DIU Vaccin Berllier 2010

B. Bellier
DIU d’Immunologie - Biothérapies
Module 5 : Nouvelles stratégies vaccinales
Nouvelles stratégies
de vectorisation de l'antigène
Bertrand Bellier
UPMC CNRS UMR7211
Immunologie – Immunopathologie Immunothérapie
Pitié-Salpêtrière - Paris - France
[email protected]
Evolution des différents types de
vaccins depuis Jenner
B. Bellier
Les limites des vaccins classiques
B. Bellier
papillomavirus
Hep A/B
Attenuated
Killed
Rubella
Mumps
Measle
Polio Sabin
Purified subunit
Recombinant
VLP
Polio Salk
Yellow fever
DTP
Hepatitis A
Haemo Infl b
Hepatitis B
Hepatitis B
Pneumococcal
Influenza
Pertusis
Cholera
Tetanus
Tuberculosis
Plague
Smallpox
Diphteria
Typhoïd
1700 1800 1900 1910 1920 1930 1940 1950 1960 1970 1980 1990 2000 2010
Sécurité
Immunogénicité
CTL
Limites des vaccins classiques « non-vivants »
B. Bellier
•
Réponse immunitaire incomplète:
– Fortes réponses humorales
– Faibles réponses CTL
CTL
•
En lien avec les mécanismes de la
présentation antigénique
•
Déviation immunitaire Th2
•
Réponse CTL dépendante de la
cross-présentation
CD4
Vaccins
Inactivés/ Ss-U
+ alum
TH2
RIH
Justifications de l’absence de vaccin
contre micro-organismes émergents
B. Bellier
•
Inadéquation des vaccins classiques non-vivants
–
–
–
•
Réponse CTL insuffisante
Profil TH2
Limite pour la production d’ AC neutralisants
Inadéquation pour la lutte
–
Infections intracellulaires:
•
•
•
–
–
•
bactériennes
virales chroniques
parasitaires
Anti-tumorale
Absence des vaccins correspondants:
•
HIV, HCV, Respiratory Syncytial Virus (RSV); Epstein Barr Virus; Cytomegalovirus
•
Plasmodium,..
Adaptation des Pathogènes
–
–
–
Echappement au système immunitaire
Perturbations immunologiques
Infections chroniques
A la recherche du vaccin idéal
B. Bellier
•
+ Immunogène
ImmunoG
•
Protection à long-terme
•
Réponse immunitaire complète:
–
Anticorps neutralisants (a)
–
Anticorps (b)
–
T helper : cytokines
– CTL (c)
Rôle prédominant dans:
• Immunité anti-virale
• Immunité anti-parasitaire
• Immunité anti-tumorale
CTL
•
•
•
Production simplifiée
Coûts limités
Stable - Stock
Renforcement de l’immunogénicité
B. Bellier
•
Nature de l’Ag
–
–
–
•
Ag complet
Ag incluant les épitopes immunodominants (HLA-dépendant)
Epitopes neutralisants
Formulation de l’Ag
–
Quantité / Voie d’injection / Schéma d’immunisation
•
•
–
•
Empirique
Systémique vs locale
Augmenter l’immunogénicité: Adjuvants
Présentation de l’Ag
–
Activation T:
•
Règle des 3 signaux : TCR-CMH / Co-stimulation / Cytokines :
contribution des adjuvants
•
Présentation par APC:
– Vectorisation Ag vers APC
– Vectorisation Ag par APC
–
Génération des AC neutralisants
•
Respect de la conformation des antigènes
Renforcement des réponses CTL
B. Bellier
•
Nature de l’Ag
–
•
•
–
•
Vaccins
+ adjuvant
Ag protéiques intracellulaires
Ag nucléiques
Ag modifié pour augmenter
présentation CMH.I
Formulation de l’Ag
–
TH1
Adjuvants de type TH1
•
•
Chargement direct du CMH-I
Localisation Intracellulaire et
Processing CMH-I
Ag endogènes:
•
•
–
CTL
Épitopes CD8-spécifiques =
Vaccination peptidique
Cytokines Th1
Présentation de l’Ag
–
Favoriser la cross-présentation
RIC
+RIH
Application au modèle HCV
B. Bellier
•
Virus VHC
–
–
–
•
Epidémiologie
–
–
•
80% infection chronique
Inflammation chronique -> fibrose
cirrhose (20%) et cancer du foie (3-10%)
Traitement
–
•
Sang : intervention médicales sécurisées dès 1992;
40% usage drogue iv, Tatouage-piercing, cas
transmission mère-enfant (10%),
Physiopathologie
–
–
–
•
180 M personnes infectées dans le monde
0.8M en France; 3,9M aux USA
Transmission :
–
•
Flaviviridae, virus Env à ARN +
Découvert en 1989 (Choo et al)
Core Env E1 E2 NS
6 mois : Interféron-a + ribavirine (analogue
nucléosidique) : efficace à 55%
Limites au développement d’un vaccin:
–
–
–
–
Capacité de mutation de HCV -échappement à la
neutralisation (HVR1 E2)
Diversité: 6 génotypes et nombreux sous-génotypes
(>100 génotypes ≠)
Corrélat RI et protection ?
