Stage proposé par

Stage proposé par
Nom et adresse du Laboratoire ou de l’Unité :
Inserm U676, Hôpital Robert Debré, 48 boulevard serrurier 75019 Paris
Téléphone : 01 40 03 36 91
Mail : [e-mail]
Site internet :
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Dr Pierre Gressens
Intitulé de l ‘équipe d’accueil :
Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Pierre Gressens
Résumé du thème de recherche de l’équipe (une dizaine de lignes maximum)
le but de notre équipe de recherche consiste à décrypter les mécanismes
physiopathologiques des maladies du cerveau en développement, d'identifier et de tester de
nouvelles cibles de neuroprotection dans des modèles animaux précliniques appropriés, et
d'appliquer ces nouvelles connaissances dans une approche translationnelle. Cette
approche est appliquée à plusieurs maladies affectant le développement cérébral
responsables de déficits neurologiques cognitifs et comportementaux. Nous nous sommes
ainsi concentrés sur les pathologies entraînant des anomalies de la croissance cérébrale
(microcéphalies), sur les lésions cérébrales périnatales liées à la prématurité, sur les
troubles affectant le métabolisme énergétique neuronal (maladies mitochondriales
OxPhos), sur les troubles affectant la myéline (leucodystrophies) et sur les troubles
génétiques affectant le contrôle central de la puberté. Notre unité est à l'interface entre la
recherche fondamentale et le transfert vers la clinique et réunit des chercheurs INSERM,
CNRS et médecins enseignants chercheurs.
Titre du projet de stage :
Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage:
Sandrine Passemard, 01 40 03 19 36, [e-mail]
Projet de stage : Impact du VIP (vasoactive intestinal peptide) sur la néocorticogénèse
CONTEXTE
Le blocage du VIP maternel chez la souris gestante au début de la neurogénèse (entre les 9
et 11èmes jours de vie embryonnaire) conduit à une microcéphalie chez le souriceau
démontrant l’impact de facteurs d’environnement, notamment maternels, dans le
développement cérébral précoce [1]. Cette microcéphalie résulte d’une diminution de la
prolifération des progéniteurs de neurones dès E12,5. Mais le type de progéniteurs (cellules
gliales radiaires ou progéniteurs basaux) ciblé par le VIP ainsi les conséquences du blocage
du VIP sur la génèse des sous populations neuronales, gliales, la lamination corticale et la
connectivité neuronale ne sont pas connus.

OBJECTIFS
L’objectif principal du stage est de définir l’impact du VIP maternel sur la neurocorticogénèse
de l’embryon c’est à dire sur i) la prolifération des progéniteurs et ii) leur
différenciation/spécification neuronale et gliale.
METHODES
Nous étudierons l’effet de la privation de VIP maternel sur la prolifération des progéniteurs et
leur différenciation dans le télencéphale des embryons VIP-/- nés de mère VIP-/-. Nous
utiliserons les méthodes d’immunohistochimie pour étudier :
- La prolifération des progéniteurs (phosphohistone H3, BrdU, Ki67 couplés aux
marquages Pax6 [cellules gliales radiares] et Tbr2 [progéniteurs basaux]) à E10, E12,
E14 et E16.
- La différenciation neuronale (NeuN, Calretinin, Double cortin, Tuj, Map2) à E12, E14
et E16 et gliale (GFAP, olig2, olig4) à P0 et P5, et la spécification (marqueurs
spécifiques de couches corticales Cux1, Tbr1, Satb2, Ctip1) à E16 P0 et P5
RESULTATS, PERSPECTIVES
Ce projet devrait nous aider à mieux comprendre le rôle du VIP maternel dans de
développement du cortex de l’embryon, avec en perspective, la restauration du phénotype
cortical grâce à l’administration de VIP pendant la gestation au début de la neurogénèse.
[1] Passemard S, El Ghouzzi V, Nasser H, Verney C, Vodjdani G, Lacaud A, Lebon S,
Laburthe M, Robberecht P, Nardelli J, Mani S, Verloes A, Gressens P, Lelievre V. 2011. VIP
blockade leads to microcephaly in mice via disruption of Mcph1-Chk1 signaling. J Clin Invest.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire : génotypage, PCR, immunohistologie,
Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années (sélection):
Breuss M, Heng JI, Poirier K, Tian G, Jaglin XH, Qu Z, Braun A, Gstrein T, Ngo L,
Haas M, Bahi-Buisson N, Moutard ML, Passemard S, Verloes A, Gressens P,
Xie Y, Robson KJ, Rani DS, Thangaraj K, Clausen T, Chelly J, Cowan NJ,
Keays DA. 2013. Mutations in the beta-tubulin gene TUBB5 cause
microcephaly with structural brain abnormalities. Cell Rep;2 (6):1554-62.
Passemard S, El Ghouzzi V, Nasser H, Verney C, Vodjdani G, Lacaud A, Lebon S,
Laburthe M, Robberecht P, Nardelli J, Mani S, Verloes A, Gressens P,
Lelievre V. VIP blockade leads to microcephaly in mice via disruption of
Mcph1-Chk1 signaling. J Clin Invest 2011.;121 (8):3071-87.
Nicholas AK, Khurshid M, Desir J, Carvalho OP, Cox JJ, Thornton G, Kausar R,
Ansar M, Ahmad W, Verloes A, Passemard S, Misson JP, Lindsay S, Gergely
F, Dobyns WB, Roberts E, Abramowicz M, Woods CG. WDR62 is associated
with the spindle pole and is mutated in human microcephaly. Nat Genet
2010;42 (11):1010-4.
Passemard S, Titomanlio L, Elmaleh M, Afenjar A, Alessandri JL, Andria G, de
Villemeur TB, Boespflug-Tanguy O, Burglen L, Del Giudice E, Guimiot F, Hyon

