Stage proposé par

Stage proposé par
Sandrine Passemard
Nom et adresse du Laboratoire ou de l’Unité :
Inserm U1141, Hôpital Robert Debré, 48 boulevard serrurier 75019 Paris
Téléphone : 01 40 03 36 91
Mail : [email protected]
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Dr Pierre Gressens
Titre du projet de stage :
Projet de stage : Impact
du VIP (vasoactive intestinal peptide) sur la néocorticogénèse
CONTEXTE
Le blocage du VIP maternel chez la souris gestante au début de la neurogénèse (entre les 9
et 11èmes jours de vie embryonnaire) conduit à une microcéphalie chez le souriceau
démontrant l’impact de facteurs d’environnement, notamment maternels, dans le
développement cérébral précoce [1]. Cette microcéphalie résulte d’une diminution de la
prolifération des progéniteurs de neurones dès E12,5. Mais le type de progéniteurs (cellules
gliales radiaires ou progéniteurs basaux) ciblé par le VIP ainsi les conséquences du blocage
du VIP sur la génèse des sous populations neuronales, gliales, la lamination corticale et la
connectivité neuronale ne sont pas connus.
OBJECTIFS
L’objectif principal du stage est de définir l’impact du VIP maternel sur la neurocorticogénèse
de l’embryon c’est à dire sur i) la prolifération des progéniteurs et ii) leur
différenciation/spécification neuronale et gliale.
METHODES
Nous étudierons l’effet de la privation de VIP maternel sur la prolifération des progéniteurs et
leur différenciation dans le télencéphale des embryons VIP-/- nés de mère VIP-/-. Nous
utiliserons les méthodes d’immunohistochimie pour étudier :
- La prolifération des progéniteurs (phosphohistone H3, BrdU, Ki67 couplés aux
marquages Pax6 [cellules gliales radiares] et Tbr2 [progéniteurs basaux]) à E10, E12,
E14 et E16.
- La différenciation neuronale (NeuN, Calretinin, Double cortin, Tuj, Map2) à E12, E14
et E16 et gliale (GFAP, olig2, olig4) à P0 et P5, et la spécification (marqueurs
spécifiques de couches corticales Cux1, Tbr1, Satb2, Ctip1) à E16 P0 et P5
RESULTATS, PERSPECTIVES
Ce projet devrait nous aider à mieux comprendre le rôle du VIP maternel dans de
développement du cortex de l’embryon, avec en perspective, la restauration du phénotype
cortical grâce à l’administration de VIP pendant la gestation au début de la neurogénèse.
[1]
Passemard S, El Ghouzzi V, Nasser H, Verney C, Vodjdani G, Lacaud A, Lebon S,
Laburthe M, Robberecht P, Nardelli J, Mani S, Verloes A, Gressens P, Lelievre V. 2011. VIP
blockade leads to microcephaly in mice via disruption of Mcph1-Chk1 signaling. J Clin Invest.