MAGLUMI T3 (CLIA) DOMAINES D’UTILISATION 130203003M 100 Shenzhen New Industries Biomedical Engineering Co., Ltd No.16, Jinhui Road, Pingshan New District, Shenzhen, 518122, P.R. CHINE Tél. + 86-755-21536601 Fax. + 86-755-28292740 Lotus Medical Equipment Limited 26B Cameron Court, Cork Street, Dublin 8, l'irlande Tél. + 353-1-6571034 Courriel: [email protected] POUR UTILISATION PROFESSIONNELLE UNIQUEMENT Conserver à 2-8°C LIRE ENTIÈREMENT ATTENTION : INSTRUCTIONS AVANT L'UTILISATION LES EXPLICATIONS DES SYMBOLES Représentant autorisé communauté européenne dans la Fabricant Consulter le manuel d'utilisation Contenu du kit Le kit a été conçu pour le dosage quantitatif de la triiodothyronine (T3) dans le sérum humain. La méthode peut être utilisée pour des échantillons dans une plage de 0,06 à 10,0 ng/ml. L'essai doit être effectué dans l'analyseur de dosage immunologique par chimiluminescence entièrement automatique (CLIA) MAGLUMI (notamment Maglumi 600, Maglumi 800, Maglumi 1000, Maglumi 1000 Plus, Maglumi 2000, Maglumi 2000 Plus et Maglumi 4000). RÉSUMÉ ET EXPLICATION DU TEST Chez un sujet en bonne santé, la thyroïde sécrète environ 5 à 10 μg de triiodothyronine par jour. La 3,5,3’-triiodothyronine (T3) circulante est cependant produite essentiellement par déiodination périphérique ce qui fait que le taux global de sécrétion quotidienne de T3 totale s'élève à environ 20 µg. Dans le sérum, les hormones thyroïdiennes sont liées à des protéines de transport, et seule leur fraction libre est physiologiquement active. L'intérêt clinique du dosage quantitatif de T3 en cas de suspicion d'une maladie thyroïdienne réside principalement dans le diagnostic et l'évaluation de l'hyperthyroïdie. Des concentrations élevées de T3 avec des niveaux concomitants normaux de TBG et T4 sont observées en particulier dans l'hyperthyroïdie à T3 isolée. Après une ablation chirurgicale de la glande thyroïde et un traitement à l'iode-131, la concentration en T3 peut contrairement à celle de T4 - rester à un niveau élevé ou même augmenter (récurrence de l'hyperthyroïdie). Des élévations occasionnelles des niveaux de triiodothyronine sont également observées chez environ 50 % des patients présentant un adénome autonome associé à un hyperthyroïdie. De telles élévations peuvent également apparaître aux stades précoces de l'hyperthyroïdie, dans l'ophtalmopathie endocrinienne associée à un hyperthyroïdie latent, pendant le traitement de l'hyperthyroïdie (thyrostatiques), dans le déficit en iode avec ou sans goitre et dans la thyroïdite d'Hashimoto, alors que l'état métabolique peut être normal. PRINCIPE DE LA MÉTHODE Dispositif médical de diagnostic in vitro Numéro de lot Numéro catalogue Immuno-analyse par chimiluminescence par compétition : Utiliser l'ABEI pour marquer des anticorps monoclonaux anti-T3, et utiliser des antigènes T3 purifiés pour revêtir des microbilles magnétiques. L'échantillon (ou l'étalon/contrôle, le cas échéant), le marquage ABEI et le tampon sont mélangés soigneusement et incubés à 37°C, et la solution de billes magnétiques revêtues d'antigènes T3 est ajoutée ensuite et incubée. L'échantillon et les billes magnétiques revêtues d'antigènes T3 sont en compétition pour lier le marquage ABEI, formant un complexe immun. Après la précipitation dans un champ magnétique, décanter le surnageant puis effectuer un cycle de lavage. Ensuite, les réactifs À utiliser avant Limite de température (conserver à 2-8°C) starters 1+2 Quantité suffisante pour Conserver à l'abri de la lumière Maintenir verticalement stockage. pendant le sont ajoutés pour initier une de CONTENU DU KIT Matériel Réactif Integral pour 100 dosages Microbilles magnétiques : revêtues d'antigène T3 purifié, contenant de l’ASB, 0,2 % NaN 3 . Étalon bas:sérum bovin, 0,2 % NaN 3. 001 T3-IFU-V3.03-fr-FR-100 réaction chimiluminescence flash. Le signal lumineux est mesuré par un photomultiplicateur dans les 3 secondes sous forme d'URL qui est proportionnelle à la concentration de T3 présente dans les échantillons. 2,5 ml 2,5 ml 1/3 Étalon haut : sérum bovin, 0,2 % NaN 3. 2,5 ml Tampon : contenant de l’ASB, 0,2 % NaN 3. 