> sciences

6La Lettre du Cancérologue - Suppl. Les Actualités au vol. XIV - n° 1 - mars 2005
Coordonné par S. Faivre (hôpital Beaujon, Clichy)
et C. Tournigand (hôpital Saint-Antoine, Paris)
> Cancer Research
> Clinical Cancer Research
> Journal of the National
Cancer Institute
> Nature Medicine
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ACTUALITÉS
oncosciences
oncosciences
>
ACTUALITÉS
oncosciences
oncosciences
C
ause ou conséquence du processus
cancéreux, l’aneuploïdie joue pro-
bablement un rôle majeur dans la carci-
nogenèse. Cette aneuploïdie résulte d’une
mauvaise ségrégation chromosomique
lors de la mitose, liée à un dysfonction-
nement du contrôle du fuseau mitotique.
Les protéines majeures responsables de
ce contrôle sont chez l’homme MAD1,
MAD2, BUB1, BUB3, BUBR1 et MPS1,
mais il en existe d’autres. Jusqu’ici,
l’implication directe de ces protéines
dans la carcinogenèse est restée diffi-
cile à prouver, mais de plus en plus de
travaux récents tendent à démontrer
leur rôle dans les cancers humains.
Ici, des mutations constitutionnelles
bialléliques de BUB1 ont été identifiées
dans des familles atteintes de MVA
(mosaic variegated aneuploidy), un
syndrome récessif caractérisé par des
aneuploïdies en mosaïque, principale-
ment des trisomies et monosomies
impliquant divers chromosomes. Les
individus affectés ont entre autres ano-
malies un retard de croissance et une
microcéphalie. Surtout, ces individus
ont une susceptibilité élevée à déve-
lopper des cancers, notamment des
rhabdomyosarcomes, des tumeurs de
Wilms et des leucémies.
Les auteurs ont recherché les mutations
de BUB1 dans huit familles atteintes de
MVA : cinq d’entre elles ont été identi-
fiées. Ces mutations sont bialléliques,
associant un “faux sens” et une muta-
tion tronquante. Deux des sujets pré-
sentant une mutation ont développé un
rhabdomyosarcome.
Une seule mutation somatique de BUB1
a été identifée lors du screening de
BUB1 dans des cancers humains.
Aneuploïdie constitutionnelle
et prédisposition au cancer dues
à des mutations bialléliques
de BUB1B
>
L’activation de PTEN contribue
à l’inhibition tumorale
par le trastuzumab et la perte
de PTEN est prédictive
de la résistance au trastuzumab
chez les patients
>
L
a présence d’une surexpression de
HER2/neu/ERBB2 +++ en IHC ou
d’une amplification en FISH du gène
est prédictive de la réponse au trastu-
zumab (Herceptin®). Cependant, parmi
les cancers du sein (environ 20 %) ayant
cette caractéristique, on observe au plus
35 % de réponses lors d’une monothé-
rapie par trastuzumab. Plusieurs hypo-
thèses ont été formulées à ce jour pour
expliquer cette résistance de novo,
dont aucune n’a pu être validée sur des
échantillons de cancers mammaires
humains. Le mécanisme validé de
l’activité du trastuzumab comporte
la downregulation de ERBB2 et donc
des signaux oncogéniques en aval
(PI3K/AKT). Ici, les auteurs ont étudié
le rôle de l’activation de PTEN dans
l’activité du trastuzumab. PTEN est un
gène suppresseur de tumeur, à activité
phosphatase, antagoniste de PI3K et
régulateur négatif de AKT. Les auteurs
Cependant, une diminution de l’expres-
sion du gène a parfois été montrée dans
ces tumeurs. Ces données, ajoutées à la
mise en évidence de mutations de BUB1
dans un syndrome de prédisposition au
cancer, suggèrent que l’aneuploïdie,
secondaire au déficit fonctionnel du
point de contrôle du fuseau mitotique,
pourrait contribuer au développement
du cancer.
F. Lerebours
Centre René-Huguenin, Saint-Cloud
> Hanks S et al. Nat Genet
2004;36(11):1159-61.