• Phase aigue: Guérisons spontanées: CTL antiNS3, Th1
• Phase chronique: Ig anti-E2 (HVR1) et CTL antiNS4
Modèles expérimentaux
• Pas de multiplication en culture cellulaire
• Manques d’outils expérimentaux : pas de
challenge viral chez les petits animaux ;
chimpanzé
B. Bellier
Nouvelles stratégies vaccinales
A. Nouveaux Adjuvants des Ag protéiques
B. Vaccins protéiques particulaires
C. Vectorisation des Ag protéiques par les APC
D. Vaccins génétiques
A.1. Adjuvants :
B. Bellier
•« adjuvare » : aider, assister
•Substance capable d’augmenter la réponse immune dirigée contre un Ag
administré simultanément.
•Multiples / classification complexe (selon mode d’action - effets)
– Adjuvants huileux :
•
émulsion eau-huile, IFA (Adjuvant Incomplet de
Freund), MF59 1997, AS03
– Adjuvant minéraux :
•
Précipité insoluble; Alum (Hydroxyde ou Phosphate
d’Alu), AS04
– Adjuvants vésiculaires
•
– ImmunoStimulating COMplexes
(ISCOM)
– Saponines
•
– Constituants bactériens:
•
Mycobactérie inactivée (Mycob tuberculosis) ou
constituants (Mycob bovis, BCG) : CFA
•
Dérivés lipidiques: MPL / AS04
•
Dérivés nucléiques: Oligodésoxynucléotides CpG
– Toxines bactériennes
•
Toxine cholérique (CT) ou ss-u B purifiée (CTB),
Toxine pertussique (PT)
Bicouche lipidique, liposomes - virosomes
Agent tensioactifs – Glycosides triterpeniques-; QuilA®, QS21 (AS02)
– Imidazoquinolones
•
Imiquinod, Interaction Rr des APC, ∑ cytokines
– Cytokines
•
Médiateurs des RI: IL-2, IL-12, IFN-g, GM-CSF
– Polysaccharides
•
Dextrans, glucanes, perméabilisent les muqueuses
A.2. Mécanismes d’action des adjuvants
B. Bellier
Effet « Dépôt/Carrier » versus Effet « Immunostimulateur »
The main type of adjuvants with respect to their depot/carrier and immunostimulatory properties are shown. Some compounds can possess
both characteristics whereas others possess only one. In addition, some of the adjuvants shown (red background) can have immunomodulatory
properties beyond their ability to trigger global immune stimulation, by directing responses specifically towards a T helper (TH) 1 or TH2
response. A third dimension (not represented here) is the specific targeting ability of adjuvants, although carrier/depot activity and ligand
specificity can contribute to targeting. ISCOMs, immunostimulating complexes; O/W, oil-in-water emulsion; PRR, pattern-recognition receptor;
TLR, Toll-like receptor; W/O, water-in-oil emulsion.
