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Stage proposé par Claire CHAZAUD Responsable d'équipe, CR1 INSERM Nom et adresse du Laboratoire : GReD (http://www.gred-clermont.fr/) UMR CNRS 6247/INSERM U931/Clermont Université UFR Médecine 28 place Dunant BP38 63000 Clermont-Fd cedex Téléphone : 0473 178 380 Mail : [email protected] Directeur du Laboratoire : Chantal Vaury Titre : Différenciation cellulaire pendant la préimplantation chez l’embryon de souris Projet de stage : situation du sujet, objectif du stage, approches expérimentales Après la fécondation, l’embryon de souris se segmente en cellules identiques, puis au stade de blastocyste (3,5 jours) deux types cellulaires sont apparents, le trophectoderme et le bouton embryonnaire. Nous avons mis en évidence, grâce à des marqueurs moléculaires, qu’un troisième type cellulaire est présent, le bouton embryonnaire étant ainsi formé de cellules de l’épiblaste (Epi) et de l’endoderme primitif (EPr) (Chazaud, 2006). Plus récemment, nous avons étudié le rôle de Nanog, exprimé spécifiquement dans l'Epi, et montré qu'il est non seulement requis pour l'Epi mais aussi pour la maturation de l'EPr à travers la sécrétion de Fgf (Frankenberg, 2011). Nous nous intéressons maintenant à la fonction de Gata6, spécifique de l'EPr en analysant des embryons et cellules modèles (souches ES, F9) transgéniques. Ainsi le project est fortement connecté aux thématiques sur les cellules souches embryonnaires ES, XEn qui sont issues des blastocystes. Techniques mises en œuvre par le stagiaire : Immunofluorescence, hybridation in situ fluorescente, microscopie laser confocale, culture d’embryon, culture de cellules, ARN interférence in vivo, dissection de souris, biologie moléculaire de base. Publications du responsable de stage au cours des 5 dernières années : - Frankenberg S, Gerbe F, Bessonnard S, Belville C, Pouchin P, Bardot O and Chazaud C. (2011). Primitive endoderm differentiates via a three-step mechanism involving Nanog and RTK signalling. Developmental Cell, in press. - Elatmani H, Dormoy-Raclet V, Dubus P, Dautry F, Chazaud C, Jacquemin-Sablon H. (2011) The RNA-binding protein Unr prevents mouse embryonic stem cells differentiation toward the primitive endoderm lineage. Stem Cells 10:1504-16. - Chazaud C (2008). L’embryogenèse précoce des mammifères : premières différenciations cellulaires et cellules souches. Médecine/Sciences 24, 1043-8. - Gerbe F., Cox B., Rossant J. and Chazaud C (2008): Dynamic expression of LRP2 pathway members reveals progressive epithelial differentiation of Primitive Endoderm in mouse blastocyst. Developmental Biology 313, 594602. - Chazaud C., Yamanaka Y., Pawson T. and Rossant J. (2006) Early lineage segregation between epiblast and primitive endoderm in mouse blastocysts through Grb2/Mapk pathway.Dev. Cell 10:615-24.