La Lettre du Cancérologue - Suppl. Les Actualités au vol. XIV - n° 1 - mars 2005 7
ont montré que la fonction phospha-
tase de PTEN est en fait rapidement
activée par le trastuzumab, avant même
la diminution de l’activité de ERBB2. Le
trastuzumab déphosphoryle rapidement
AKT, diminue la quantité de Src lié à
ERBB2. Normalement, Src, lié à ERBB2,
phosphoryle PTEN et l’inactive. Le tras-
tuzumab inhibe la liaison Src/ERBB2,
d’où une augmentation de l’activité de
PTEN (déphosphorylation de PIP3).
Aussi bien in vitro qu’in vivo et chez
des patients, les auteurs ont montré dans
cet article conséquent qu’un faible
niveau d’expression de PTEN entraîne une
moindre réponse au trastuzumab. Il se
trouve que PTEN est “inactivé” dans
presque 50 % des cancers du sein (par
mutations, LOH ou modifications épigé-
nétiques) : cela pourrait donc expliquer
tout ou partie de la résistance au tras-
tuzumab dans les cancers du sein, même
ou dans des tumeurs opérables, repré-
sentent la situation idéale d’étude de
tels marqueurs, la réponse clinique
et/ou histologique étant alors corrélée
avec le niveau d'expression du ou des
marqueurs.
Ici, une large série de 399 tumeurs
mammaires T2-T4, N0-N2, M0 a été
traitée selon divers régimes de chi-
miothérapie première, après caractéri-
sation prospective des données anato-
mocliniques et biologiques sur une
biopsie initiale (RE/RP, Ki67, HER2).
De façon tout à fait intéressante, ces
données ont été corrélées à la réponse
pathologique complète et au statut
N- lors de la chirurgie, sachant que ces
objectifs d’étude sont les plus validés
et les plus utilisés dans les études
néo-adjuvantes récentes et en cours.
La survie sans rechute (DFS) a également
été étudiée.
En analyse multivariée, le taux de
réponse pathologique complète est
très lié à l’absence de RH et à un
grade 3, et celui du curage négatif à
l’absence de RH, à une taille tumorale
inférieure à 5 cm et à une chimiothé-
rapie incluant du 5-FU en perfusion
continue. À noter le regroupement des
RH positifs et faiblement positifs dans
cette analyse multivariée.
Ni Ki67 ni HER2 – quoi qu’un lien dis-
cret soit observé en cas de chimio-
thérapie par anthracyclines – n’a de
valeur prédictive. Curieusement, l’aug-
mentation significative du taux de
réponse pathologique complète ne
contrecarre pas le pronostic défavo-
rable en termes de DFS des tumeurs
non hormonosensibles. Dans le modèle
de COX, l’absence de RH est même le
prédicteur le plus significatif de la
DFS. Le statut N- lors de la chirurgie
est, en revanche, prédictif à un degré
moindre d’une meilleure survie sans
rechute.
PTEN
PI3K
PIP3
Voie
de AKT
PIP2
Progression
tumorale
en cas de surexpression de HER2/neu.
D’un point de vue thérapeutique, les
inhibiteurs de PI3K – ou la restaura-
tion de la fonction de PTEN – pour-
raient ainsi empêcher dans certains cas
cette résistance au trastuzumab.
F. Lerebours
> Nagata Y et al. Cancer Cell
2004;6(2):117-27.
A
ucun marqueur phénotypique ou
génotypique prédictif de réponse
aux traitements du cancer du sein
n’a été validé en dehors de HER2 et
RE/RP, respectivement prédictifs de
la réponse au trastuzumab ou à une
homonothérapie. Le rôle des récep-
teurs hormonaux dans la réponse à la
chimiothérapie a été rarement étudié,
avec des conclusions contradictoires.
Les traitements néo-adjuvants, dans
des cancers du sein localement avancés
ERBB2
Src Src
PTEN PTEN
P
PI3K
PI3K
AKT
AKT
P
Progression
tumorale
Progression
tumorale
Tz Tz
ERBB2
La chimiothérapie est
plus efficace chez les patientes
atteintes de cancer du sein
n’exprimant pas les récepteurs
aux hormones stéroïdes :
une étude de traitement
préopératoire
>

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8
Coordonné par S. Faivre et C. Tournigand
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oncosciences
>
25 sont différentiellement exprimés
dans ces échantillons entre H0 et H24.