A.3. Nouveaux adjuvants :
Encapsulation des Ag protéiques
B. Bellier
•
Liposome
–
–
–
•
Immune-stimulating complexes (ISCOMS)
–
–
•
bicouche de phospholipides
obtenus par "sonication" d'un mélange d'un soluté aqueux et de
phospholipides (Cholestérol + Phosphatidylcholine).
Améliorations: Lipides-PEG (limite interaction avec macromol : +
biodistri)
Structure « cage »; 35nm
générée par un mixte de Quil-A (saponine) + Cholestérol +
Phosphatidylcholine
Avantages
–
–
–
–
Limitent la dégradation des Ag
Véhiculent jusqu’au ganglions
Délivrent Ag dans cytoplasme des cellules
• Renforce réponses CTL
Targeting optionnel (cf partie C)
•
•
Ciblage APC: si couplage avec : AC monoclonaux, Ligands, Peptides, …
Limites
–
–
–
–
Pas d’effet de dépôt
Fusion non-spécifique et non-contrôlée
Renforce pas l’immunogénicité des Ag
Production et Encapsulation limitantes
ISCOMs
B. Bellier
Données expérimentales pour VHC
A.3. Nouveaux adjuvants :
Encapsulation des Ag
B. Bellier
•
Virosome = Liposomes + enveloppes virales
•
Systèmes:
–
1ère génération: Influenza
•
–
Autres :
•
•
Epstein-Barr virus (Grimaldi 1995), HIV (Cornet 1990), VSV,
Sandai
Transport des antigènes:
–
–
•
Liposomes + HA+NA (H1N1) (Almeida 1975)
Protéines dans membrane (incorporées / couplage
chimique)
Encapsulation de peptides, protéines, ADN, ARN
Avantages
–
–
Limite dégradation des Ag
Administration intracellulaire des Ag encapsulés:
Renforce réponses CTL
–
–
•
Ciblage cellulaire ligand récepteur - couplage AC
Immunogénicité accrue: effet adjuvant des protéines
virales
Limites
–
–
Encapsulation : étape limitante
Fragilité des enveloppes virales (PH, …)
Données expérimentales pour VHC
B. Bellier
B. Bellier
B. Vaccins protéiques particulaires
Pseudo-particules virales
ou VLP (Virus-like particle)
Vectorisation des peptides et protéines
Virus like particles
B. Bellier
•
Pseudo-particules:
Complexe protéique de taille et de structure comparables aux
particules virale mais dépourvu de génome viral (déficients
pour la réplication)
•
Production:
–
Auto-assemblage des protéines de la capside virale
•
•
Hépatite B, Papillomavirus (HPV), Parvovirus
Système de production:
–
–
Généralisation à +30 virus différents par assemblage des protéines
de capside et d’enveloppe
•
•
SIV-HIV, HCV, Influenza, …
Vaccins VLP:
–
–
•
E.Coli, Levure, Baculovirus, Cellules mammifères
VLP homologues
VLP hétérologues transporteurs d’Ag
Intérêts:
–
–
–
–
–
Sécurité (pas réversion, compatible ID)
Poids moléculaire >
Présentation dans contexte naturel; bonne immunogénicité
(Bachmann M; Science, 1993)
Réponses AC neutralisants
Cross-présentation / CMH-I
Vaccin avec VLP homologues
Papillomavirus
B. Bellier
•
Vaccin contre le cancer du col de
l’utérus
•
Human papillomavirus (HPV-6, 11, 16, 18)
–
–
•
Essai vaccinal:
–
–
•
VLP formées par la capside L1 du virus
papillomavirus de type 6, 11, 16, 18
Schéma thérapeutique: 40mg VLP à J0, 2 et 6 mois
vs placebo
Résultats:
–
–
–
•
20% pop HPV-16 sero+
Risque associé de cancer du col de l’utérus (2nd
cause de mortalité dans les cas de cancer chez
la femme
Phase II: New England Journal Medecine 2002; 347, 1645
(VLP-16) n=1200
Phase II: Villa LL; Lancet Onc 2005 (VLP 6, 11, 16, 18)
n=277
Phase III: 7 oct 2005, USA
Préventif :
–
Gardasil : Merck. Vaccin quadrivalent produit chez la
levure contre les HPV- 6, 11, 16, 18.
