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BIOKAR Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France
Tél : +33 (0)3 44 14 33 33 – Fax : +33 (0)3 44 14 33 34
MODE D’EMPLOI
- Refroidir et maintenir le milieu à 44-47°C.
- Transférer 1 mL du produit à analyser et de ses dilutions décimales dans des boîtes de Petri
stériles.
- Couler 12 mL de gélose.
- Homogénéiser parfaitement.
- Laisser solidifier sur une surface froide.
- Couler à nouveau 4 mL de milieu, de façon à former une deuxième couche.
- Laisser solidifier.
- Incuber :
à 30°C pendant 24 heures pour la recherche et le dénombrement des coliformes.
à 44°C pour les coliformes thermotolérants.
LECTURE
Les coliformes présentent des colonies violacées de diamètre égal ou supérieur à
0,5 mm après 24 heures d’incubation. Les entérobactéries lactose-négatif sont incolores. Dans le
cadre du protocole opératoire décrit par la norme NF ISO 4832, il pourra s’avérer nécessaire de
confirmer les colonies atypiques éventuellement obtenues, en recherchant leur caractère
gazogène en bouillon lactosé bilié au vert brillant (BLBVB) (BK002, BM011).
FORMULE - TYPE
(pouvant être ajustée de façon à obtenir des performances optimales)
Pour 1 litre de milieu :
- Peptone pepsique de viande...........................................................7,0 g
- Extrait autolytique de levure ............................................................3,0 g
- Lactose..........................................................................................10,0 g
- Sels biliaires.....................................................................................1,5 g
- Chlorure de sodium .........................................................................5,0 g
- Rouge neutre..............................................................................30,0 mg
- Cristal violet..................................................................................2,0 mg
- Agar agar bactériologique..............................................................12,0 g
pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25°C : 7,4 ± 0,2.