Le sujet proposé a un caractère pluridisciplinaire
publicité
07 INI B Mercredi 22 octobre 2008 AFBB Microbiologie et technologies d’analyses Page 1 Durée : 1 h 30 Qualité microbiologique des eaux de boisson Cinq millions de personnes meurent chaque année dans le monde du fait de la mauvaise qualité de l’eau ! L’assurance de la qualité et de l’hygiène de l’eau sont des exigences prioritaires de santé publique. L’eau distribuée doit être conforme aux valeurs limites réglementaires fixées : des contrôles microbiologiques et chimiques réguliers sont réalisés par les DDASS (Directions Départementales des Affaires Sanitaires et Sociales) pour vérifier cette conformité. Les critères microbiologiques en vigueur sont donnés dans le document 1. 1. Dénombrement des micro-organismes revivifiables à 22°C et 37°C 1.1. Quel est l’intérêt de ce dénombrement ? 1.2. Donner les principales étapes de ce contrôle. 2. Dénombrement des coliformes totaux et des coliformes thermotolérants 2.1. Définir le terme « coliforme » et l’expression « coliforme thermotolérant ». 2.2. Ce dénombrement fait appel à la technique de filtration. Pourquoi ? Donner les légendes du schéma du système de filtration (document 2). 2.3. Quelle est la taille des pores des membranes utilisées ? 2.4. Le milieu utilisé est la gélose lactosée au tergitol 7 et au TTC, dont la composition figure dans le document 3. 2.4.1. Quels sont les agents sélectifs présents dans ce milieu ? 2.4.2. Donner l’aspect des colonies de coliformes sur ce milieu (justifier). 2.5. Un dénombrement de coliformes est réalisé sur 20 échantillons. 1 seul échantillon présente 5 coliformes par mL. Conclure. 3. Dénombrement des entérocoques Le dénombrement est effectué par culture sur milieu de Slanetz et Bartley (milieu présomptif) après filtration sur membrane. Les colonies suspectes sont repiquées sur une gélose biliée à l’esculine pour confirmation. 3.1. Donner les principaux caractères des entérocoques, et justifier l’emploi du milieu Slanetz et Bartley, dont la composition est donnée dans le document 3. 3.2. Quel est le volume filtré dans ce cas ? 3.3. Les colonies d’entérocoques obtenues sur gélose biliée à l’esculine sont noires. Pourquoi ? 07 INI B Mercredi 22 octobre 2008 AFBB Microbiologie et technologies d’analyses Page 2 Durée : 1 h 30 3.4. Lors d’une analyse d’une eau, 15 colonies rouges sont obtenues sur milieu de Slanetz et Bartley. Cinq d’entre-elles sont repiquées sur gélose biliée à l’esculine, et quatre sont effectivement identifiées comme des entérocoques après 24 heures d’incubation à 37°C. Donner le résultat final et conclure. 4. Dénombrement des spores de bactéries anaérobies sulfito-réductrices 4.1. Par quel genre bactérien les spores recherchées sont-elles produites ? 4.2. Quel traitement l’échantillon doit-il subir ? Justifier. 4.3. D’après la composition du milieu TSN, donnée dans le document 3, comment la réduction des sulfites est-elle mise en évidence ? 5. Recherche des bactériophages fécaux 5.1. Représenter schématiquement un bactériophage T-pair d’E. coli. 5.2. Quel est la signification de la présence de bactériophages d’ E. coli dans une eau ne contenant aucune bactérie revivifiable de cette espèce ? 6. Les entérovirus 6.1. Indiquer les 7 étapes du cycle infectieux des entérovirus (famille des Picornaviridae) figurant dans le document 4. 6.2. Qu’est-ce qu’un ARN(+) ? 6.3. Par quel élément structural cet ARN est-il protégé ? D’après le document 4, préciser le type de symétrie de cet élément. 6.4. Pourquoi les entérovirus sont-ils particulièrement résistants aux détergents ? 07 INI B Mercredi 22 octobre 2008 AFBB Microbiologie et technologies d’analyses Page 3 Durée : 1 h 30 Document 1 Critères microbiologiques des eaux potables Paramètres Valeurs limites Coliformes 0 / 100 ml dans 95% des échantillons prélevés Coliformes thermotolérants 0 / 100 ml Entérocoques 0 / 100 ml Spores de bactéries anaérobies sulfito-réductrices < 1 spore / 20 ml Micro-organismes pathogènes : - Salmonelles 0 / 5 000 ml - Staphylocoques pathogènes 0 / 100 ml - Bactériophages fécaux 0 / 50 ml - Entérovirus 0 / 10 000 ml Document 2 Appareil à filtration 07 INI B Mercredi 22 octobre 2008 AFBB Microbiologie et technologies d’analyses Page 4 Durée : 1 h 30 Document 3 Composition de trois milieux de culture Composition (g/L) Peptone Tergitol 7-TTC Slanetz et Bartley 10 20 Tryptone 15 Extrait de viande 5 Extrait de levure 6 10 Glucose Lactose Tergitol 7 TSN 2 20 0,01 Azide de sodium 0,4 Sulfate de néomycine 0,05 Sulfate de polymyxine 0,02 TTC 0,025 0,1 Sulfite de sodium Bleu de bromothymol 1 0,05 Citrate de fer III ammoniacal 0,5 Hydrogénophosphate de sodium Agar 4 13 10 3 12 3 Eau (qsp) 1 dm 1 dm 1 dm3 pH final 7,2 7.2 7.2 Document 4 Cycle infectieux de l’entérovirus
