Staphylococcus et micrococcus

Staphylococcus et micrococcus
GELOSE CHAPMAN
Milieu d’isolement sélectif pour les bactéries du genre Staphylococcus
COMPOSITION :
Peptones
Chlorure de sodium
Mannitol
Rouge de phénol
Agar
LECTURE :
Observation
Interprétation
Conclusion
Milieu jaune autour des
colonies et colonies
jaunes
Acidification du milieu
La bactérie dégrade le
mannitol. Il peut s’agir
de l’espèce :
Staphylococcus aureus
Milieu rouge autour des
colonies
Absence d’acidification
du milieu
La bactérie ne dégrade
pas le mannitol : il ne
s’agit pas de l’espèce :
Staphylococcus aureus

Staphylococcus et micrococcus
RECHERCHE DU RECEPTEUR DU FIBRINOGENE ET DE LA
PROTEINE A
TECHNIQUE :
Déposer sur une lame parfaitement propre ou sur une carte à usage, dans 2
cercles :
- 1 goutte de réactif test constitué de particules sensibilisées
- 1 goutte de réactif témoin constitué de particules non sensibilisées
Identifier les dépôts.
Prélever à l’oese 1 à 2 colonies à identifier, les mettre soigneusement en
suspension dans chacune des 2 gouttes.
Donner à la lame un léger mouvement de rotation pendant 30sec.
Observer l’apparition d’agglutinats.
LECTURE :
Observation
Conclusion
Agglutination des particules témoins
La souche est auto-agglutinable, les
résultats ne sont pas interprétables.
Pas d’agglutination des particules
témoins. Agglutination des particules
tests
Les résultats sont interprétables : la
souche possède la protéine A et/ou le
récepteur de fibrinogène ->
Identification de Staphylococcus
aureus
Pas d’agglutination des particules
témoins. Pas d’agglutination des
particules tests
Les résultats sont interprétables : la
souche ne possède pas la protéine A et
le récepteur du fibrinogène

Staphylococcus et micrococcus
RECHERCHE DE LA DNASE
REACTIF :
 Bleu de toluidine ou HCl
LECTURE :
BT
HCl
BT
HCl
Apparition d’une
teinte rose autour
de la strie
centrale
Absence de
précipité autour
de la strie
centrale
Le milieu est
resté bleu autour
de la strie
centrale
Présence d’un
précipité autour
de la strie
centrale
Le milieu rose
montre l’absence
d’ADN donc il a
été hydrolysé par
la DNAse
L’absence de
précipité montre
l’absence d’ADN
donc il a été
hydrolysé par la
DNAse
Le milieu bleu
montre la
présence d’ADN
donc il n’a pas
été hydrolysé
La présence de
précipité montre
la présence
d’ADN donc il
n’a pas été
hydrolysé
La souche possède une DNAse
DNAse +
La souche ne possède pas de DNAse
DNAse –

Staphylococcus et micrococcus
TEST DE LA THERMONUCLEASE
MILIEUX UTILISES :
Culture de 24h en bouillon cœur cervelle du staphylocoque étudié
Culture de 24h en bouillon cœur cervelle d’un staphylocoque thermonucléase +
(témoin +) Culture de 24 h en bouillon cœur cervelle d’un staphylocoque
thermonucléase – (témoin –)
Bouillon cœur cervelle stérile (témoin bouillon cœur cervelle)
Gélose à l’ADN et au bleu de toluidine (couleur bleue)
LECTURE :
Un halo rose autour du puits traduit la présence de composés d’hydrolyse de
l’ADN.
1. Lecture des témoins
Pour valider le test, on doit observer :
- Un halo rose pour le témoin positif
- L’absence de halo rose pour le témoin négatif et le bouillon cœur
cervelle stérile

Staphylococcus et micrococcus
2. Lecture du test
Observation
Interprétation
Conclusion
Apparition d’un halo
rose autour du puits
Présence de composés
d’hydrolyse de l’ADN :
l’ADN a été hydrolysé
Le staphylocoque étudié
possède une ADNase
thermorésistante :
Staphylocoque
thermonucléase +
Absence d’halo rose
autour du puits
Absence de composés
d’hydrolyse de l’ADN :
l’ADN n’a pas été
hydrolysé
Le staphylocoque étudié
ne possède pas une
ADNase
thermorésistante :
Staphylocoque
thermonucléase –