Commercialisation nov 2006
–
Cervarix: Glaxo-Smith-Kline (GSK). Vaccin produit
par baculovirus contre les HPV-11,16 et 18.
Commercialisation mars 2008
•
Curatif :
–
VLP recombinantes: VLP L1-E7
B. Bellier
Vaccin avec VLP homologues
Hepatitis C
AS01: monophopshoryl lipid A +QS21 (saponine)
Vaccin avec VLP hétérologues
B. Bellier
•
•
Utilisation des VLP comme transporteur d’antigènes
Intérêts:
–
–
–
•
Origine des VLP:
–
–
–
•
Augmenter l’immunogénicité des antigènes
Signal de danger
Possibilité d’induire des RIH et RIC
HBV : HBc (Pumpens P, Intervirol 2002)
HPV
Rétrovirus
Accrochage antigénique: Chimique ou Recombinaison Génétique
Chimique
Génie génétique
VLP HBV - Ag HCV:
B. Bellier
HVR1-1a
HVR1-1b
B. Bellier
Retrovirus-based like particles
and vaccine application
Attractive model:
-genome sequence
-low structural
constrains of particles
-pseudotyped
Insertion of antigens in
Env and/or Gag
Antigens platform
Subsitution of MLV Env by
heterologous envelop
E1E2 glycoproteins from HCV
Gp120 or Gp41 from HIV
Pseudotyped
VLP
VLP release after cell transfection
B. Bellier
No transfected
HA H5
+
NA N1
+/MLV Gag
cotransfection
MLV Gag
293T
24h
Electronic
Microscopy
MLV Gag
+HA/NA (H5N1)
Collaboration Jan Mast ; CERVA Bruxelles
DC activation by RetroVLPs
B. Bellier
MLV-Gag-GFP
Gag-GFP
1, 3 or 10µg/ml
ENV
Env
24h
48h
immatures
hMoDC
293T cells
GFP
VLP0
CD40, CD83 and HLA-DR expression on DC
+0
+VLP0 GFP-
+ VLP0 GFP+
24h
48h
x400
CD40-PE
CD83-PECy5
HLA-DR-PECy7
HCV retroVLP
B. Bellier
HCV pseudotyped
retroVLPs
Gag
HCV E1/2
HCV-plasmoVLP
B. Bellier
C. Vectorisation des Ag protéiques vers les APC
1. Ciblage des APC
2. Vaccins cellulaires utilisant les dendritiques
C.1. Stratégie de ciblage des APC
B. Bellier
•
Ag de type « protéine de fusion » :
• ligand des DC
Adenylate cyclase
Bordetella Pertussis
• CD40L
• CTLA-4
– Modèle hépato-carcinome
– Ag = Alpha feto-protein AFP
– Fusion AFP-CTLA4
•
Klebsiella
pneumoniae
ompA
CD11b
CTLA-4
B7-1
TLR2
AC ScFv
•
Anti-DEC205
Elispot après vaccination
Geng Tiang, World J Gastro 2004
APC
D22 post challenge tumoral EL4-AFP
(2sem après vacc°im)
Nanovecteurs ciblant les DCs
B. Bellier
Anticorps
Aptameres
Nanoparticules
B. Bellier
DC
MΦ
RetroVLPs et Ciblage des cellules dendritiques
B. Bellier
Récepteur spécifique des DCs
DC
cibler les DCs pour améliorer les réponses induites par les rétroVLPs
ScFv
CD40L
RétroVLP
VSG*
DEC-205,
DNGR1
In vitro
CD40
hMoDCs
DC
DCsign
In vivo
Efficacité du
ciblage,
Activation DCs
C57Bl/6
Réponses
immunitaires
induites
C.2. Vaccins cellulaires :
Immunisation par les APC professionnelles
B. Bellier
•
Présentation des Ag à la surface des APC
•
Source des signaux 1+2+3
•
APC : Cellules dendritiques
–
–
–
–
•
Applications:
–
•
Vaccination thérapeutique anti-tumorale
(50 essais cliniques en cours)
Avantages
–
•
à partir des monocytes du sang périphérique
Maturation des DC: Importance de l’état d’activation des DC
Chargement antigènes:
• Antigènes peptidiques
• Protéines : Lysat tumoral
• Fusion cellulaire
• Transfection -Transduction (pour Ag nucléiques)
Injections (SC, IV, Intra LN)
Renforce efficacité de vaccination peptidique
Limitations
–
Préparation à grande échelle
B. Bellier
D. Vaccins génétiques
1. Vaccins ADN
2. Vecteurs viraux
D.1. Vaccination ADN
B. Bellier
•
Concept de près de vingt ans (Wolff, Science 1990)
L’injection dans le muscle de un ou plusieurs gênes sous
forme plasmidique permet la pénétration de l’ADN dans le
tissu et l’expression du gêne par les cellules de ce tissu.
