Accueil d`un stagiaire M2 – année 2015

Accueil d’un stagiaire M2 – année 2015-2016
Equipe : Dynamique Ovocytaire et Implantation chez les Mammifères
Structure : Institut de Génétique et Développement de Rennes – CNRS UMR6290
Encadrant : Dr Guillaume Halet
Projet de Stage M2 :
Pour devenir un gamète haploïde apte à être fécondé et à générer un embryon viable, l’ovocyte doit
accomplir deux divisions méiotiques et expulser deux globules polaires. Ces divisions, fortement
asymétriques, résultent du positionnement du fuseau de division à proximité du cortex ovocytaire,
qui devient polarisé. Cette polarisation se traduit par l’accumulation de protéines du cytosquelette
(actine, myosine) et de protéines dites « de polarité » dans la région du cortex qui surplombe le
fuseau méiotique en métaphase I ou métaphase II. Une autre caractéristique de la polarisation est la
disparition des microvillosités membranaires dans la région qui surplombe le fuseau. Un défaut de
polarisation conduit à l’absence de globule polaire, et une infertilité. La cascade de signalisation
conduisant à la mise en place de cette polarisation ovocytaire n’est que partiellement caractérisée.
On sait que chez la souris, la polarisation du cortex ovocytaire est induite par la proximité des
chromosomes métaphasiques, et implique la GTPase Ran. Nous avons montré que Ran déclenche
l’activation de la GTPase Cdc42 au cortex, nécessaire à la polarisation. Au cours de ce stage, le projet
consistera à examiner le mécanisme par lequel Ran induit l’activation polarisée de Cdc42 et la
disparition des microvillosités membranaires. Le stagiaire recherchera les partenaires de la protéine
Ran et tentera d’identifier de nouveaux intermédiaires dans la cascade de signalisation.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire :
Culture d’ovocytes de souris ; micro-injection des ovocytes ; immuno-fluorescence ; microscopie
confocale ; Western blot ; clonage plasmidique ; mutagenèse dirigée.