Stage proposé par Nom et adresse du Laboratoire ou de l’Unité : GReD (Génétique, Reproduction & Développement) INSERM/CNRS/Univ Clermont-Auvergne Téléphone : 0473 17 83 80 Mail :[email protected] Site internet : https://www.gred-clermont.fr/ Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : C. Vaury Intitulé de l ‘équipe d’accueil : Mécanismes moléculaires de la différenciation cellulaire au cours de l'embryogenèse précoce de la souris Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Claire CHAZAUD Résumé du thème de recherche de l’équipe Nous étudions la différenciation des lignages cellulaires au cours du développement préimplantatoire chez la souris en examinant à la fois des modèles in vivo (embryons) et in vitro (cellules souches embryonnaires ES ou XEN). Grâce à l'analyse de mutants/transgènes, nous avons pu mettre en évidence un réseau de régulations géniques que nous avons modélisé mathématiquement. Titre du projet de stage : Différenciation des cellules souches de l'embryon: étude de nouveaux facteurs impliqués pendant la préimplantation chez la souris. Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage: Claire CHAZAUD 04 73 17 83 80 [email protected] https://www.gred-clermont.fr/directory/member/claire-chazaud/ Projet de stage : (une vingtaine de lignes maximum) Au troisième jour de développement, l'embryon de souris est constitué de trois types cellulaires distincts: les cellules souches du trophectoderme, de l'épiblaste et de l'endoderme primitif (EPr). Notre équipe analyse les mécanismes moléculaires de la différenciation des cellules en épiblaste ou en EPr. Nous avons montré que cette différenciation dépend des interactions antagonistes de deux facteurs de transcription, Nanog et Gata6 ainsi que de la voie de signalisation Fgf. En effet, sans Nanog ou sous l'action du Fgf, toutes les cellules deviennent de l'EPr et à l'inverse sans Gata6 ou en inhibant la voie de signalisation Fgf toutes les cellules deviennent de l'épiblaste. Au cours de cribles, nous avons découvert de nouveaux facteurs qui seraient potentiellement impliqués dans la differenciation de l'épiblaste ou de l'EPr. L'étudiant(e) caractérisera l'expression de ces nouveaux facteurs par différentes techniques d'immunofluorescence et d'hybridation in situ. Des analyses fonctionnelles seront ensuite effectuées dans l'embryon ou dans des modèles in vitro de différenciation tels que les cellules souches embryonnaires ES. Techniques mises en œuvre par le stagiaire : culture cellulaire, culture et electroporation d'embryons, transgenèse, analyse expression de gènes (RTqPCR, hybridation in situ fluorescente, western, immunofluorescence), microscopie confocale (tissus fixés et live-imaging), clonage... Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années : 1- Chazaud C and Yamanaka Y.. Lineage specification in the mouse preimplantation embryo Development 2016; 143, 1063-1074. Invited review 2- Hermitte S, Chazaud C. Primitive endoderm differentiation: from specification to epithelium formation. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2014 369(1657). Invited review 3- Bessonnard S, De Mot L, Gonze D, Barriol M, Dennis C, Goldbeter A, Dupont G,Chazaud C. Gata6, Nanog and Erk signaling control cell fate in the inner cellmass through a tristable regulatory network. Development. 2014;141:3637-48. IF: 6.71. 4- Gasnier M, Dennis C, Vaurs-Barrière C, Chazaud C. Fluorescent mRNA labeling through cytoplasmic FISH. Nat Protocol. 2013;8:2538-47. IF:13. 5- Lavial F, Bessonnard S, Ohnishi Y, Tsumura A, Chandrashekran A, Fenwick MA, Tomaz RA, Hosokawa H, Nakayama T, Chambers I, Hiiragi T, Chazaud C, Azuara V. Bmi1 facilitates primitive endoderm formation by stabilizing Gata6 during early mouse development. Genes Dev. 2012 1;26:1445-58. IF: 12.74 6- Frankenberg S, Gerbe F, Bessonnard S, Belville C, Pouchin P, Bardot O, Chazaud C. Primitive endoderm differentiates via a three-step mechanism involving Nanog and RTK signaling. Dev Cell. 2011 13;21:1005-13. IF: 14.20 Autres informations: Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. - Sabine Chauveau (soutenance en décembre 2016). Responsable: C. Chazaud - Stéphanie Hermitte (soutenance courant 2017). Responsables: C. Chazaud, A. Fogli - Cecilia Bassalert (1ere année doctorat). Responsable: C. Chazaud, A. Fico (Naples) Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des six dernières années. C. Chazaud a encadré tous ces étudiants: Doctorants: tous à l'ED de Clermont - Gasnier (soutenance en 2014)--> Post-doc à Singapour - Bessonnard (soutenance en 2012)--> Post-doc à Lausanne puis I. Pasteur - A. Abo Regela (8 mois dans l'équipe; soutenance en 2015, ED en Egypte)--> M de Conf Egypte M2: - Bassalert (2015): en thèse dans l'équipe - Alghoul-Kullab (2014): continue ses études de médecine - Barriol (2013): s'est redirigée vers l'enseignement en primaire - Gasnier (2011): thèse dans l'équipe puis post-doc Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ? Tous profils Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ? OUI