Deux de ces gènes (p21
WAF1/CIP1
et MIC-1)
sont notamment surexprimés dans 95 %
des échantillons postchimiothérapie,
à H24. Certains résultats ont été vali-
dés en RT-PCR quantitative. Dix paires
ont également été analysées avec les
quelques 22 000 gènes de la plate-
forme Affymetrix, avec des différences
de résultats entre les deux plates-formes
utilisées. À noter, par ailleurs, des dif-
férences (non précisées dans l’article)
entre les gènes induits par les deux
types de chimiothérapie, Endoxan®/ cyclo-
phosphamide versus Endoxan®/ Taxotere®.
Cet article est le second à utiliser les puces
pour démontrer des changements rapides
d’expression de gènes après chimiothé-
rapie première dans le cancer du sein,
susceptibles de servir de marqueurs
prédictifs. La seconde étape est bien sûr
la corrélation avec la réponse patho-
logique et/ou le devenir des patients.
F. Lerebours
> Modlich O et al. Clin Cancer Res
2004;10(19):6418-31.
Jusqu’alors, seule l’étude du NSABP-B27
avait mis en évidence de façon aussi
significative la valeur de la négativité
des RH dans l’obtention d’un réponse
histologique complète.
F. Lerebours
> Colleoni M et al. Clin Cancer Res
2004;10(19):6622-8.
L
a valeur pronostique et/ou prédic-
tive d’un marqueur unique étant
probablement faible, on s’oriente de plus
en plus vers l’étude de marqueurs mul-
tiples à l’aide, par exemple, des puces
à ADN. Les premières études en DNA
micro-arrays de marqueurs prédictifs à
une chimiothérapie néo-adjuvante dans
des cancers du sein commencent du reste
à être publiées. Une autre approche,
dans cette situation, consiste à étudier
les variations d’expression de gènes en
pré/post-traitement, les marqueurs can-
didats voyant leur expression varier
sous traitement, et de corréler ultérieu-
rement la réponse avec ces variations
d’expression. Cette étude n’est que la
seconde de ce type à être publiée.
À partir de 50 échantillons appariés
(25 pré- et post- Endoxan®/cyclo-
phosphamide ou Endoxan®/Taxotere®),
les auteurs ont d’abord sélectionné
249 gènes exprimés à un niveau moyen
dans au moins 6 des 50 échantillons
parmi environ 12 000 gènes (plate-
forme Clontech). Fait intéressant, sur la
base d’expression de ces 249 gènes,
90 % des échantillons d’un même patient
sont groupés. Parmi ces 249 gènes,
de membres de la famille est croissant,
et les données publiées portent géné-
ralement sur un seul de ces membres,
dans un petit nombre de lignées cellu-
laires dont la sensibilité à un petit
nombre de drogues est testée. Au total,
après 25 ans d’études, peu de données
sont clairement validées. Les auteurs
ont ici développé une approche phar-
macogénomique pour préciser les rela-
tions entre les gènes ABC et la sensi-
bilité aux anticancéreux. Le niveau
d’expression de chacun des 48 gènes
connus de la famille ABC a été étudié
en RT-PCR quantitative en temps réel
dans les 60 lignées cellulaires utilisées
au NCI (NCI-60) pour tester les nou-
veaux anticancéreux. La PCR quantita-
tive en temps réel évite les écueils
propres aux microarrays : elle permet
d’étudier l’expression de gènes très
homologues – c’est le cas dans cette
famille – et de gènes d’expression
faible. Pour mémoire, lors de la carac-
térisation de NCI-60 en cDNA arrays,
seuls 15 des 48 gènes étaient “repré-
sentés”. L’expression en mRNA de ces
48 gènes a été corrélée à la sensibilité
des 60 lignées à 1 429 agents anti-
cancéreux. Cent trente et un “couples”
drogues-gènes ABC ont été mis en évi-
dence sur la base d’une corrélation
négative entre l’expression du gène et
la cytotoxicité observée. Certains résul-
tats étaient “attendus”, comme, par
exemple, certains des substrats connus
de ABCB1, ce qui permet de valider
l’approche. Curieusement, l’expression
d’ABCB1 est parfois corrélée à une plus
grande sensibilité à tel agent.