•
Application à la vaccination
Immunogénicité des protéines exprimées in situ
•
Délivrance intra-cellulaire de l’Ag favorise présentation
MHC classe I : + réponses CTL
•
Réponses variables selon
–
nature de l’Ag:
1.
2.
3.
–
•
•
Intracytoplasmique
Membranaire
Sécrété
Dépend de la nature des cellules transfectées
Avantages:
– Production
– Stabilité
– Couts
Limites:
o Efficacité de transfection cellulaire
o Immunogénicité
o Réponses humorales / neutralisantes
Mécanisme de priming
B. Bellier
Choix du site d’injection
•Intra-Musculaire
Expression de l’Ag durable
Mais peu d’APC résidantes
•Intra-Dermo/Cutané
Tissus « immunogène » : Langerhans
(DC peau)
Mais durée de vie des cellules courte
Skin Section
Modalités d’injection de l’ADN
B. Bellier
•
ADN nu intramusculaire
–
–
–
•
•
Electroporation
–
–
Après IM
Perméabilisation membranes cellulaires
–
Q= 10µg
Injection par jet
–
–
–
•
Q = 100µg (souris)
+ Cardiotoxine (modèles animaux)
± adjuvants
Biojector-2000 ; Dermojet
Injection sous pression sans aiguille
Q=10µg
Biobalistique
–
–
–
–
Gene Gun, PowderJect
ADN sur billes d’or
Injection sous pression de gaz
Q= 1µg
•
Autres: Patch, Dermographe
•
Vectorisation de l’ADN
–
–
Biojector
(Bioject)
Liposomes, Virosomes, ISCOM
Vecteurs viraux ou bactériens
Gene gun
(Hélios Biorad)
PowderJet
(PowderMed)
B. Bellier
Influence of DNA delivery
for HCV-E1E2 vaccine
Huret C. et al. Manuscript in preparation
CHRONVAC-C®
B. Bellier
•
•
•
•
•
•
Vaccin ADN thérapeutique anti-HCV
Codon optimized NS3/4A-pDNA
Medpulser® DNA delivery system : IM+EP
Développement par Tripep depuis 1999
Phase I/IIa en cours (oct 2007)
Expected data in 2009
Optimisation des vaccins ADN
B. Bellier
1.
Codon-optimisation
2.
Séquences immunostimulatrices
internes
3.
Renforcement de l’expression de l’Ag
–
Favoriser entrée ADN
•
•
–
4.
Physique (modalités d’injection)
Véhicule (formulation)
Apprêtement de l’Ag (prise en charge
protéasome)
Renforcement de l’immunogénicité
(co-administration de molécules
immuno-stimulatrices)
–
–
–
Ciblage aux APC
Activation APC
Molécules de co-stimulation
•
–
Cellule transfectées = APC
Cytokines
•
•
Cytokines Th1
Production prolongée peut-être
problématique
PlasmoVLP
Strategy that combines the advantages of DNA and VLP vaccines
B. Bellier
plasmid DNA
VLP
T cells
DNA
B cells
-Efficient CTL immune responses
-Low antibody immune responses
CD8+
VLPs
-Particulate form enhances immunogenicity
-“Natural” conformation of antigen presentation favors
B cells activation and neutralizing Ab production;
-Easly uptake by DCs,
DCs
CD4+
-Cross-presentation of CTL antigen.
