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UNIVERSITÉ PARIS Est-Créteil Numéro d'anonymat……………………………..
FACULTÉ DES SCIENCES ET TECHNOLOGIE DS du 20 ma1 2011
LES CALCULATRICES NE SONT PAS AUTORISEES
ÉPREUVE DE BIOCHIMIE L1S2 DURÉE : 1 h 30
Exercice 1 : Acides nucléiques
La composition d’un des deux brins d’ADN est A = 27 % et G = 22 %.
Que peut-on dire des pourcentages de T et de C pour le même brin ?
A + G = 27 + 22 = 49. Donc (A+G = 49%)
Ce qui implique que (C+T) = 100- (A+G) = 100 – 49 = 51 %
Peut-on donner avec précision le pourcentage des 4 bases pour l’autre brin ?
Dans la mesure où le deuxième brin est complémentaire du premier on aura %Abrin 1 = %T brin 2 ;
donc sur le brin 2 on aura 27% de T et 22 % de C
Comme on n’avait pu déterminer avec précision le % de T et le % de G sur le premier brin, on ne pourra pas
davantage savoir précisément le % de A et le % de G sur le deuxième brin. On peut seulement dire que l’on aura
(G+C) = 51%
Exercice 2 : Détermination d’un pentapeptide cérébral : la leucine-encéphaline
Certains peptides qui influencent la transmission nerveuse dans certaines parties du cerveau ont été isolés à
partir de cerveaux sains. Ces peptides sont connus comme « opioïdes » parce qu’ils se fixent sur les récepteurs
spécifiques de molécules opiacées telles que la morphine. Les opioïdes miment effectivement certaines
propriétés des opiacées. Ces peptides interviennent dans l’analgésie et dans la modulation de la réponse
immunitaire.
En utilisant les informations ci-dessous, déterminez la séquence de la leucine-encéphaline. Pour chacune des
expériences utilisées, vous préciserez clairement le rôle de chacun des réactifs et indiquerez les conclusions que
l’on peut tirer du résultat obtenu :
1°) Une hydrolyse acide totale libère Gly, Leu, Phe et Tyr dans des proportions 2/1/1/1.
L’hydrolyse acide totale (HCL 6N, 110°C, 24 h) va permettre d’hydrolyser toutes les liaisons peptidiques et de
libérer tous les acides aminés, mais va transformer les amides des chaînes latérales de l’asparagine et de la
glutamine respectivement en acide aspartique et acide glutamique. De plus, cette hydrolyse détruit le
tryptophane.
Pour l’instant rien ne nous permet de dire s’il y a ou non du Trp dans le peptide. En revanche pas de Gln, Glu, Asn
ni Asp.
On sait seulement que l’on a 2 Gly, 1 Leu, 1 Phe, et 1 Tyr
2°) Le traitement ménagé du peptide avec du PITC met en évidence du PTH-Tyr.
Le PITC (ou réactif d’Edman) réagit avec l’amine située à l’extrémité N-terminale du peptide. Cette réaction
provoque l’hydrolyse de la première liaison peptidique et libère le premier résidu sous forme PTH-AA.
La Tyr est donc le premier résidu du peptide.
NTyr - ………….
3°) L’action ménagée de la carboxypeptidase libère une Leu.
La carboxypeptidase est une endoprotéase qui catalyse l’hydrolyse de la dernière liaison peptidique (côté C-
teminal). Dans des conditions ménagées, elle ne conduira à l’hydrolyse que de la dernière liaison peptidique. Dans
le cas où on la laisse agir longtemps, elle peut entièrement hydrolyser la protéine (ou le peptide).
On en conclut ici que la leucine est le résidu C-terminal.
NTyr - ………………….. - LeuC