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QuantiFERON
®
TB – Gold in tube
Test sanguin de dépistage de
l‘infection tuberculeuse
Name
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Qu’est-ce que le QuantiFERON
®
?
Test sanguin de dépistage de l’infection tuberculeuse.
Test ELISA qui mesure la réponse immunitaire à
médiation cellulaire à l’infection tuberculeuse.
Très spécifique du complex tuberculosis, et non
affecté par le BCG.
Détecte l’infection latente et la tuberculose maladie
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PRINCIPE
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Tuberculose Maladie
Principe des tests immunologiques (IGRA et IDR)
Infection Tuberculeuse Latente
Immunité à médiation cellulaire
(Libération d’IFN-γpar les lymphocytes T)
Charge bactérienne
Réponse Immunitaire
Infection Maladie
Temps
Infection
4
Réponse immunitaire: de l’infection latente à la maladie
T0
(0 à 3 semaines)
T3

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Comment dépister l‘ITL?
Principe de la réaction immunitaire
Sources:
Andersen P et al, Lancet 2000
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Les bases du QFT - 1
Les Cellules
Présentatrices de
l’Antigène (CPA)
rencontrent
l’ antigène
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Les bases du QFT - 2
Les CPA phagocytent
l’antigène,
« l’apprêtent », et
présentent les fragments
(épitopes) via CMH II
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Les bases du QFT - 3
Les lymphocytes T
effecteurs spécifiques
de l’antigène
reconnaissent les
épitopes présentés
par les CPA

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Les bases du QFT - 4
Les lymphocytes T sont
activés et sécrètent des
cytokines, dont l’ IFN-γ
La quantification de l’IFN-γsécrété fournit une
mesure de la réponse immune cellulaire spécifique.
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CHOIX DES ANTIGENES
Spécificité
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Spécificité du QFT vs IDR
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M. tuberculosis BCG
Mycobactéries
environnementales
Antigènes spécifiques
du BK IDR
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Spécificité du QFT vs IDR
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Complex
Tuberculosis ESAT-6 CFP-10 TB-7.7 IDR Souches
environnementale
s
ESAT-6 CFP-10 TB-7.7 IDR
M. tuberculosis + + + + M. abcessus - - - +
M. africanum + + + + M. avium - - - +
M. bovis
+ + + +
M. branderi
- - - +
M. celatum - - - +
BCG
ESAT-6 CFP-10 TB-7.7 IDR
M. chelonae
- - - +
Gothenberg - - - + M. fortuitum - - - +
Moreau
- - - +
M. gordonii
- - - +
Tice
- - - +
M. intracellulare
- - - +
Tokyo - - - + M. kansasii + + - +
Danish
- - - +
M. malmoense
- - - +
Glaxo
- - - +
M. marinum
+ + - +
Montréal
- - - +
M. oenavense
- - - +
Pasteur
- - - +
M. scrofulaceum
- - - +
M. smegmatis
- - - +
M. szulgai
+ + - +
M. terra
- - - +
M. vaccae
- - - +
M. xenopi - - - +

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DUREE D’INCUBATION
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Le QFT détecte l’infection “actuelle”
• Les lymphocytes T effecteurs produisent de l’IFN-γaprès quelques heures de stimulation
• Les lymphocytes T mémoires doivent se différencier et prennent plus de 24h avant une
production significative d’IFN- γ
• QFT utilise 16 à 24h d’incubation. L’IFN- γmesuré est produit par les lymphocytes
effecteurs, qui ne survivent pas sans antigène.
• Le QFT mesure donc une infection «actuelle»
Sources:
Wherry EJ, Ahmed R. Memory CD8 T-cell differentiation during viral infection. J Virol. 2004 Jun;78(11):5535-45.
Kaech SM, Wherry EJ, Ahmed R. Effector and memory T-cell differentiation: implications for vaccine development. Nat Rev Immunol. 2002 Apr;2(4):251-62
24h 48h 72h
Lymphocytes T
effecteurs
Lymphocytes T
mémoire
QFT IDR
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Tube Nul : contrôle négatif. Il permet d’éliminer le
bruit de fond éventuel du prélèvement.
Tube Antigène : contient les 3 antigènes
spécifiques du BK : ESAT-6, CFP-10, TB 7.7
Tube Mitogène : contient de la PHA et permet de
s’assurer que le système immunitaire est
fonctionnel.
Intérêt:
•Identifier les individus dont le système
immunitaire est défaillant
•Valider les conditions de traitement des
échantillons
Les tubes de prélèvement
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Prélèvement sanguin
3x1mL Incubation à 37ºC
pendant 16-24 H Centrifugation des
tubes pendant 15 min
IFN-γstable à +4°C
pendant au moins 4
semaines.
Etape 1: prélèvement et incubation sur sang total hépariné
Nil TB Mitogen
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-Gold In Tube
Option 1: Incubation au laboratoire. Envoi des tubes au laboratoire dans les 16 heures.
Option 2: Incubation sur place. Envoi des tubes au laboratoire, dans les 3 jours suivant
l’incubation.

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Calcul et
impression des
résultats
Ajout solution
stop et lecture
de
l’absorbance
Lavage et ajout
substrat
Incubation for
120min à
température
ambiante
Ajout plasma et
conjugué
Etape 2: Dosage ELISA de l’IFN-γ
γγ
γ
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-Gold In Tube
Automatisation possible.
Contrôle de Qualité interne: garanti la fiabilité du résultat
technique ELISA “Standard”, facile à mettre en œuvre
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Expression des résultats
Tube Antigène – tube négatif < 0,35 UI/ml
Avec tube mitogène – tube négatif ≥0,5 UI/ml
Infection à M. tuberculosis peu probable
Tube Antigène – tube négatif ≥0,35 UI/ml
Quelque soit la valeur du tube mitogène
Infection à M. tuberculosis probable
Tube Antigène – tube négatif < 0,35 UI/ml
Avec tube mitogène – tube négatif < 0,5 UI/ml
Résultat indéterminé
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Signification des résultats
Vous avez prescrit le QFT en dépistage d’ITL
• QFT négatif :
Infection latente très peu probable
Permet d’éliminer une ITL avec une probabilité proche de 100%. (VPN de
99,7%*)
• QFT positif :
Infection très probable
En complément de l’examen clinique et de l’interrogatoire, permet d’orienter
vers une infection latente récente ou ancienne (Spécificité de 99,2%*)
Un QFT « indéterminé » signifie que le système immunitaire du patient est défaillant (immunodéprimé). Ce type de résultat
est riche d’enseignement et doit orienter vers une prise en charge spécifique . Un résultat indéterminé peut être la
conséquence d’un mauvais traitement de l’échantillon et ce point doit être vérifié avant interprétation du résultat.
.*Méta-analyse Diel, Chest 2010
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Signification des résultats
Vous avez prescrit le QFT devant une suspicion de Tuberculose maladie
• QFT négatif :
Sensibilité de 84,5%* au seuil de 0,35UI/ml.
Un test négatif ne permet pas d’exclure une TM.
• QFT positif :
Un test positif doit être interprété en complément d’autres arguments (radio,
clinique, contexte…).
A lui seul, il ne peut permettre de poser un diagnostic de TM.
Un QFT « indéterminé » signifie que le système immunitaire du patient est défaillant (immunodéprimé). Ce type de résultat
est riche d’enseignement et doit orienter vers une prise en charge spécifique . Un résultat indéterminé peut être la
conséquence d’un mauvais traitement de l’échantillon et ce point doit être vérifié avant interprétation du résultat.
.*Méta-analyse Diel, Chest 2010