CD8+
PlasmoVLPs
-Broad immune responses
-Circumvent in vitro VLPs production
-Flexible genetic design
Ag cross-presentation
to CD8+ T cells
B. Bellier
Constructions
and vaccine applications
Attractive model:
-genome sequence
-low structural
constrains of particles
-pseudotyped
Insertion of antigens in
Env and/or Gag
Antigens platform
Subsitution of MLV Env by
heterologous envelop
E1E2 glycoproteins from HCV
Gp120 or Gp41 from HIV
Pseudotyped
VLP
Plasmo-VLP / Plasmo-NoVLP
evaluate the importance of VLPs formation
B. Bellier
Plasmo-VLP
G2A
Plasmo-NoVLP
No VLPs
Gag
Western Blot
G2A mutation in Gag prevents the myristylation
of capsid proteins and thus VLPs release
Supernatant
75 kD
Gag
25 kD
Absence of VLPs formation
with plasmo-NoVLP
- + oVLP P-VLP
N
P-
Avantages de la vectorisation des antigènes par les rétroVLPs
après vaccination ADN
B. Bellier
Réponse cellulaire
Réponse humorale
pVLP
pNoVLP
Immune protection
B. Bellier
Challenge (+10d)
Immunisation:
MLV plasmoVLP
-28
-14
0
+10
DNA vaccines
(Gene gun)
+30
MPLV
+
Genetic
adjuvants
days
PlasmoVLP
survival
Challenge :
MPLV
Immunisation schedule
naive
MPLV challenge
Plasmo-nonVLP
murine proliferative
leukemia virus
+ CpG
survival
Challenge (+30d)
+ pGM-CSF/pIL-12
Days post-challenge
HCV application
Prime
B. Bellier
HCV pseudotyped
retroVLPs
HCV E1/2
HCV-Adeno
108 pfu IM
HCV-plasmoVLP
H-2b
0
2
4
weeks
HCV.E1E2-specific
IFNg ELISPOT (Week 6)
DNA vaccines
(10ug, needle-free
injector)
Naive
HC
VAd
en
o
HC
+p V-p
IL- VL
12 P
HCV-Adeno
HC
VpV
LP
HCV-pVLP
Na
ive
Gag
B. Bellier
No boost
E2-specific Ab (WB)
E1E2-Plasmo-NoVLP
E1E2-PlasmoVLP
∆Ad E1E2
D0
needle-free
injector
D15
PlasmoVLPs are good candidates to boost both cellular
and humoral IR in prime-boost strategy
E2-specific ELISA
E1E2-specific IFNg ELISPOT
Day 45
Day 60
Day 60
D.2. Vecteurs viraux
B. Bellier
D.2. Vecteurs viraux
B. Bellier
•
Vecteurs viraux
–
–
Adénovirus
Poxvirus
• Vaccine : MVA, NYVAC
• Canarypox: ALVAC
• Fowlpox: FP9, TROVAC
–
Rétrovirus
• Oncorétrovirus MLV
• Lentivirus: HIV, SIV, FIV
–
Parvovirus
• AAV (dépendant)
• MVM, H1 (autonomes)
- Alphavirus
• Semliki Forest virus (SFV)
• Venezuelan equine encephalitis virus (VEE)
• Sindbis (SIN)
- Herpesvirus
• Herpès HSV-1
•
Papillomavirus
•
Human Papillomavirus (HPV)
•
Paramyxovirus
•
Sendaï
•
Rougeole (MV)
•
Rhabdovirus
•
VSV
•
Enterovirus
•
Poliovirus
•
Augmente l’efficacité de transduction
–
•
Permet de diminuer les quantités d’ADN
Renforce l’immunogénicité:
–
–
« visibilité » des complexes ISCOM, des vecteurs viraux ou bactériens
Prise en charge préférentielle par les APC
B. Bellier
Avantage des Vecteurs viraux :
apport d’un signal de danger
Développement des vaccins viraux
B. Bellier
Adenovirus versus MVA
B. Bellier
Adenovirus
B. Bellier
Vecteurs adénovirus non-réplicatifs
Adénovirus mutants délétés pour les régions E1-E3. `
Double délétion autorise une taille du transgène supérieure
Différents sérotypes existants
Avantage:
Episomal: pas d’insertion
Nécessite pas de division cellulaire
Forts titres viraux
Injection systémique ou locale
Limites:
Immunité-Préexistante
Vaccine recombinante
B. Bellier
•
