Ben Si Ali Zoubida Febrer Peggy Roy Nicolas BCP4A2 TP 1 : La glycémie et sa régulation. I- Introduction La régulation de la glycémie dans le système sanguin tient un rôle très important. Le taux de sucre dans le sang doit être régulé de façon permanente et adapté aux besoins de l’organisme. C’est notamment le cas des hormones telles que l’insuline (hormone hypoglycémiante) et le glucagon et l’adrénaline (hyperglycémiante). A jeun, une glycémie normale atteint les 0,8g/L de sang. Nous mesurerons à travers ce TP comment évoluent les concentrations de glucose dans le sang après diverses injections, par mesures photo colorimétriques. II- Matériel et méthode. Nous allons travailler sur un rat anesthésié et a jeun depuis 24h. Nous plaçons un cathéter dans la veine jugulaire, afin de pouvoir injecter les substances et aussi pouvoir prélever le sang de l’animal, et réalisons une trachéotomie pour éviter que le rat ne s’étouffe. Matériel a notre disposition : -cathéter, seringues, fil à coudre -insuline -glucagon -héparine -NaCl a 9‰ -matériel a dissection -Vortex, centrifugeuse Apres injection d’une substance listée ci-dessus, nous faisons un prélèvement de sang afin de suivre la concentration en glucose dans le sang au cours du temps. Nous mélangeons ce sang a une enzyme (la glucose oxydase) qui catalyse l’oxydation du glucose. La quantité de colorant formé est proportionnelle à la concentration en glucose des échantillons. III- Résultats obtenus Densité optique des différents échantillons : NaCl Glucagon Insuline DO. blanc 0 0 0 Standard 0,129 0,083 0,120 Tube 1 à To 0,146 0,761 0,150 Tube 2 à To + 10min : 0,134 5min : 0,341 10min : 0,108 Tube 3 à To + 20min : 0,123 15min : 0,505 20min : 0,124 Tube 4 à To + 30min : 0,120 20min : 0,492 30min : 0,100 Détermination des concentrations de glucose dans le sang du rat a différents temps, exprimé en g/L : [Glucose] échantillon = (DO échantillon / DO standard) x [Glucose] standard Avec [Glucose] standard = 1 g/L Concentrations de glucose en g/L dans les échantillons : NaCl Glucagon Insuline DO. blanc 0 0 0 Standard 1 1 1 Tube 1 à To 1,132 9,168 1,25 Tube 2 à To + 10min : 1,038 5min : 4,108 10min : 0,9 Tube 3 à To + 20min : 0,953 15min : 6.084 20min : 1,033 Tube 4 à To + 30min : 0,930 20min :5,927 30min : 0,833 IV – Traçage des courbes [glucose] = f (temps) V – Interprétation des résultats Pour le rat ayant reçu des injections de NaCl a 9‰ : On constate une légère baisse du taux de glucose dans le sang (chute d’environ 0,2 g/L en 30 minutes). On peut conclure que le NaCl ne joue aucun effet sur le stockage ou relargage du glucose dans l’organisme. La diminution de la glycémie étant due probablement au métabolisme du rat. Pour le rat ayant reçu des injections d’insuline : Nous pouvons remarquer que le taux de glucose dans le sang du rat dans lequel nous avons injecté de l’insuline diminue au cours du temps. L’insuline est une hormone hypoglycémiante elle va favoriser le stockage de glucose et la diminution de la glycémie. Pour le rat ayant reçu des injections de glucagon : Lors de cette expérience nous pouvons remarquer une aberration dans les résultats obtenus. Ces aberrations viennent surement d’une erreur de dilution avant la prise de mesure. On remarque une légère baisse du taux de glucose puis une soudaine augmentation de la glycémie au bout de 10min d’expérience. Le glucagon en se fixant sur ses récepteurs va permettre l’activation d’une protéine kinase qui va permettre la phosphorylation de la phosphorylase kinase. Celle-ci permettra ensuite l’hydrolyse du glycogène en glucose. Ce qui va donc entraîner une augmentation de la dégradation du glycogène au niveau du foie. Il se produit donc une libération de glucose dans le sang : le glucagon est une hormone hyperglycémiante. Prévision des variations de la glycémie lors de l’injection d’adrénaline : L’adrénaline est comme le glucagon une hormone hyperglycémiante on peut donc s’attendre à des effets similaires. L’adrénaline est issue de la médullosurrénale, sa production augmente lors d’un stress ou d’un effort. En agissant sur la glycogénolyse elle provoque une augmentation de la glycémie et permet un apport rapide en glucose aux muscles lors d’un effort. L’adrénaline provoque bien des effets similaires à l’injection de glucagon : tout deux augmente le taux de glucose dans le sang. La régulation de la glycémie met en jeu le système hormonal (insuline, glucagon, adrénaline), ainsi que plusieurs organes (foie et pancréas principalement). Cette régulation fait partie des processus de maintien de l'homéostasie au sein de l'organisme. Cette régulation est très précise car doit subvenir a différentes actions, telles que la nutrition cellulaire (essentielle pour le cerveau par exemple), ou encore l’adaptation au métabolisme de l’individu (activité sportive, stress…)