Les auteurs proposent donc ici une
méthode simple, fiable, reproductible
pour identifier de nouveaux substrats et
transporteurs impliqués dans la résis-
tance multidrogue.
F. Lerebours
> Szakacs G et al. Cancer Cell
2004;6(2):129-37.
Modifications précoces
de l’expression génique
après le premier cycle
de chimiothérapie néo-adjuvante
chez des patientes atteintes
de cancer du sein
>
L
a résistance des cellules cancé-
reuses aux drogues est l’un des
écueils majeurs dans le devenir des
patients atteints de cancer. L’associa-
tion entre les protéines transporteuses
de la famille ABC (ATP binding cassette)
et cette résistance aux drogues anti-
cancéreuses est connue depuis 25 ans, le
chef de file de cette famille étant ABCB1
(glycoprotéine P, produit du gène MDR1),
impliqué dans la résistance multi-
drogue (anthracyclines, vinca-alcaloïdes,
taxanes, etc.). Cependant, le nombre
Prédiction de la sensibilité
et résistance aux drogues :
profil des gènes de transporteurs
ABC dans les cellules tumorales
>
.../...

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de génotype 2R/2R, 2R/3R ou 3R/3R
présentent un risque de toxicité de
grade 3-4 de 43 %, 18 % et 3 % res-
pectivement. En revanche, ces poly-
morphismes ne sont pas associés à la
réponse au 5-FU, ni à la survie des
patients recevant une chimiothérapie
de 5-FU en situation palliative. Cette
étude montre que les patients de
génotype 2R/2R présentent un risque
vingt fois supérieur d’avoir une toxi-
cité de grade 3-4 au 5-FU, compara-
tivement aux patients de génotype
3R/3R. Ces données laissent entre-
voir la possibilité d’utiliser le géno-
typage du gène TYMS pour prédire
la toxicité du 5-FU. Ce génotypage
pourrait permettre d’individualiser les
traitements des patients atteints de
cancers colo-rectaux et d’optimiser la
chimiothérapie.
V. Le Morvan
Institut Bergonié, Bordeaux
> Lecomte T et al. Clin Cancer Res
2004;10:5880-8.
L
e but de cet article provenant du
groupe de P. Laurent-Puig est
de déterminer si, chez des patients
atteints de cancers colo-rectaux, les
polymorphismes du gène TYMS de la
thymidylate synthase (TS) sont pré-
dictifs de la toxicité du 5-fluoro-ura-
cile (5-FU), et s’ils sont prédictifs de
la réponse tumorale et de la survie des
patients métastatiques. Ces polymor-
phismes sont la répétition deux fois
(2R) ou trois fois (3R) d’une séquence
de 28 paires de base (pb) du promo-
teur et la délétion (del6pb) ou l’inser-
tion (ins6bp) de 6 pb dans la région 3’
non traduite. Le génotypage est réa-
lisé par PCR des régions considérées.
L’étude vise à proposer une méthode
indirecte de détermination de l’ex-
pression de la TS, pouvant être une
bonne alternative à la détermination
de son activité. Le génotypage de
TYMS a été réalisé à partir d’ADN
extrait de tumeurs et de tissus nor-
maux de 90 patients (43 femmes et
47 hommes âgés de 42 à 83 ans)
atteints de cancers colo-rectaux et
traités par une chimiothérapie à base
de 5-FU (seul ou en association) en
situation adjuvante ou palliative. Une
corrélation entre les polymorphismes
du gène TYMS et les effets du traite-
ment de ces patients a été recherchée.
L’existence d’une liaison entre les
deux polymorphismes a été recherchée
et une analyse de l’haplotype a été
réalisée.