6,5 ml Marquage ABEI : anticorps monoclonal anti-T3 marqué par ABEI, contenant de l’ASB, 0,2 % 6,5 ml NaN 3 . Tous les réactifs sont fournis prêts à l'emploi. Flacons de réactifs dans la boîte de kit Contrôle de qualité interne : contenant de l’ASB, 0,2 % NaN 3 . (Pour la valeur cible se 2,0 ml référer à la fiche de données d'information de contrôle de qualité) Le contrôle de qualité interne n'est applicable qu'au système MAGLUMI. Pour le manuel d'utilisation et la valeur cible, consulter la fiche de données d'informations de contrôle de qualité. L'utilisateur doit évaluer les résultats à la lumière de ses propres normes et connaissances. Accessoires requis mais non fournis MAGLUMI Reaction Module REF : 630003 MAGLUMI Starter 1+2 REF : 130299004M MAGLUMI Wash Concentrate REF : 130299005M MAGLUMI Light Check REF : 130299006M Veuillez vous procurer les accessoires auprès de Shenzhen New Industries Biomedical Engineering Co., Ltd (SNIBE) ou de notre représentant. Préparation du réactif Integral Il est essentiel d'agiter doucement et horizontalement le réactif Integral avant de retirer le bouchon (éviter la formation de mousse !) Retirer le bouchon et tourner la petite molette du compartiment des microbilles magnétiques dans un sens puis dans l'autre jusqu'à ce que la couleur de la suspension vire au marron. Placer l'Integral dans la zone des réactifs et attendre 30 minutes. Pendant ce temps, les microbilles magnétiques sont agitées automatiquement et entièrement remises en suspension. Ne pas interchanger les composants Integral de différents réactifs ou lots ! Conservation et stabilité Fermé : conservé à 2-8°C jusqu'à la date de péremption Ouvert : stable pendant 4 semaines. Pour assurer les meilleures performances du kit, il est recommandé de placer les kits ouverts au réfrigérateur s'ils ne doivent pas être utilisés dans l'appareil au cours des 12 heures suivantes. Maintenir verticalement pendant le stockage. Tenir à l'abri de la lumière. ÉTALONNAGE ET TRAÇABILITÉ 1) Traçabilité Pour permettre un étalonnage précis, nous avons fourni des échantillons d'étalonnage standardisés contre le standard national. 2) Ré-étalonnage 2-points Via la mesure des étalons, la courbe maitresse prédéfinie est ajustée (ré-étalonnée) jusqu'à un nouveau niveau de mesure spécifique de l'instrument avec chaque étalonnage. 3) Fréquence de ré-étalonnage Après chaque changement de lot (réactif Integral ou réactifs de démarrage). 001 T3-IFU-V3.03-fr-FR-100 Chaque semaine et/ou chaque fois qu'un nouvel Integral est utilisé (recommandé). Après chaque opération d'entretien de l'analyseur d'immuno-analyse par chimiluminescence (CLIA) entièrement automatisé MAGLUMI. Si les contrôles sont hors de la plage attendue. Chaque fois que la température ambiante varie de plus de 5°C (recommandé) PRÉLÈVEMENT ÉCHANTILLONS ET PRÉPARATION DES Type d'échantillon : sérum Prélever 5,0 ml de sang veineux dans le tube de prélèvement sanguin. Séparer le sérum par centrifugation après avoir laissé le sang total en attente à la température ambiante. Éviter les cycles répétés de congélation-décongélation. L'échantillon de sérum ne peut être congelé et décongelé que deux fois. Les échantillons conservés doivent être soigneusement mélangés avant l'utilisation (mélangeur Vortex). Veuillez interroger le représentant local de SNIBE pour davantage d'informations ou si vous avez un doute quelconque. Conditions pour les échantillons • Ne pas utiliser les échantillons dans les conditions suivantes : (a) Échantillons inactivés par la chaleur ; (b) Échantillons de cadavres; (c) Contamination microbienne manifeste. • Les échantillons des patients doivent être manipulés avec précaution pour éviter toute contamination croisée. L'utilisation de pipettes ou embouts de pipettes jetables est recommandée. • Vérifier l'absence de bulles dans tous les échantillons. Éliminer les bulles avec un bâtonnet applicateur avant l'analyse. Utiliser un nouveau bâtonnet applicateur pour chaque échantillon pour éviter toute contamination croisée. • Les échantillons de sérum doivent être exempts de fibrine, de globules rouges ou autres particules. • Vérifier que la coagulation a été complète dans les échantillons de sérum avant de centrifuger. Certains échantillons, en particulier ceux des patients sous traitement anticoagulant ou thrombolytique, peuvent présenter des temps de coagulation augmentés. Si l'échantillon est centrifugé avant que la coagulation ne soit complète, la présence de fibrine peut être la cause de