RECUEIL INTERNATIONAL DES METHODES D’ANALYSES – OIV
Glucose et fructose
OIV-MA-AS311-02 : R2009
échelles des longueurs d’onde et des absorbances de l’appareil doivent être
contrôlées.
A défaut, utiliser un photomètre à spectre discontinu permettant d’effectuer les
mesures à 334 nm ou à 365 nm.
− Cuves de verre de 1 cm de trajet optique ou cuves à usage unique.
− Pipettes pour test enzymatique de 0,02, 0,05, 0.1, 0,2 ml
4. Réactifs
Solution 1 : tampon (triéthanolamine 0,3 M, pH 7,6, Mg2+ 4.10-3M): 11,2 g de
chlorhydrate de triéthanolamine (C2H5HCl et 0,2 g de MgSO4.7H2O sont dissous
dans 150 ml d’eau bidistillée; ajouter environ 4 ml de solution 5M d’hydroxyde de
sodium pour obtenir un pH égal à 7,6 et porter à 200 ml.
Cette solution tampon se conserve 4 semaines à + 4°C.
Solution 2 : solution de nicotinamide-adénine-dinucléotide-phosphate (environ
11,5 10-3 M) : 50 mg de nicotinamide-adénine-dinucléotide-phosphate disodique
sont dissous dans 5 ml d’eau bidistillée.
Cette solution se conserve 4 semaines à +4°C.
Solution 3 : solution d’adénosine-5'-triphosphate disodique et 250 mg d’hydro-
génocarbonate de sodium sont dissous dans 5 ml d’eau bidistillée.
Cette solution se conserve 4 semaines à +4°C.
Solution 4 : hexokinase/glucose-6-phosphate-déshydrogénase: mélanger 0,5 ml
d’hexokinase (2 mg de protéine/ml soit 280 U/ml) et 0,5 ml de
glucose-6-phosphate-déshydrogénase (1 mg de protéine/ml).
Le mélange se conserve un an à +4°C.
Solution 5 : phosphoglucose-isomérase (2 mg de protéine/ml, soit 700 U/ml). La
suspension est utilisée sans dilution.
Cette solution se conserve un an à +4°C.
Remarque: L’ensemble des réactifs nécessaires pour ce dosage est commercialisé.