Les résultats montrent que les indivi-
dus homozygotes pour la double répé-
tition dans le promoteur (2R/2R) sont
plus sensibles au 5-FU : les patients
L
es mutations activatrices du
récepteur à tyrosine kinase FLT3
ont une fonction oncogénique dans
30 % des leucémies aiguës myéloblas-
tiques et dans un bon nombre de leu-
cémies aiguës lymphoblastiques. Une
approche thérapeutique en cours de
développement consiste à rechercher
des inhibiteurs de tyrosine kinase
activée de façon constitutive dans les
cellules malignes. Le paradigme de
cette approche est évidemment celui
de l’imatinib (Glivec®), actif entre autres
dans les sarcomes digestifs stromaux
par inhibition de l’activité tyrosine
kinase du récepteur KIT. On sait que
certaines mutations ponctuelles de
KIT s’accompagnent d’une résistance
à l’imatinib : d’où l’idée de rechercher
dès le départ des mutations de FLT3
qui entraîneraient une résistance des
cellules leucémiques aux inhibiteurs
de FLT3. Cette approche pourrait
permettre d’identifier de nouveaux
inhibiteurs de FLT3 actifs sur les
formes mutées et de personnaliser
l’indication thérapeutique en choisis-
sant l’inhibiteur a priori le plus actif
en fonction des mutations éventuelle-
ment présentes sur FLT3.
Dans ce travail provenant du groupe
de Gilliland à Boston, les auteurs
ont identifié in vitro quatre sites
de mutation du récepteur FLT3 qui
conduisent à une résistance au
PKC412, un inhibiteur de FLT3 en
développement clinique. Ces muta-
tions sont situées sur des sites clés
de l’activité tyrosine kinase de FLT3,
aux niveaux des aminoacides 627,
676, 691 et 697. Il est intéressant
de noter que certaines mutations
confèrent une résistance relativement
modeste, qu’une augmentation de
dose permet de vaincre, alors que
d’autres semblent impossibles à
circonvenir.
Malheureusement, aucun des autres
inhibiteurs connus de l’activité tyro-
sine kinase de FLT3 ne semble pouvoir
lever cette résistance, bien qu’ils
appartiennent à plusieurs familles chi-
miques différentes.
Voilà donc un nouveau jalon impor-
tant sur le chemin des thérapeutiques
ciblées et de l’individualisation des
chimiothérapies.
J. Robert,
Institut Bergonié, Bordeaux
> Cools J et al. Cancer Res
2004;64:6385-9.
Un polymorphisme
de la thymidylate synthase prédit
la toxicité du 5-fluoro-uracile
dans les cancers colo-rectaux
>
Prédiction de la résistance
aux inhibiteurs de FLT3 :
une approche de thérapie ciblée
des leucémies aiguës
>
.../...

La Lettre du Cancérologue - Suppl. Les Actualités au vol. XIV - n° 1 - mars 2005 11
par l’irinotécan. Enfin, il existe une
importante résistance croisée entre iri-
notécan et SN-38, ce qui permet de
minimiser le rôle de la carboxylesté-
rase 2 dans la résistance, alors qu’il
n’existe pas de résistance croisée entre
oxaliplatine et cisplatine, ce qui est en
faveur de l’originalité de l’oxaliplatine
par rapport aux composés classiques.
Par conséquent, une étude classique in
vitro qui n’apporte pas de révélations,
mais qui fournit d’intéressants modèles
d’étude des mécanismes de résistance
des cancers colo-rectaux à la chimio-
thérapie.
J. Robert
> Boyer J et al. Clin Cancer Res
2004;10:2158-67.
