Gélose à l`extrait de levure

Gélose à l’extrait de levure
DOMAINE D’UTILISATION
La gélose à l’extrait de levure est utilisée en bactériologie des eaux pour le dénombrement des
microorganismes revivifiables par comptage des colonies à 36 et 22°C. La méthode vise à mesurer
l’efficacité de fonctionnement du traitement des eaux potables et plus généralement de tous les types
d’eaux. Elle est particulièrement adaptée à l’analyse des eaux destinées à la consommation humaine,
y compris les eaux embouteillées et les eaux minérales naturelles.
HISTORIQUE
La gélose pour dénombrement est dérivée de la gélose pour dénombrement (PCA). Elle ne contient
pas de glucose.
PRINCIPES
Les substances nutritives apportées par la Tryptone et les facteurs vitaminiques de l’extrait de levure
favorisent la croissance de la plupart des bactéries à dénombrer.
PREPARATION
- Mettre en suspension 19,0 g de milieu déshydraté (BK153) dans 1 litre d’eau distillée ou
déminéralisée.
- Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps
nécessaire à sa dissolution.
- Répartir en tubes ou en flacons.
- Stériliser à l’autoclave à 121°C pendant 15 minutes.
NOTA :
Une liquéfaction partielle de l’agar entraînera inévitablement une altération significative de la
consistance du gel du milieu solidifié, après stérilisation et refroidissement.
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Biokar Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France
Tél : + 33 (0)3 44 14 33 33 – Fax : + 33 (0)3 44 14 33 34 – www.biokar-diagnostics.fr
MODE D’EMPLOI
- Avec le milieu prêt-à-l’emploi (BM068) ou bien si le milieu est préparé à l’avance à partir du milieu
déshydraté, faire fondre la gélose pendant le minimum de temps nécessaire à sa reliquéfaction
totale.
- Refroidir et maintenir à 44-47°C.
- Transférer 1 mL du produit à analyser et de ses dilutions décimales successives dans des boîtes
de Petri stériles.
- Couler 10 à 15 mL de milieu.
- Homogénéiser parfaitement.
- Laisser solidifier sur une surface froide.
- Incuber :
ƒ
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un jeu de boîtes à (36 ± 2)°C pendant (44 ± 4) heures, et
un autre à (22 ± 2)°C pendant (68 ± 4) heures.
LECTURE
Procéder au comptage des colonies pour chaque boîte contenant 300 colonies au maximum.
FORMULE - TYPE
(pouvant être ajustée de façon à obtenir des performances optimales)
Pour 1 litre de milieu :
- Tryptone ...........................................................................................6,0 g
- Extrait autolytique de levure.............................................................3,0 g
- Agar agar bactériologique ..............................................................10,0 g
pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25°C : 7,2 ± 0,2.
CONTRÔLE QUALITE
- Milieu déshydraté : poudre crème, fluide et homogène.
- Milieu préparé : gélose ambre clair.
- Réponse culturale typique après 44 heures d’incubation à 36°C :
Croissance
(Rapport de productivité)
Microorganismes
(1)
Escherichia coli
Staphylococcus aureus
(2)
Pseudomonas aeruginosa
RIVM WR1
CIP 53.154
CIP 82.118
(2)
(1)
(2)
66% ≤ R2 ≤150%
PR ≥ 70%
PR ≥ 70%
Rapport de productivité R2 selon NF T90-461
Rapport de productivité PR selon XP CEN ISO/TS 11133-2
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STOCKAGE / CONSERVATION
Milieu déshydraté : 2-30°C.
- La date de péremption est mentionnée sur l’étiquette.
- Milieu préparé en tubes ou en flacons : 6 mois à 2-8°C (à tire indicatif).
- Milieu préparé en boîtes : 1 mois à 2-8°C (à titre indicatif).
Milieu prêt-à-liquéfier en flacons :
- Stocker entre 2 et 25°C, à l’abri de la lumière.
- La date de péremption est mentionnée sur l’étiquette.
PRESENTATION
Code
Milieu déshydraté :
- Flacon de 500 g
BK153HA
Milieu prêt-à-l’emploi en flacons :
- Pack de 10 flacons de 200 mL
BM06808
SUPPORT PHOTO
Référence produit : BK153HA, BM06808
Utilisation : Le dénombrement des microorganismes revivifiables par comptage des colonies.
Dénombrement dans la masse
Gélose à l’extrait de levure
Réf : BM06808
Incubation : 48 heures / 37°C
Caractéristiques : Excellente croissance des bactéries aérobies mésophiles.
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REFERENCE BIBLIOGRAPHIQUE
NF EN ISO 6222 (T 90-401). Juillet 1999. Qualité de l’eau. Dénombrement des micro-organismes revivifiables. Comptage
des colonies par ensemencement dans un milieu de culture nutritif gélosé.
XP CEN ISO/TS 11133-2 (V 08-104-2). Janvier 2004. Microbiologie des aliments. Guide pour la préparation et la production
des milieux de culture. Partie 2 : Guide général pour les essais de performance des milieux de culture.
NF T 90-461. Juillet 2001 et NF T 90-461/A1. Juin 2005. Qualité de l’eau. Microbiologie. Contrôle qualité des milieux de
culture.
Les mentions portées sur l’étiquette sont prédominantes sur les formules ou les instructions décrites dans ce document.
Les informations et les spécifications contenues dans cette fiche technique ont été établies à la date du 2009-02-10.
Elles sont susceptibles d’être modifiées à tout moment, sans préavis.
Code document : BK153/F/2003-01 : 4.
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