C, Isidor B, Megarbane A, Moog U, Odent S, Hernandez K, Pouvreau N, Scala
I, Schaer M, Gressens P, Gerard B, Verloes A. Expanding the clinical and
neuroradiologic phenotype of primary microcephaly due to ASPM mutations.
Neurology 2009;73 (12):962-9.
Passemard S, Kaindl AM, Verloes A. Microcephaly. Handb Clin Neurol
2013;111:129-41.
Passemard S, Sokolowska P, Schwendimann L, Gressens P. VIP-induced
neuroprotection of the developing brain. Curr Pharm Des 2011;17 (10):1036-9.
Passemard S, Kaindl AM, Kumar P, Kraemer N, Issa L, Zwirner A, Gerard B, Verloes
A, Mani S, Gressens P. 2010.Many roads lead to primary autosomal recessive
microcephaly. Prog Neurobiol 2010;90 (3):363-83.
Autres informations:
Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez
le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement
Etudiants en Master2
Naissa Abdoul Anziz (S. Passemard)
Aurélie Keslick (O. Baud)
Mélanie Amouyal (N. De Roux)
Ridoux Audrey (F. Guimiot)
Etudiants en Thèse
Sigaut Stéphanie (P. Gressens, 2012, GC2ID)
Renaldo Florence (O. Boesflug-Tanguy, 2011, GC2ID)
Tata Brooke (N. De Roux, 2012, GC2ID)
Fafouri Assia (P. Dournaud, 2011, GC2ID)
Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des
six dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de l’étudiant, l’année
du début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le devenir de l’étudiant.
Etudiants en Master2
Dupuis Nina
Ore Marie Virginie
Nasser Hala
Walliaa Shaveta
Julien
Chatel Paul
Etudiants de Natacha ???
Etudiants en Thèse
Favrais Géraldine (Pierre Gressens, 2006-2009, GC2ID, PH Tours)
Degos Vincent (Pierre Gressens, 2006-2010, GC2ID, CCA Paris)
Passemard Sandrine (Vincent Lelièvre, 2006-2009, GC2ID, MCU-PH Paris)

Dupuis Nina (Vincent El Ghouzzi, 2009-2012, GC2ID, post-doc)
Teissier Natacha (Homa Addle, 2008-2011, GC2ID, PH Paris)
Lelouvier Benjamin (Pascal Dournaud, 2005-2008, ED3C, post-doc)
Leverche Virginia (Pascal Dournaud, 2006-2009, ED3C, post-doc)
Chhor Vibol (Pierre Gressens, 2010-ce jour, GC2ID)
Phan Duy An (Olivier Baud, 2012-ce jour, GC2ID)
Villaneuva Carinne (Nicolas De Roux, 2008-2011, GC2ID)
Huijbregts Lukas (Nicolas De Roux, 2007-2010, GC2ID)
Gauthier Loron (Olivier Baud, 2008-2012, GC2ID)
Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin
ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ?
Proposition de stage à l’attention d’étudiants scientifiques ou médecins
Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ?
oui