Etude des effets de la MonoAcylGlycérol Lipase dans les cancers

Promotion 2010-2011
Etude des effets de la
MonoAcylGlycerol Lipase dans les
cancers ovariens
Florence BREIL
Gaëlle FONTAINE
Maya SALHI
Encadrants : Laurence NIETO & Pascal DEMANGE

Sommaire
Résumé 2
1. Introduction 3
1.1. Lipides et cancers 3
1.2. La MonoAcylGlycerol Lipase (MAGL) 4
1.3. Structure de la MonoAcylGlycerol Lipase 5
1.4. Inhibiteurs de la MonoAcylGlycerol Lipase 5
2. Résultats 6
2.1. Localisation de MAGL dans les cellules saines 6
2.2. Surexpression de MAGL dans les cellules cancéreuses 6
2.3. Relation entre la surexpression de MAGL et le taux d’acides gras libres 7
2.4. Effets de l’inhibition et de la surexpression de MAGL dans les lignées cancéreuses 8
2.5. Relation entre le taux d’acides gras libres et l’agressivité tumorale 9
3. Projet de recherche 9
3.1. Matériels biologiques 9
3.2. Caractérisation des isoformes de MAGL 10
3.3. Caractérisation des modifications post traductionnelles de MAGL 10
3.4. Rôle de MAGL dans la pathogénicité 11
3.4.1. Surexpression et inhibition de MAGL 11
3.4.2. Analyse du phénotype tumorigénique associé à ces expériences 12
3.4.2.1. Tests de migration, d’invasion et de prolifération cellulaire 12
3.4.2.2. Analyse des taux d’acides gras libres, de monoacylglycérols,
de NADH, de pyruvate et de lactate 13
3.4.3 Effets de la surexpression et de l’inhibition de MAGL sur la Fatty Acid Synthase 13
4. Conclusion et perspectives de recherche 14
Figures supplémentaires 15
Références bibliographiques 16
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Résumé
Les cellules cancéreuses, pour leur développement, ont besoin d’acquérir de nouvelles
caractéristiques. Un changement d’environnement leur permettant de récupérer de l’oxygène et des
nutriments en grande quantité les pousse à modifier leur métabolisme. Lors de ces remaniements, de
nombreuses enzymes sont impliquées. La plus étudiée, la Fatty Acid Synthase, permet de
synthétiser des acides gras libres qui seront ensuite stockés sous forme de phospholipides, d’esters
de cholestérol et de triglycérides. Les cellules cancéreuses devront ensuite déstocker ces lipides
grâce à des enzymes telles que la MonoAcylGlycérol Lipase (MAGL). Les travaux effectués par le
Dr Nomura et son équipe montrent que deux isoformes de cette enzyme sont surexprimés dans les
lignées agressives de cancers du sein, des ovaires, ou de mélanomes. Cette surexpression entraîne
l’augmentation de l’hydrolyse des monoacylglycérols et par conséquent du taux d’acides gras
libres. Ce phénomène est accompagné d’une mise en place d’un profil tumorigénique agressif se
traduisant par une hausse de l’invasion, de la migration, de la survie cellulaire et de la croissance
tumorale. La MonoAcylGlycérol Lipase, semble donc être une enzyme clé dans le développement
et l’agressivité des cellules cancéreuses. Cependant peu d’informations sont connues à son sujet.
Nous proposons donc d’étudier plus en détail son activité dans les cellules saines, cancéreuses non
agressives et cancéreuses agressives ovariennes. Des expériences de qRT-PCR seront réalisées pour
déterminer quels isoformes sont présents dans les différentes lignées cellulaires étudiées. La
présence ou l’absence de modifications post-traductionnelles sur cette enzyme sera déterminée par
spectrométrie de masse. Des expériences de surexpression et d’inhibition des deux isoformes de
MAGL seront ensuite effectuées pour déterminer l’impact de MAGL sur les taux d’acides gras
libres et de monoacylglycérols et sur l’invasion, la migration et la survie cellulaire. Les effets de la
surexpression et de l’inhibition sur le NADH, le pyruvate et la Fatty Acid Synthase seront aussi
mesurés.
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