LA MATURATION FOLLICULAIRE CHEZ LA CHIENNE

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LA MATURATION
FOLLICULAIRE ET
OVOCYTAIRE CHEZ LA
CHIENNE

Angélique ENTE
 Julie OTTAVIANI
 Raphaëlle TEXIER
PLAN:

Introduction
 I/ La lutéinisation pré
ovulatoire du follicule
ovarien
 II/ Une ovulation
précoce
 III/ Maturation
ovocytaire et
fécondation
Introduction:
 La
maturation ovocytaire dans toutes les
espèces suit ce schéma général:
ovocyte primaire du follicule mûr
 décharge ovulatoire de LH
ovocyte secondaire apte à la fécondation
 Cette
maturation associe des
modifications nucléaires et
cytoplasmiques.
Rappel sur l’action des hormones
hypophysaires pendant l’œstrus
*FSH
 Action mitogène: multiplication des cellules de la granulosa
. Responsable de la fin de la croissance folliculaire
. Sécrétion d’oestrogènes
*LH
 Hormone responsable de la maturation folliculaire
. Déclenche l’ovulation
. Transforme les cellules de la granulosa: Action LUTEINISANTE
Sécretion de progestérone
Particularités du cycle oestral chez la chienne:
Chronologiques:
* mono oestrien: une seule période d’oestrus par cycle.
* Période de repos sexuel : l’anoestrus est long,il dure de
22 à 47 semaines.
Physiologiques:
* lutéinisation pré ovulatoire :
progestéronémie déjà élevée au moment de l’ovulation.
* ovulation spontanée d’un ovocyte immature:
ovocytes expulsés au stade vésicule germinative diploïde
(prophase I) au lieu de métaphase II haploïde
fin maturation après ovulation dans l’oviducte
* Ovocyte excessivement riche en lipides >> matériel
nucléaire difficile à observer
Intérêt du microscope confocal
I La lutéinisation pré ovulatoire
du follicule ovarien
*Pendant le prooestrus = de 5 à 15 jours
•
phase de maturation folliculaire (croissance rapide des follicules ovariens
qui passent de 1 à 4 mm)
•
imprégnation oestrogénique responsable des modifications
comportementales et du frottis vaginal ( augmentation du nombre de
cellules et kératinisation des cellules).
*Sous l’effet de FSH, certains follicules ovariens reprennent leur processus
de maturation.
48 h avant l’ovulation : pic de LH qui entraîne une augmentation de la
progestéronémie (entre 3 et 10 ng/ml), liée à la lutéinisation pré
ovulatoire.
Le suivi de la progestéronémie permet de situer le moment de l’ovulation:
à 5 ng/ml
48 h après: moment optimal pour la fécondation (insémination, saillie)
*Pas de corps hémorragique lors de l’ovulation car lutéinisation précoce.
II Une ovulation d’un ovocyte
immature
Pic de LH long(48h): en fin de pro œstrus ou début d’oestrus.
=> OVULATION

Ovulation spontanée
Environ 2 jours après le pic de LH
Non provoquée par le coït
Libère les ovocytes primaires bloqués en prophase de
1ère division méiotique
Maturation post-ovulatoire de 2 jours dans les 2/3
supérieurs de l’oviducte
Ovocytes restant alors fécondables pendant 48 heures
Evolution des stades
ovocytaires: suivi de la méiose
VG
GVBD
MII
Maturation ovocytaire particulière chez la chienne
 MAJORITE DES MAMMIFERES
2 cellules : 11 à 36 h
8 cellules : 42 à 96 h
blastocyste : 7 jours
OVULATION
Progestérone
circulante
Métaphase II
Formation du CJ à l’ovulation
 CHIENNE
Maturation
ovocytaire
(oviducte)
Développement lent
2 cellules : 72 à 96 h
8 cellules : 144 h (6j)
blastocyste : 9-11 jours
OVULATION
Lutéinisation préovulatoire
± 48-72 h
Vésicule Germinative
Métaphase II
Progestérone
circulante
III Maturation ovocytaire et
fécondation

Ovocytes immatures à
l’ovulation : diploïdes

Reprise de l’activité
méïotique dans l’oviducte
: rôle des cellules de
l’oviducte ?

Rôle de la fécondation ?
Etude de l’influence de
l’oviducte sur la reprise
de la méiose
A=milieu de
culture
48h
40%
d’incubation

A+cellules de
l’infundibulum
A+cellules de
l’ampoule
59%
60%
Critère : %
d’ovocytes ayant
quitté le stade
VG

Influence de la co-culture avec des cellules épithéliales de l’oviducte (Obstetric
section of the Institute of General Pathology, BOGLIOLO & AL.). Années 20002001
Les résultats:

Les cellules de
l’infundibulum et de
l’ampoule influencent
la reprise de l’activité
méïotique

48h sont suffisantes
pour l’achèvement de
la maturation
nucléaire
Etude de l’influence
d’une fécondation
précoce sur la reprise
de la méiose
A=milieu de
A+ semence
culture + ovocyte fraîche de chien
de chienne
72h
Pas de
d’incubation maturation

Critère : ovocytes
ayant quitté le
stade VG

St Dizier et Al. , Alfort 2000
Diminution
du nombre
de VG
Les résultats



La fécondation est possible in
vitro sur les ovocytes
immatures
La pénétration du spz induit la
reprise de la méïose
Efficacité limitée : inefficace
sur 40% des ovocytes
Non reproductible in vivo
La fécondation in vivo a lieu
comme chez les autres
mammifères au stade
métaphase II (Fontbonne et al,
2004, soumis).

CONCLUSION



Lourdeur des manipulations et difficultés d’observation
Pourquoi les chiens se différencient ils du schéma
général?
Connaissances sur la reproduction canine à améliorer.
BIBLIOGRAPHIE
Thèse ALFORT 2001
DUMASY Marie:
Analyse in vivo de la fécondation
dans l’espèce
canine:dosages hormonaux,
suivi échographique de
l’ovulation et
immunocytochimie sur
ovocytes.


Pub-med National Library of
Medicine (lien internet site
physio).
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