résultats erronés. Préparation pour l'analyse • Les échantillons de patients ayant un aspect trouble ou turbide doivent être centrifugés avant de les tester. Après la centrifugation, éviter la couche lipidique (si présente) en pipetant l'échantillon dans un godet à échantillon ou un tube secondaire. • Les échantillons doivent être mélangés soigneusement après décongélation par un passage au vortex à vitesse lente ou en les retournant doucement, et centrifugés avant utilisation pour retirer les globules rouges ou les particules pour assurer la cohérence des résultats. Les cycles de congélation-décongélation multiples des échantillons doivent être évités. • Tous les échantillons (échantillons de patients ou contrôles) doivent être traités dans les 3 heures après avoir été chargés dans le système MAGLUMI. Contacter le service SNIBE pour une discussion plus détaillée sur les contraintes de conservation des échantillons chargés dans l'appareil. Conservation • Si le test doit être différé de plus de 8 heures, retirer le sérum du séparateur de sérum, des globules rouges ou du caillot. Les échantillons retirés du gel séparateur, des cellules ou du 2/3 caillot peuvent être conservés pendant une durée allant jusqu'à 12 heures à 2-8°C. • Les échantillons peuvent être conservés pendant une durée allant jusqu'à 30 jours congelés à une température de -20°C ou plus basse. Expédition • Avant d'expédier les échantillons, il est recommandé de retirer les échantillons du séparateur de sérum, des globules rouges ou du caillot. Lors de l'expédition, les échantillons doivent être emballés et étiquetés conformément aux réglementations applicables nationales, fédérales et internationales relatives au transport des échantillons cliniques et des substances infectieuses. Les échantillons doivent être expédiés congelés (carboglace). MISES EN GARDE ET PRÉCAUTIONS POUR LES UTILISATEURS Uniquement pour les procédures de diagnostic IN-VITRO. Les instructions de la notice doivent être scrupuleusement respectées. La fiabilité des résultats de l'analyse ne peut être garantie en cas de non respect des instructions figurant dans cette notice. Précautions de sécurité ATTENTION : ce produit nécessite la manipulation d'échantillons d'origine humaine. Les étalons de ce kit sont préparés à partir de produits tiré du sérum bovin. Toutefois, comme aucune méthode de test ne peut garantir avec certitude l'absence de virus VIH, de l'hépatite B ou d'autres agents infectieux, ces réactifs doivent être considérés comme un risque biologique potentiel et manipulés avec les mêmes précautions applicables à tout échantillon de sérum ou de plasma. Tous les échantillons, les réactifs biologiques et les matériels utilisés dans l'analyse doivent être considérés comme potentiellement susceptibles de transmettre des agents infectieux. Ils doivent donc être éliminés conformément aux réglementations et recommandations en vigueur des agences ayant juridiction sur le laboratoire, et aux réglementations de chaque pays. Les matériels jetables doivent être incinérés ; les déchets liquides doivent être décontaminés avec de l'hypochlorite de sodium à une concentration finale de 5 % pendant au moins une demi-heure. Tout matériel devant être réutilisé doit être autoclavé en utilisant une méthode de surdestruction. Un minimum d’une heure à 121°C est habituellement considéré comme adéquat, bien que les utilisateurs doivent contrôler l'efficacité de leur cycle de décontamination en le validant initialement et en utilisant en routine des indicateurs biologiques. Il est recommandé que tous les matériels d'origine humaine soient considérés comme potentiellement infectieux et manipulés conformément à la norme 29 CFR. 1910.1030 Occupational exposure to bloodborne pathogens. Le niveau de sécurité biologique 2 ou d'autres pratiques de sécurité biologique appropriées doivent être appliqués pour les matériels qui contiennent ou sont suspectés de contenir des agents infectieux. Ce produit contient de l'azoture de sodium ; ce produit et son contenant doivent être éliminés de manière sécurisée. Les fiches de données de sécurité sont disponibles sur demande. Précautions de manipulation • Ne pas utiliser les kits de réactifs après leur date de péremption. 