Magali MAITRE Doctorante Institut Universitaire de la Vigne et du Vin, Bureau 209, 2ème étage Tél : 33 0(3) 80 39 63 91 [email protected] INTITULE DU SUJET DE THESE La protéine de choc thermique de faible masse moléculaire Lo18. Mécanisme moléculaire d’induction de sa synthèse et rôle physiologique au niveau membranaire. ENCADRANTS Directeur de thèse : Jean GUZZO Co-Directeur de thèse : Jacques COVES (CNRS-CEA Grenoble) Co-Encadrante : Stéphanie WEIDMANN FINANCEMENT Allocation de thèse REGION FORMATION Master 2 Recherche en Sciences des Aliments, Sensorialité et Comportement, parcours Microbiologie (Université de Bourgogne / AGRO-SUP Dijon). Master 1 Qualité des Aliments, parcours Microbiologie (Université de Bourgogne, Dijon). Licence de Biochimie (Université de Bourgogne, Dijon). DUT Génie Biologique, option Industries Agroalimentaires et Biologiques (IUT de Dijon). Baccalauréat STL, option Génie Biologique (Lycée Julien WIttmer, Charolles) RESUME DE LA THESE Cette étude porte sur la réponse au stress de la bactérie lactique Oenococcus oeni qui est responsable de la fermentation malolactique dans les vins. En effet, le vin est un milieu défavorable à la croissance des microorganismes de part ses caractéristiques physicochimiques comme par exemple son importante teneur en éthanol, son pH acide et sa température froide. Un des mécanismes clés impliqués dans l’adaptation de O. oeni à cet environnement hostile est sa capacité à produire une protéine dite de réponse au stress nommée Lo18. Cette protéine présente l’originalité de posséder deux fonctions cellulaires : la première dite de chaperon moléculaire, lui permet de limiter l’agrégation des protéines cytoplasmiques lors de stress, la seconde appelée activité de lipochaperon membranaire, a pour but de stabiliser la fluidité des membranes cellulaires qui est fortement altérée par les stress provenant du milieu environnemental. Le premier objectif de ma thèse a été de caractériser la relation existant entre la structure tridimensionnelle de la protéine Lo18 et les fonctions précédemment décrites. L’interaction entre Lo18 et la membrane de O. oeni est actuellement en cours d’étude. Le deuxième objectif de mon projet de thèse a consisté à élucider les mécanismes mis en oeuvre par les bactéries pour répondre aux stress provoquant une fluidification membranaire. Pour ce faire, une étude transcriptomique a été réalisée afin d’identifier les gènes impliqués dans la réponse cellulaire de O. oeni à l’alcool benzylique. Les résultats obtenus s’inscrivent dans une démarche plus large de compréhension de la réponse au stress chez O. oeni dans le but d’améliorer sa croissance en milieu vin et d’optimiser l’étape de fermentation malolactique. Mots clés : Oenococcus oeni, protéine de stress, activité chaperon, membrane, transcriptome. BIBLIOGRAPHIE / POSTERS Articles Maitre M, Weidmann S, Rieu A, Fenel D, Schoehn G, Ebel C, Covès J, Guzzo J. 2012. “The oligomer plasticity of the small heat shock protein Lo18 from Oenococcus oeni influences its role in both membrane stabilization and protein protection”. Biochemical Journal, 444 : 97-104. Maron P.A, Maitre M, Mercier A, Henri Lejon D.P, Nowak V, Ranjard L. 2008. “Protein and DNA fingerprinting of a soil bacterial community inoculated into three different sterile soils”. Research in Microbiology, 159 : 231236. Communications orales Maitre M, Weidmann S, Rieu A, Fenel D, Schoehn G, Ebel C, Covès J, Guzzo J. 2012. “Relation entre l’oligomérisation de la protéine de stress Lo18 de la bactérie lactique Oenococcus oeni et son activité de stabilisation de substrats protéiques et lipidiques". Workshop de Microbiologie « Interactions des microorganismes avec leur environnement : circulation, adaptation », Dijon. Maitre M, Weidmann S, Rieu A, Fenel D, Schoehn G, Ebel C, Covès J, Guzzo J. 2012. “Relation étroite entre la ème structure et les fonctions de la protéine de stress Lo18 de la bactérie lactique Oenococcus oeni". 18 colloque du Club des Bactéries Lactiques, Clermont Ferrand. Communications affichées Maitre M, Weidmann S, Rieu A, Fenel D, Schoehn G, Ebel C, Covès J, Guzzo J. 2012. “Relation entre l’oligomérisation de la protéine de stress Lo18 de la bactérie lactique Oenococcus oeni et son activité de stabilisation de substrats protéiques et lipidiques". Workshop de Microbiologie « Interactions des microorganismes avec leur environnement : circulation, adaptation », Dijon. Maitre M, Weidmann S, Rieu A, Covès J, Guzzo J. 2011. “Characterization of structural and functional th properties of the small HSP Lo18 from Oenococcus oeni”. 10 Symposium on Lactic Acid Bacteria, Egmond aan Zee, Netherlands. Maitre M, Weidmann S, Rieu A, Ebel C, Covès J, Guzzo J. 2011. “La smHsp Lo18 de Oenococcus oeni est capable ème de protéger les protéines dénaturées et de stabiliser les membranes de manière pH-dépendante”. XVII Forum des Jeunes Chercheurs, Dijon. Maitre M, Rieu A, Ebel C, Covès J, Weidmann S, Guzzo J. 2011. “Impact of pH on the oligomerisation and the th functions of Lo18, a small heat shock protein of Oenococcus oeni”. 4 Congress of European Microbiologists FEMS, Geneva, Switzerland. Maitre M, Ronez F, Weidmann S, Covès J, Guzzo J. 2010. “Caractérisation de l’activité chaperon moléculaire de différentes formes mutées de Lo18, une protéine de stress de faible masse moléculaire de Oenococcus oeni”. ème XVI Forum des Jeunes Chercheurs, Besançon. Maitre M, Martin F, Allonneau C, Weidmann S, Guzzo J. 2010. “Effet d’un agent fluidifiant de la membrane sur ème la physiologie et l’expression de gènes de la bactérie lactique Oenococcus oeni”. 8 Congrès National de la SFM, Marseille. Ronez F, Maitre M, Weidmann S, Rieu A, Covès J, Guzzo J. 2010. “La protéine de stress Lo18 de Oenococcus oeni : génération de protéines mutantes et caractérisation fonctionelle in vitro sur substrats lipidiques et ème protéiques”. 8 Congrès National de la SFM, Marseille.