D
epuis l’identification en 1996 d’un
second récepteur des estrogènes,
RE `, de nombreux travaux ont été
menés pour comprendre son rôle biolo-
gique, en particulier dans le cancer du
sein. À la différence du récepteur _,
dont on connaît la valeur pronostique
favorable et la valeur prédictive de
réponse à la suppression estrogénique,
la portée clinique de RE `reste
obscure. Esslimani-Sahla, de l’équipe
de Rochefort à Montpellier, a quantifié
par immunohistochimie l’expression
nucléaire de RE `et de l’isoforme
RE `cx (ou RE `
2
) dans 50 carcinomes
mammaires RE
+
, HER2neu
–
, chez des
patientes ayant reçu du tamoxifène
comme seul traitement adjuvant, et
suivies depuis 1992 au centre Val-
d’Aurelle. Les quatorze tumeurs ayant
rechuté au cours des cinq années de
traitement (“hormonorésistantes”) ont
L
e groupe de Johnston à Belfast
rapporte dans cet article le résultat
d’une approche classique des méca-
nismes de résistance sélectionnés, dans
une lignée tumorale humaine d’origine
colique, HCT115, par exposition aux
trois cytotoxiques majeurs utilisés dans
le traitement des cancers colo-rectaux,
le 5-fluoro-uracile (5-FU), l’oxaliplatine
et l’irinotécan. Un élément important
est apporté par l’utilisation d’une
lignée isogénique invalidée pour le
gène de la p53 et la comparaison des
mécanismes de résistance obtenus dans
la lignée p53
+/+
et la lignée p53
–/–
.
Les mécanismes de résistance au 5-FU
ainsi sélectionnés concernent principa-
lement la diminution de l’expression de
la thymidine phosphorylase impliquée
dans l’activation du 5-FU en 5-FdUMP.
La résistance à l’oxaliplatine fait inter-
venir une augmentation de l’expression
de ERCC1, impliqué dans la réparation
des lésions de l’ADN par les platines, et
une surexpression de la protéine ABC de
transport appelée Breast Cancer Resis-
tance Protein (ABCG2). La résistance à
l’irinotécan fait quant à elle intervenir
une diminution de l’expression de la
carboxylestérase 2, enzyme d’activation
de l’irinotécan en SN-38, et de la topo-
isomérase I, cible du SN-38, ainsi qu’une
surexpression de la protéine ABCG2.
Dans la lignée sauvage p53
–/–
, la cyto-
toxicité du 5-FU et de l’oxaliplatine est
environ 5 fois plus élevée que dans la
lignée correspondante p53
–/–
, alors que
la cytotoxicité de l’irinotécan est iden-
tique quel que soit le statut p53. Cela
témoigne du rôle de p53 dans la mort
cellulaire induite par le 5-FU et l’oxali-
platine, mais pas dans celle induite
été comparées aux tumeurs “hormono-
sensibles” pour leurs principales carac-
téristiques.
◗Aucune corrélation n’est observée
entre l’expression de RE `et les fac-
teurs pronostiques habituels que sont
l’âge, le grade SBR, la taille tumorale, le
statut ganglionnaire, le RE _, le RP ou
le facteur de prolifération mib-1. Une
corrélation positive est notée entre
l’expression de RE `et celle de l’iso-
forme RE `cx.
◗Un taux plus faible de RE `est
observé dans les tumeurs ayant rechuté
sous tamoxifène, et cette faible expres-
sion apparaît, en analyse multifac-
torielle, comme la variable la plus
significative pour le risque de rechute
(p = 0,001), devant le grade SBR III
(p = 0,08) et un index de prolifération
cellulaire élevé (p = 0,016) : ainsi, le
niveau d’expression RE `serait un
facteur prédictif puissant de résistance
au tamoxifène, plus important que le
récepteur a des estrogènes. L’analyse de
RE `cx n’apparaît pas informative.
Ces résultats, observés rétrospective-
ment sur un petit échantillon de tumeurs
mammaires RE
+
traitées par tamoxifène,
confirment l’impression générale non
encore validée selon laquelle l’expres-
sion du récepteur `des estrogènes
serait associée à un pronostic favorable.
On ne peut néanmoins pas conclure que
le récepteur `a une valeur pronostique
supérieure à celle du récepteur _, à
partir d’une population sélectionnée
pour l’expression de RE _. Soulignons
également que la démonstration de la
valeur prédictive d’un marqueur impose
l’analyse simultanée d’une population
de patientes non traitées avec le
médicament étudié, ce qui n’a pas été
effectué ici.
M. Debled
Institut Bergonié, Bordeaux
> Esslimani-Sahla M et al. Clin Cancer Res
2004;10:5769-76.
Caractérisation
des mécanismes de résistance
à la chimiothérapie d’une lignée
tumorale d’origine colo-rectale
>
Le récepteur `
des estrogènes peut prédire
la résistance au tamoxifène
des cancers du sein
>