PRATIQUE DE L`AUTOCONSERVATION DE GAMETES ET DE

CECOS FRANCHE-COMTE – BOURGOGNE
Site Besançon
Centre d’Etude et de Conservation des Œufs
et du Sperme humains.
Dr Oxana Blagosklononov
Service de Génétique biologiqueHistologie-Biologie du Développement
et de la Reproduction, CECOS
La loi 2004-800 - 6 août 2004 relative
à la Bioéthique :
activités de recueil et conservation
de gamètes et tissus germinaux sous
la responsabilité des praticiens de
l’AMP, agréés par l’Agence de
BioMédecine.
Nouvelle loi relative à la bioéthique
Article L 2141-11
En vue de la réalisation ultérieure d’une
assistance à la procréation, toute personne peut
bénéficier du recueil et de la conservation de ses
gamètes ou du tissu germinal, avec son
consentement et, le cas échéant, celui de l’un des
titulaires de l’autorité parentale, ou du tuteur….,
lorsqu’une prise en charge médicale est
susceptible d’altérer sa fertilité, ou lorsque sa
fertilité risque d’être prématurément altérée.
Obligation de moyens??
Possibilités actuelles de prévention d’une infertilité
post-thérapeutique en fonction du sexe et de l’âge des
patients :
- Après la puberté
- Avant la puberté
1- Autoconservation de gamètes:
- dès la puberté (Spermatozoïdes, ovocytes)
2 sexes inégaux :
congélation ovocytaire donne des résultats très inferieurs à la congélation du
sperme en terme de survie à la décongélation et de potentiel de fécondation
2- Autoconservation de tissus gonadiques:
- ovaire (adulte ou prépubère)
- testicule (adulte ou prépubère)
Conditions générales
Le consentement du patient
"consentement éclairé" loi de Bioéthique de 1994:
La demande de conservation est strictement
personnelle,
Les gamètes ne seront remises qu’au patient(e)
lui(elle)-même, présent(e) et consentant(e).
Le patient (la patiente) est informé qu'il(elle) sera
interrogé tous les ans sur son souhait de continuer
ou d'annuler la cryoconservation.
Si le patient est mineur, l'autorisation parentale
est nécessaire.
- Conditions sanitaires pré-requises +++
c Bilan sanitaire avant la congélation
- HIV 1 et 2
- HTLV 1 et 2
- Hépatite B (Ag HBs + Ac HBc + Ac Hbs)
- Hépatite C
- CMV (IgG + IgM)
- Syphilis
Le coût de la cryoconservation :
B 150 = 40,50 € par an
Frais de congélation en fonction du type de
prélèvement:
sperme B 350 = environ 100 €
1. CONGELATION DE GAMETES
1.1 -AUTOCONSERVATION DE SPERME
Pratiquée en France depuis 1973.
• en 1980 < 400 patients/ an
• en 2011 > 4000 patients/ an
A Besançon
AVANT UN TRAITEMENT POTENTIELLEMENT
STÉRILISANT :
•plus de 1000 spermes sont toujours
cryoconservés :
•33 500 « paillettes » qui représentent souvent la
seule chance de devenir père.
•conservation à long terme:
- une grossesse après 17 ans de conservation
-une demande après 24 ans de conservation
(1986-2010)
•Près de 100 grossesses.
0
1974
1975
1976
1977
1978
1979
1980
1981
1982
1983
1984
1985
1986
1987
1988
1989
1990
1991
1992
1993
1994
1995
1996
1997
1998
1999
2000
2001
2002
2003
2004
2005
2006
2007
2008
Autoconservation avant un traitement
potentiellement stérilisant
70
60
50
40
30
20
10
Cryoconservation de sperme
• QUI?
Tout homme jeune, devant subir un traitement stérilisant
quel que soit son statut matrimonial
• QUAND?
Avant tout ttt potentiellement stérilisant
protéger la fertilité masculine.
protéger le patrimoine génétique paternel du futur embryon d'effets
mutagènes, clastogènes de la chimiothérapie et / ou de la radiothérapie.
• COMMENT? RdV au CECOS 03.81.21.80.21
Fiche de renseignement rempli par le médecin
Accompagné d’un parent si patient mineur
Risque élevé d’infertilité
- Irradiation corps entier avant greffe de moelle
- Chimiothérapie avant greffe de moelle
- Radiothérapie pelvienne et/ou testiculaire
- Tumeurs des tissus mous métastatiques
- Maladie de Hodgkin : Agents alkylants
Quand faut-il adresser le patient au CECOS ?
Dès l'évocation du diagnostic :
Urgence : patients toujours reçus rapidement,
pour permettre plusieurs prélèvements si
nécessaire.
