Microbiologie Définition d`un Microorganisme Microorganismes en

2016-09-17
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Microbiologie
L’Étude des Microorganismes
Définition d’un Microorganisme
•Dérivé du grec: Mikros, «petit» et
Organismos, «organisme»
–Organisme microscopique qui comprend soit une
seule cellule (unicellulaires) ou amas de cellules
identiques (non différentiées)
–Ils comprennent les bactéries, les champignons,
les algues, les virus, et les protozoaires
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Microorganismes en Laboratoire
Les Milieux de Croissance

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Buts
•Croissance sous des conditions contrôlées
•Maintien
•Isolation de cultures pures
•Tests métaboliques
Types
•Liquides (bouillons)
–Permets la culture en suspension
–Distribution uniforme des éléments nutritifs,
environnementaux et autres
–Permets la croissance de grands volumes
•Milieux Solides
–Mêmes que milieux liquides + agent de
solidification
• L’agar : Polysaccharide dérivé d’une algue
La Croissance en Bouillon
Non-inoculé
Limpide
Turbide + sédiment
Limpide + sédiment
Turbide

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Croissance sur Gélose
•Croissance sur surface solide
•Croissance isolée
• Permets l’isolation de
colonies simples
• Permets l’isolation de cultures
pures
Colonie simple
Milieux Solides (suite)
•Pente
–Croissance en surface et en profondeur
– Différentes disponibilités d’oxygène
–Entreposage à long terme
•Tube profond
–Milieu semi-solide
–Entreposage à long terme
– Faible disponibilité d’oxygène
Compter les Microorganismes

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Méthodes
•Mesure de turbidité
•Comptes directs
•Comptes viables
•Nombre le plus probable
Mesure de la Turbidité
•Mesure la quantité de lumière qui peut
traverser un échantillon
• Le moins de lumière qui traverse l’échantillon
le plus dense est la population
•Mesure la densité optique ou le pourcentage
de transmission
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Mesure de la Turbidité
•Spectrophotomètre (A600):
–Mesure de la Densité Optique (D.O.)
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Lumière
600nm
Détecteur….lecture
Lecture différente

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5
13
0
2.0
1.0
D.O. 600nm % Transmission
100
0
50
Densité cellulaire
Relation inverse
Mesure de la Turbidité
Comptes Directes
• L’échantillon à être énuméré est appliqué sur
une lame d’hémacytomètre qui retient un
volume fixe dans une chambre de comptage
•Le nombre de cellules est compté
•Le nombre de cellules dans le volume donné
est déterminé
•Avantages:
–Rapide
–Aucune croissance requise
– Aucune information a propos de l’organisme est
requise
•Désavantages:
–Ne discrimine pas entre vivant et mort
–Peux être difficile de discriminer entre les
bactéries et les détritus 15
Comptes Directes