001 T3-IFU-V3.03-fr-FR-100 • Ne pas mélanger des réactifs provenant de différents kits de réactifs. • Avant de charger le kit de réactifs dans le système pour la première fois, les microbilles nécessitent d'être mélangées pour remettre en suspension les microbilles qui ont sédimenté pendant l'expédition. • Pour les instructions de mélange des microbilles, consulter la rubrique COMPOSANTS DU KIT, préparation du réactif Integral dans cette notice. • Pour éviter toute contamination, porter des gants propres lors de l'utilisation d'un kit de réactifs et d'un échantillon. • Faire attention aux liquides résiduels qui ont séché à la surface du kit. • Pour une discussion détaillée sur les précautions de manipulation pendant l'utilisation du système, consulter les instructions de maintenance de SNIBE. PROCÉDURE DE TEST Pour assurer une performance adéquate du test, suivre strictement le manuel d'utilisation de l'analyseur d'immuno-analyse par chimiluminescence (CLIA) entièrement automatisé MAGLUMI. Chaque paramètre du test est identifié par une radio-étiquette RFID sur le réactif Integral. Pour toute information complémentaire veuillez consulter le manuel d'utilisation de l'analyseur d'immuno-analyse par chimiluminescence (CLIA) entièrement automatisé MAGLUMI. 40 μl Échantillon, étalon + 40 μl Marquage ABEI + 20 μl Tampon 5 min Incubation + 20 μl Microbilles magnétiques 10 min Incubation 400 μl Cycle de lavage 3 s Mesure DILUTION La dilution des échantillons par l'analyseur n'est pas disponible dans ce kit de réactifs Les échantillons ayant des concentrations supérieures à la plage de mesure peuvent être dilués manuellement. Après une dilution manuelle, multiplier le résultat par le facteur de dilution. Avant qu'une dilution manuelle ne doive être réalisée, veuillez choisir des diluants appropriés ou consulter SNIBE pour avis. CONTRÔLE DE QUALITÉ Suivre les recommandations de contrôle de qualité pour les laboratoires médicaux. Utiliser des contrôles appropriés pour le contrôle de qualité au laboratoire. Des contrôles doivent être effectués au moins toutes les 24 heures (un cycle ne doit pas dépasser 24 heures), une fois par kit de réactifs et après chaque étalonnage. Les intervalles des contrôles doivent être adaptés aux exigences individuelles de chaque laboratoire. Les valeurs obtenues doivent être dans les plages définies. Chaque laboratoire doit établir des recommandations pour les mesures correctives à prendre si des valeurs sont hors de la plage. LIMITES DE LA MÉTHODE 1) Limitations Des concentrations normales de T3 ne reflètent pas nécessairement une fonction thyroïdienne normale. Certains troubles thyroïdiens (tels qu'un hypo- ou hyperthyroïdie latent, une hypersécrétion compensatoire de T3 dans le déficit en iode, une hypersécrétion de TBG), peuvent également être associés à des niveaux de T3 dans la zone d'euthyroïdie. De plus, l'évaluation clinique des résultats sériques doit prendre en considération les différences liées à l'âge ou à la grossesse 3/3 ainsi qu'une influence potentielle des hormones thyroïdiennes administrées de manière exogène, des contraceptifs, des stéroïdes, des salicylates, de la diphénylhydantoïne ou d'autres médicaments ainsi que les modifications des capacités de liaison des protéines sériques pour les hormones thyroïdiennes. Les niveaux sériques de T3 seuls ne donnent pas d'indication sur la présence ou l'absence de maladie thyroïdienne. Ils doivent toujours être interprétés dans le contexte avec le tableau clinique et les autres procédures diagnostiques. 2) Substances interférentes L'essai n'est pas affecté par la bilirubine < 35 mg/dl, l'hémoglobine < 2000 mg/dl ou les triglycérides < 1800 mg/dl. . 3) HAMA Les échantillons de patients contenant des anticorps humains anti-souris (HAMA) peuvent donner des valeurs faussement élevées ou diminuées. Bien que des agents neutralisant les HAMA soient ajoutés, des concentrations sériques d'HAMA extrêmement élevées peuvent occasionnellement influencer les résultats. RÉSULTATS 1) Calcul des résultats L'analyseur calcule automatiquement la concentration en T3 dans chaque échantillon au moyen d'une courbe d'étalonnage qui est générée par une procédure de courbe maîtresse d'étalonnage en 2 points. Les résultats sont exprimés en ng/ml. Pour toute information complémentaire veuillez consulter le manuel d'utilisation de l'analyseur d'immuno-analyse par