NB. Risque de difficultés pour le prélèvement en raison d'une
fatigue liée à la maladie, ou "barrage psychologique
Si la thérapeutique ne peut attendre, un seul
prélèvement sera congelé (le conditionnement de plvt
adaptée au volume, à la concentration des gamètes et la
technique de réutilisation éventuelle)
Démarche psychologiquement
TRES importante pour le patient.
Quelles informations fournir au patient ?
•Information sur le risque d'infertilité
Risque d'hypofertilité / stérilité
Risque de transmissions d'anomalies à l'enfant
conçu pendant le traitement (1 à 2 ans de contraception)
sperme normal
sperme déficient
FIV (Fécondation in vitro)
Fécondation Assistée avec ICSI
La seule impossibilité pour une
autoconservation de sperme est
l'azoospermie.
Il est important de se rappeler que l'on ne sait
pas et ne peut savoir quel patient risque une
stérilité définitive.
La Cryoconservation de sperme est
la "PRÉCAUTION" nécessaire.
Le conditionnement du sperme
•
cryoprotecteur à base de glycérol.
•
paillettes de plastique: identifiées au nom du patient.
•
La congélation par paliers dans un congélateur
programmable
Stockage à - 196°C (Azote liquide)
Constitution d'un stock de paillettes
La durée de la conservation est sans influence sur la
mobilité après décongélation, ni sur le pouvoir
fécondant du sperme conservé
Une reprise de la spermatogenèse est possible,
dans des délais très variables.
Elle est IMPREVISIBLE au plan INDIVIDUEL.
pratiquer un spermogramme de contrôle
2 ans après arrêt du ttt
Indications Autoconservations 2006 (Fédération CECOS)
Cong.
Hodgkin
312
334
15
4.8
12
3.8
7 565
LMNH
196
196
8
4,08
17
8,67
4 806
Autres
Hémato.
259
235
24
9.26
21
8,93
4 928
K. Test.
1 042
1073
48
4.6
27
2,59
29 004
Autres uro
210
212
15
7.14
12
5,71
4 253
Indic. Néphro.
17
22
1
5.88
0
0,0
526
Autres
cancers
364
364
13
3,57
22
6,04
8 597
Affect. Non
Cancéreuses
312
320
12
3,75
6
1,87
7 124
2 712
2 756
136
5,01
117
4,31
66 803
Total
Azoo. / %
Echec Rec. / %
Pat.
Pail.
2007  2 889 patients = 66 049 pt
• Enfant : préservation de la fertilité
– A partir de 13-14 ans : spermatozoïdes
– Avant 13-14 ans
• Pas de spermatozoïdes éjaculés
• Cellules souches germinales mâles :
spermatogonies
la cryoconservation de matériel testiculaire
pour de jeunes patients prépubères avant
traitement
le but :
- replacement de spermatogonies,
- spermatogenèse in vitro...
(non encore validée dans l’espèce humaine)
Techniques en cours de validation
et protocoles de recherches
• Vitrification des ovocytes (autorisé par la loi
de bioéthique du 7 juillet 2011 – dans le cadre de
l’AMP et de la préservation de fertilité)
• Cryoconservation du tissus ovarien
• Cryoconservation du tissus testiculaire
des garçons pré pubères
Plusieurs options permettent de préserver la
fertilité chez les patientes dont la réserve
ovarienne est menacée:
• la cryopréservation des embryons
• la cryopréservation des ovocytes
• la cryopréservation du tissu ovarien
Le choix dépend de plusieurs paramètres :
• le type et l'urgence de la chimiothérapie
• le type de cancer
• l'âge de la patiente et la présence ou non d'un
partenaire.
Vitrification des ovocytes
depuis 1984 > 800 publications
chez l’animal >> chez l’homme
AMP-intraconjugale
AMP-avec don d’ovocytes
Manque de recule en terme de
préservation de fertilité +++
Nombre moyen d’ovocytes à congeler pour
obtenir une grossesse?
Cryopréservation du tissu ovarien
Principales indications:
-irradiation corporelle totale (leucémies…)
-agents alkylants à doses importantes (thalassémies,
lupus…)
-association radio-chimiothérapie (Hodgkin…)
-ovariectomies bilatérales
QQ PROBLEMES PRATIQUES
• AGE:<35 ans
Au-delà: réserve folliculaire largement réduite
Perte folliculaire liée à cryopréservation
Enfant: technique très intéressante
• Quantité ovaire à prélever?
Grande variabilité interindividuelle post traitement
Femme:1 ovaire entier
Enfant : 1/2 ovaire
• Balance perte folliculaire liée au traitement/ perte
liée à la cryopréservation
Cryopréservation du tissu ovarien
Greffe
Greffe hétérotopique
Autogreffe orthotopique
Ponction ovocytaire
Fertilité naturelle
F I V et transfert d ’embryon
9/10/2012 à 23h
Déménagement à
JM2…