RECUEIL INTERNATIONAL DES METHODES D’ANALYSES – OIV
Acide L-malique – Méthode enzymatique
OIV-MA-AS313-11 : R2009 2
3.3. Suspension de glutamate-oxaloacétate-transaminase (GOT) à 2 mg/ml.
La suspension est stable pendant au moins un an à + 4 °C.
3.4. Solution de L-malate-deshydrogénase (L-MDH) à 5 mg/ml.
La solution est stable pendant au moins un an à + 4 °C.
Remarque : L'ensemble des réactifs nécessaires pour le dosage est disponible dans le
commerce.
4. Préparation de l’échantillon
Le dosage du L-malate s'effectue généralement directement sur le vin sans
décoloration préalable et sans dilution, à condition que la teneur en acide
Lmalique soit inférieure à 350 mg/l (mesures à 365 nm). Sinon, procéder à la
dilution du vin avec de l'eau bidistillée de sorte que la concentration en
Lmalate se situe entre 30 et 350 mg/l (quantité de L-malate dans la prise
d'essai comprise entre 3 et 35 µg).
Si la concentration en malate du vin est inférieure à 30 mg/l le volume de la
prise d'essai peut être augmenté jusqu'à 1 ml. Dans ce cas le volume de l'eau à
ajouter est réduit afin que les volumes totaux soient les mêmes dans les deux
cuves.
5. Mode opératoire
Le spectrophotomètre étant réglé sur la longueur d'onde 340 nm, les mesures
d'absorbance se font dans les cuves de 1 cm de trajet optique, l'absorbance zéro
étant réglé par rapport à l'air (pas de cuve sur le trajet optique) ou par rapport à
l'eau. Dans les cuves de 1 cm de trajet optique introduire :
Témoin Dosage
Solution 3.1 ………………….……………………. 1,00 ml 1,00 ml
Solution 3.2 …………………………………….…. 0,20 ml 0,20 ml
Eau bidistillée ………………………………….…. 1,00 ml 0,90 ml
Suspension 3.3 ……………….……………….…. 0,01 ml 0.01 ml
Echantillon ……………………….…………….…. - 0,10 ml
Mélanger ; après environ 3 min., mesurer les absorbances des solutions témoin et
dosage (A1). Ajouter :
Solution 3.4 ………………………………………. 0,01 ml 0,01 ml
Mélanger ; attendre la fin de la réaction (environ 5 à 10 minutes) et mesurer les
absorbances des solutions témoin et dosage (A2).
Déterminer les différences d'absorbances (A2 - A1) du témoin et du dosage.