chimiluminescence (CLIA) entièrement automatisé MAGLUMI. Facteur de conversion : 1 ng/ml = 1,54 nmol/L 2) Interprétation des résultats Avec un intervalle de confiance de 95 %, la plage de valeurs de référence est de 0,69 à 2,15 ng/ml Les résultats peuvent être différents entre les laboratoires en raison des variations au sein de la population et de la méthode de test. Si nécessaire, chaque laboratoire doit établir sa propre plage de référence. CARACTÉRISTIQUES DE PERFORMANCES 1) Précision Le coefficient de variation intra-essai a été évalué sur 3 niveaux différents de sérum de contrôle. Mesurer de manière répétitive 10 fois au cours du même cycle pour calculer le coefficient de variation. Précision intra-essai Contrôle Moyenne SD (ng/ml) CV % (ng/ml) Niveau 1 1.08 0.06 5,41 Niveau 2 2.25 0.12 5,12 Niveau 3 4.55 0.22 4,73 Le coefficient de variation inter-essais a été évalué sur trois lots de kits. Doser les sérums de manière répétée 10 fois dans la même série, et mesurer 3 niveaux différents, pour un total de 30 fois pour calculer le coefficient de variation. Précision inter-essais Contrôle Moyenne (ng/ml) Niveau 1 1.12 Niveau 2 2.35 Niveau 3 4.08 SD (ng/ml) CV % 0.10 0.21 0.37 9,34 8,73 9,14 2) Sensibilité analytique <0,06 ng/ml La limite de détection désigne la concentration d'analyte la plus basse qui peut être distinguée de zéro. 3) Spécificité 001 T3-IFU-V3.03-fr-FR-100 La spécificité du système de dosage de T3 a été évaluée en mesurant la réponse apparente de l'essai à divers analytes ayant une réactivité croisée potentielle. Composé Concentration T4 rT3 300 ng/ml 100 ng/ml Réactivité croisée 0.1% 0.5% 4) Récupération En considérant un étalon haut de concentration connue comme échantillon, le diluer selon des rapports de 1:2 avec des diluants et effectuer 10 mesures de sa concentration diluée. Puis calculer la concentration et la récupération attendues de la concentration mesurée. La récupération doit être de l'ordre de 90 % -110%. Attendue Mesure moyenne Récupération 6,634 ng/ml 7,039 ng/ml 106% 5) Linéarité Utiliser l'étalon T3 pour préparer la courbe standard en six points, en mesurant tous les URL de points à l'exception du point A, et effectuer ensuite un alignement linéaire à quatre paramètres en coordonnées logarithmiques doubles, le coefficient de corrélation linéaire absolu (r) doit être supérieur à 0,9800. Point d'étalon Concentration ng/ml A 0 B C D E F 0.25 1.0 2.5 5.0 10.0 Coefficient de corrélation linéaire absolu (r) r=0,9923 6) Comparaison de méthodes Une comparaison du test de T3(y) MAGLUMI avec un test de T3(x) disponible dans le commerce sur des échantillons cliniques a donné les corrélations suivantes (ng/ml) : Régression linéaire y=1,0381x+0,0665 r=0,9881 Nombre d'échantillons mesurés : 100 Les concentrations des échantillons étaient comprises entre 0,31 et 10,00 ng/ml. Références 1. Pagana, K. D. & Pagana, T. J. (© 2011). Mosby's Diagnostic and Laboratory Test Reference 10th Edition: Mosby, Inc., Saint Louis, MO. Pp 976-977. 2. Eckman, A. (Updated 2010 April 20). T3 Test. MedlinePlus Medical Encyclopedia [On-line information]. Available online at http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003687.htm. Accessed February 2011. 3. Kansagra, S. et. al. (2010 June 10). The Challenges and Complexities of Thyroid Hormone Replacement. Medscape Today from Laboratory Medicine. 2010;41(6):229-348 [On-line information]. Available online at http://www.medscape.com/viewarticle/722086 through http://www.medscape.com. Accessed February 2011. 4. Davies AG, et al. Urinary albumin excretion in school children. Arch Dis Child 1984; 59:625-30. 5. Dahlquist G, et al. Effect of metabolic control and duration on exercise-induced albuminuria in diabetic teenagers. Acta Pediatr Scand 1983; 72:895-902. 6. Hostetter TH. Diabetic nephropathy. New Engl J Med 1985;312:642-4. 7. Kroc Collaborative Study Group. Blood glucose control and the evolution of diabetic netinopathy and albuminuria. A preliminary multicenter trial. New Engl J Med 1984; 4/3 311:365-72. 8. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics. Burtis CA, Ashwood ER, Bruns DE, eds. St. Louis: Elsevier Saunders; 2006, Pp. 2053, 2063-2064. 9. Kasper DL, Braunwald E, Fauci AS, Hauser SL, Longo DL, Jameson JL eds (2005). 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