TP 12 Glycémie

EXPÉRIENCE DU FOIE LAVÉ
Protocole Matériel
En 2 exemplaires
1- Laver soigneusement sous le robinet un échantillon de foie d’une
vingtaine de grammes jusqu'à ce que l’eau qui s’écoule soit claire.
2- Découper l’échantillon en dés d’environ 2 cm de côté et rincer de
nouveau.
3- Placer les morceaux dans un récipient, les recouvrir avec de l’eau
distillée et mener immédiatement un test de détection du glucose le
réactif de la Liqueur de Fehling ***. Noter le résultat dans le
tableau (T
0
; + ou -). Si le test est +, recommencer le lavage et
refaire un test.
4- Placer le récipient à 37°C et agiter légèrement de temps en temps
avec une baguette de verre. Refaire un test au bout de 30 minutes
(T
n
,) et noter le résultat( + ou -).
5- Eventuellement refaire un test quelques minutes plus tard
*** test à la Liqueur de Fehling : 2 cm de liquide à analyser + 1 cm de Liqueur. On place au
bain-marie à 90ºC- 100ºC. Il y a du glucose si on observe un précipité rouge brique.
- foie frais
- ciseaux, couteau
- planche à
découper
- Bécher 250 ml
- Glucotest
- Passoire
- Bain-marie à
37º sans support
de tubes
- Bain-marie à
100ºC
- Liqueur de
fehling
- Tubes à essai
-
Représenter le protocole dans votre compte rendu par quelques schémas simples. Noter les résultats et répondre au problème.
Mesure de la glycémie dans les veines porte et sus-hépatiques
Glycémie (en g/L)
Dans veine porte
hépatique Dans veine sus-hépatique
Après un repas 2,5 ou plus 1 à 1,2
Mesure de la glycémie dans les veines porte et sus-hépatiques
Glycémie (en g/L)
Dans veine porte
hépatique Dans veine sus-hépatique
Après jeûne de quelques heures 0,8 0,95 à 1,05

MISE EN EVIDENCE DE RESERVES DE GLUCOSE DANS LE FOIE
Protocole Matériel
Extraction d’une molécule de mise en réserve du glucose
Protocole pour environ 20 g de foie frais
• Couper en petits morceaux le foie.
• Faire bouillir 2 minutes dans 100 mL d’eau distillée puis égoutter à la
passoire.
• Broyer dans 100 mL d’eau distillée puis remettre à bouillir pendant 5
minutes.
• Filtrer dans l’entonnoir
• ajouter au filtrat quelques gouttes d’acide chlorhydrique.
• Filtrer à nouveau.
• Ajouter au filtrat quatre fois son volume d’alcool à 96% pour obtenir un
précipité.
• Filtrer sous pompe à vide et récupérer le papier filtre avec le précipité
• Faire un test à l’eau iodée directement sur le papier filtre
• Prévoir les expériences témoins indispensables avec de l’amidon , du
glycogène… ou d’autres molécules…
- Foie frais laissé à température ambiante
depuis le matin ou la veille
- Couteau et ciseaux
- Planche à découper
- 4 béchers 500 ml
- 8 tubes à essai
- Entonnoir et support
- Filtre en papier pour entonnoir
- Plaque chauffante et casserole
- Egouttoir
- Mixeur
- Eau distillée 1l
- HCl à 10%
- Ethanol à 96º
- Centrifugeuse avec les 8 tubes de
plastiques blancs
- Eau iodée
- Solution d’empois d’amidon ( 50 ml
1%). Solution de glucose
- Solution de glycogène ( 50 ml à 1%)
Que peut-on en déduire sur la forme de stockage du glucose dans le foie ?
MISE EN EVIDENCE DE L’EFFET DE L’INSULINE SUR LE GLUCOSE
Solutions mises à disposition : insuline (3,6 U/mL), glucose (1 g/L), glycogène (1g/L), amidon (1g/L)
Réactifs mis à disposition : bandelettes glucotest, eau iodée
• Présenter sous forme d’un tableau le protocole à réaliser (Nº de tube, contenu des tubes, résultats observés, résultats
déduits) et appeler le professeur pour vérification.
• Réaliser le protocole après avis du professeur.
1) Présenter et expliquer les résultats obtenus.
2) Que peut-on en déduire quant à l’effet de l’insuline sur le glucose ?
Protocole frottis de cellules hépatiques
- Couper un petit morceau de foie
- Gratter délicatement avec un scalpel sur la face qui vient d’être tranchée pour détacher des
cellules ( très peu de prélevement)
- Etaler sur une lame propre
- Mettre une goutte d’eau iodée.
- Recouvrir d’une lamelle
- Observer au microscope.
- Comparer avec une observation des cellules d’épithélium buccal. ( utiliser un coton tige
individuel pour le prélèvement)
- Interpréter les observations
Observation des molécules de mise en réserve du glucose dans les cellules du foie
Utiliser le microscope de grande qualité ( contraste de phase)
Les préparations de coupe du foie mises à disposition présentent une coloration rouge spécifique de la molécule de
mise en réserve du glucose dans le foie.
• Rechercher et localiser sur la préparation les molécules de mise en réserve du glucose.
• Appeler le professeur pour vérification.
• Schématiser au tableau ou sur une grande feuille de papier 2 ou 3 cellules du foie

Recherche du glucose dans des cellules musculaires :
- Broyer un fragment de 20 g de blanc de poulet dans de l’eau distillée
- Filtrer
- Récupérer le filtrat et tester la présence de glucose
- Faire les témoins nécessaires.
Photographies de cellules de foie
Cellules de foie de Lapin colorées à l’eau iodée X 400
Photo Didier Pol
Cellules de foie de Lapin colorée à l’eau iodée X 1000
Photo Didier Pol