Virus de la vaccine (vaccinia)
–
–
–
–
•
ds DNA
Utilisé pour éradication de la variole (smallpox)
Réplication dans cytoplasme des cellules infectées
Spectre + large que variole
Souches vaccinales
– Ankara / MVA = Modified Vaccinia Ankara
après passage 570 sur cellules de poulet
≠ 10% du génome avec VV
faible réplication dans cellules humaines
– NYVAC
dérive de souche de Coppenhagen par délétion de 18 ORFs
Virus atténué
•
Vaccine recombinante
–
–
–
•
Ag inséré dans génome viral (par recombinaison homologue)
Virulence réduite
Quantité Ag amplifiée au cours de la réplication
Applications:
– nombreux essais cliniques HIV à partir de MVA
– Et essais anti-tumoraux:
• rVV-CEA
• rVV-CEA/TRICOM : B7-1, ICAM-1, and LFA-3 Kudo-Saito C (Clin
Canc Res 2004)
• rVV-PSA; cancer prostate : Essai phase II (Kaufman HL, 2004, J Clin
Oncol)
MVA-HCV
B. Bellier
•
TG 4040, vaccin thérapeutique
•
TG 4040 est basé sur le Modified Virus Ankara (MVA), souche du virus
de la vaccine (VV) hautement atténuée, non propagative, portant des
séquences nucléotidiques codant pour les protéines non-structurales
NS3, NS4 et NS5B du virus de l’hépatite C .
•
La stratégie vaccinale consiste donc à induire une réponse immune
forte (cellules T CD4+ et CD8+ spécifiques) contre les protéines NS3,
NS4 et NS5B, de manière à détruire les cellules infectées par le virus de
l’hépatite C.
•
Les premiers patients ont été inclus dans une étude clinique de phase I
en février 2007
Cette étude clinique, conduite en France, inclura 15 patients porteurs
chroniques du virus de l’hépatite C (VHC) n’ayant reçu aucun traitement
contre leur infection. Ces patients recevront une injection sous-cutanée
par semaine pendant trois semaines de TG4040 à la dose de 106 pfu (3
patients), 107 pfu (3 patients) et 108 pfu (9 patients). Les patients
traités avec la plus forte dose recevront une injection complémentaire
(« boost ») au sixième mois. L’objectif principal de l’étude consiste à
évaluer la tolérance au produit, les objectifs secondaires étant la
réponse immunitaire au vaccin et son effet sur la charge virale.
•
Vecteurs viraux recombinants :
Limite des Vecteurs viraux
B. Bellier
•
Sécurité:
–
–
•
Risque de recombinaison avec virus
sauvages
Risque d’intégration (rétro – lenti )
Pré-immunité naturelle:
–
–
–
vecteurs adénovirus
espèces virales nouvelles
Modifications des déterminants
antigéniques
Prime-boost
•
Immunité induite spécifique du
vecteur:
–
interdit des immunisations répétées
Justification:
Contournement de l ’immunité induite contre le 1er vecteur
Modalités
Prime: J0 / Boost J30
Avantages:
Expansion des lymphocytes mémoire à haute affinité
B. Bellier
Viral-vector vaccines and
prime–boost immunization
regimes in clinical
development for human use
Choix des combinaisons de prime-boost
B. Bellier
B16F10-GP
Viral-vector vaccines
conclusion
B. Bellier
B. Bellier
Challenge pour le développement des nouveaux vaccins:
Associer Immunogénicité et Sécurité
ADN
Vecteurs
viraux
VLP
+/CpG
++/+
+++
Réponse
immunitaire
CTL+++
Ac +
CTL+++
Ac (Ag sécrété ou mb) +/+
CTL ++ (cross-p)
Ac , nAC +++
Sécurité
++
+
+++
Production
+++
++
+
Immunogénicité