sanguin tient un rôle très important. Le taux de sucre dans le sang doit être régulé de façon permanente et adapté aux besoins de l’organisme. C’est notamment le cas des hormones telles que l’insuline (hormone hypoglycémiante) et le glucagon et adrénaline (hyperglycémiante). A jeun, une glycémie normale atteint les 0,8g/L de sang. Nous mesurerons à travers ce TP comment évoluent les concentrations de glucose dans le sang après diverses injections, par mesures photo colorimétriques. II- Matériel et méthode. Nous allons travailler sur un rat anesthésié et a jeun depuis 24h. Nous plaçons un cathéter dans la veine jugulaire, afin de pouvoir injecter les substances et aussi pouvoir prélever le sang de l’animal, et réalisons une trachéotomie pour éviter que le rat ne s’étouffe. Matériel a notre disposition : -cathéter, seringues, fil à coudre -insuline -glucagon -héparine -NaCl a 9‰ -matériel a dissection -Vortex, centrifugeuse Apres injection d’une substance listée ci-dessus, nous faisons un prélèvement de sang afin de suivre la concentration en glucose dans le sang au cours du temps. Nous mélangeons ce sang a une enzyme (la glucose oxydase) qui catalyse l’oxydation du glucose. La quantité de colorant formé est proportionnelle à la concentration en glucose des échantillons. III- Résultats obtenus Densité optique des différents échantillons : NaCl Glucagon Insuline DO. blanc 0 0 0 Standard 0,129 0,083 0,120 Tube 1 à To 0,146 0,761 0,150 Tube 2 à To + 10min : 0,134 5min : 0,341 10min : 0,108 Tube 3 à To + 20min : 0,123 15min : 0,505 20min : 0,124 Tube 4 à To + 30min : 0,120 20min : 0,492 30min : 0,100 Détermination des concentrations de glucose dans le sang du rat a différents temps, exprimé en g/L : [Glucose] échantillon = (DO échantillon / DO standard) x [Glucose] standard Avec [Glucose] standard = 1 g/L Concentrations de glucose en g/L dans les échantillons : NaCl Glucagon Insuline DO. blanc 0 0 0 Standard 1 1 1 Tube 1 à To 1,132 9,168 1,25 Tube 2 à To + 10min : 1,038 5min : 4,108 10min : 0,9 Tube 3 à To + 20min : 0,953 15min : 6.084 20min : 1,033 Tube 4 à To + 30min : 0,930 20min :5,927 30min : 0,833 IV – Traçage des courbes [glucose] = f (temps) V – Interprétation des résultats Pour le rat ayant reçu des injections de NaCl a 9‰ : On constate une légère baisse du taux de glucose dans le sang (chute d’environ 0,2 g/L en 30 minutes). On peut conclure que le NaCl ne joue aucun effet sur le stockage ou relargage du glucose dans l’organisme. La diminution de la glycémie étant due probablement au métabolisme du rat. 0 1 2 3 4 1,132 1,25 1,038 0,9 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 0 1 2 3 4 0,953 1,033 0,93 0,833 1,132 1,25 9,168 4,108 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 1,038 0,9 6,084 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 5,927 0,953 1,033 0,93 0,833