Gélose de MAYEUX, SANDINE et ELLIKER

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Biokar Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France
Tél : + 33 (0)3 44 14 33 33 – Fax : + 33 (0)3 44 14 33 34 – www.biokar-diagnostics.fr
Gélose de MAYEUX, SANDINE et ELLIKER
DOMAINE D’UTILISATION / HISTORIQUE
Ce milieu, mis au point en 1962 par Mayeux, Sandine et Elliker, est un milieu électif permettant la
recherche et le dénombrement des Leuconostoc dans le lait, les produits laitiers et les aliments
sucrés.
PRINCIPES
- L’azide de sodium provoque l’inhibition des germes à Gram négatif et des streptocoques lactiques
associés aux Leuconostoc dans les produits laitiers.
- A partir du saccharose du milieu, Leuconostoc mesenteroides et Leuconostoc dextranicum
synthétisent des polysaccharides (dextranes) qui donnent aux colonies un aspect gélatineux.
PREPARATION
- Mettre en suspension 138,5 g de milieu déshydraté (BK087) dans 1 litre d’eau distillée ou
déminéralisée.
- Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps
nécessaire à sa dissolution.
- Répartir en tubes ou en flacons.
- Stériliser à l’autoclave à 110°C pendant 20 minutes.
NOTA :
Une liquéfaction partielle de l’agar entraînera inévitablement une altération significative de la
consistance du gel du milieu solidifié, après stérilisation et refroidissement.
MODE D’EMPLOI
- Refroidir et maintenir le milieu à 47°C.
- Couler en boîtes de Petri stériles.
- Laisser solidifier sur une surface froide.
- Faire sécher à l'étuve, couvercle entrouvert.
- Transférer 0,1 mL du produit à examiner et de ses dilutions décimales dans les boîtes.
- Etaler l’inoculum à la surface du milieu à l’aide d’un étaleur stérile.
- Incuber à 21°C, puis examiner chaque jour pendant 4 jours.
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LECTURE
Leuconostoc dextranicum présente des colonies incolores, muqueuses, gélatineuses de 1 à 5 mm de
diamètre. Leuconostoc citrovorum et Leuconostoc kefir donnent de petites colonies incolores de 0,5 à
2 mm de diamètre. L’isolement soigneux et l’identification précise des espèces est indispensable
dans ces conditions. Après 4 jours d’incubation, les streptocoques lactiques peuvent se développer
sous forme de petites colonies opaques blanches ou blanc jaunâtre.
FORMULE - TYPE
(pouvant être ajustée de façon à obtenir des performances optimales)
Pour 1 litre de milieu :
- Tryptone.........................................................................................10,0 g
- Gélatine............................................................................................2,5 g
- Extrait autolytique de levure.............................................................5,0 g
- Saccharose..................................................................................100,0 g
- Glucose............................................................................................5,0 g
- Citrate de sodium.............................................................................1,0 g
- Azide de sodium .........................................................................75,0 mg
- Agar agar bactériologique..............................................................15,0 g
pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25°C : 6,9 ± 0,2.
CONTRÔLE QUALITE
- Milieu déshydraté : poudre blanc cassé, fluide et homogène.
- Milieu préparé : gélose blanc crème.
- Réponse culturale typique après 72 heures d’incubation à 21°C :
Microorganismes Croissance
Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides ATCC® 14935
Leuconostoc mesenteroides subsp. cremoris ATCC 19254
Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum ATCC 19255
Escherichia coli ATCC 25922
Lactococcus lactis subsp. lactis ATCC 11454
PRt 70%
PRt 70%
PRt 70%
inhibée, score 0
inhibée, score 0
STOCKAGE / CONSERVATION
Milieu déshydraté : 2-30°C.
- La date de péremption est mentionnée sur l’étiquette.
- Milieu préparé en flacons : 6 mois à 2-8°C (à titre indicatif).
- Milieu préparé en boîtes : 15 jours à 2-8°C (à titre indicatif).
PRESENTATION Code
Milieu déshydraté :
- Flacon de 500 g BK087HA
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g
2,5 g
...5,0 g
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après 72 heures d’incubation à 212 heures d’incubation à 2
Microorganismes oorganismes
ss
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REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
Mayeux, J.V., Sandine, W.E., and Elliker, P.R. 1962. A selective medium for detecting Leuconostoc in mixed-strain starter
cultures. J. Dairy Science, 45: 655-656.
Buttiaux, R., Beerens, H., et Tacquet. 1962. Manuel des techniques bactériologiques. 4ème Ed. Flammarion, 455-458.
Devoyod, J.S., et Muller, M. 1969. La flore microbienne du fromage de Roquefort. Les streptocoques lactiques et les
Leuconostoc. Le lait, 49: 369-399.
FIL-IDF 149A. Juillet 1997. Levains lactiques de cultures de bactéries lactiques. Norme de composition.
XP CEN ISO/TS 11133-2 (V 08-104-2). Janvier 2004. Microbiologie des aliments. Guide pour la préparation et la production
des milieux de culture. Partie 2 : Guide général pour les essais de performance des milieux de culture.
Les mentions portées sur l’étiquette sont prédominantes sur les formules ou les instructions décrites dans ce document.
Les informations et les spécifications contenues dans cette fiche technique ont été établies à la date du 2009-02-10.
Elles sont susceptibles d’être modifiées à tout moment, sans préavis.
Code document : BK087/F/2000-11 : 4.
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Grosseron
préparation et la productionet la production
culture.