Monfils_Sarah_2011_memoire - Papyrus : Université de Montréal

Université de Montréal
Métabolisme énergétique cardiaque fœtal dans un modèle de
restriction de croissance intra-utérine chez le rat
Par
Sarah Monfils
Programme de sciences biomédicales
Faculté de Médecine
Mémoire présenté à la Faculté des études supérieures
en vue de l’obtention du grade de Maîtrise ès Sciences (M.Sc.)
en sciences biomédicales
Février 2011
©Sarah Monfils, 2010

ii
Université de Montréal
Faculté des études supérieures
Ce mémoire intitulé:
Métabolisme énergétique cardiaque fœtal dans un modèle de
restriction de croissance intra-utérine chez le rat
Présenté par:
Sarah Monfils
a été évalué par un jury composé des personnes suivantes:
Dr Guy Rousseau: Président-rapporteur
Dre Michèle Brochu: Directrice de recherche
Dr Yann Burelle: Membre du jury

iii
RÉSUMÉ
Une diète faible en sodium donnée à des rates lors de la dernière semaine de gestation
induit une diminution de l’expansion volumique, du diamètre des artères utérines et
du poids des placentas comparativement à des rates témoins. Ces perturbations
suggèrent une diminution de la perfusion placentaire affectant l’apport fœtal en
nutriments. Les ratons naissent avec une restriction de croissance intra-utérine (RCIU).
Chez le fœtus, le substrat énergétique cardiaque principal est le glucose via la
glycolyse. À la naissance, la source principale d’énergie est l’utilisation des acides gras
par la β-oxydation. Nous émettons l’hypothèse que dans ce modèle de RCIU, le cœur
fœtal répond à la diminution d’apport nutritionnel due à une atteinte maternelle en
adaptant son métabolisme énergétique cardiaque à la baisse. Les rates gestantes
(témoins et recevant la diète faible en sodium) sont sacrifiées au jour 22 de gestation
(sur 23). Les cœurs fœtaux sont prélevés afin de caractériser les protéines dites
« limitantes » in vitro des voies de la glycolyse et de la β-oxydation. Les expressions
protéiques de GLUT1, GLUT4, HK1, HK2, CPT2, CPT1β, cytochrome c, PFK1, PKM1/2,
mesurées par immunobuvardage de type Western, sont similaires entre les cœurs des
fœtus RCIU et témoins, mâles et femelles. L’expression protéique de CPT1α est
diminuée dans les cœurs des femelles RCIU seulement. Il n’existe aucune différence
significative entre les différents groupes quant à l’activité enzymatique de PKM1/2.
Nos résultats dressent un profil métabolique général suggérant que le sexe du fœtus
peut avoir un effet sur la réponse cardiaque fœtale à une atteinte du volume sanguin
maternel causée par la diète restreinte en sodium. Ce profil métabolique semble
démontrer une atteinte du catabolisme des lipides. Afin de bien caractériser cette
réponse du mécanisme énergétique, l’activité enzymatique des autres enzymes
principales de la glycolyse (HK1, HK2, PFK1), le flux intra-mitochondrial d’acyl CoA à
travers les CPTs ainsi que la quantité totale d’acétyl CoA devront être quantifiés.
Mots Clés : restriction de croissance intra-utérine, glycolyse, β-oxydation des acides
gras, cœur fœtal, apoptose.

iv
ABSTRACT
A low sodium diet was given to pregnant rats during the last week of gestation. This
diet diminished the maternal expansion of blood volume, the uterine arteries
diameter, and placental weight, when compared to their controls. Together, these
results suggest a lower placenta perfusion and a decreased output of nutrients to the
fetus. The offspring of these pregnant rats were born with an intra-uterine growth
retardation (IUGR). The fetal heart utilizes glucose through glycolysis as the major
cardiac energy substrate. At birth, the principal source of energy switches to the
oxidation of fatty acids, through β-oxydation. We hypothesized that within our IUGR
model, the fetal heart could respond to a diminished nutritional intake due to the
maternal input when a decreased cardiac energy metabolism was present. The
pregnant rats of both groups (controls and on the low sodium diet) were sacrificed on
day 22 of a 23 day gestation. The fetal hearts were then analyzed looking for signs of
the limiting proteins glycolysis and β-oxidation. The GLUT1, GLUT4, HK1, HK2, CPT2,
CPT1β, cytochrome c, PFK1, PKM1/2 proteins obtained through a Western
immunoblot method were similar between the hearts of the IUGR and their control
fetuses, whether they were male or female. The protein expression of CPT1α was
lower only in female IUGR fetal hearts. There was no significant difference between
the groups with respect to the enzymatic activity of PKM1/2. Our results suggest that
the metabolic profile changes with regards to the fetus gender and could affect the
fetal cardiac metabolism, due to a lower maternal blood flow caused by a sodium
controlled diet, by diminishing its lipid metabolism and sparing glucose metabolism. To
characterize the energy metabolism, the enzymatic activity of the other principal
limiting enzymes glycolysis (HK1, HK2, PFK1), the intra-mitochondrial flux of acyl CoA
through the CPTs and the total quantity of acetyl CoA must also be analyzed.
Key words: intra-uterine growth retardation, glycolysis, fatty acid β-oxidation, fetal
heart, apoptosis.

v
TABLE DES MATIÈRES
Page de présentation du mémoire i
Page de présentation du jury ii
Résumé et mots-clés iii
Abstract and key words iv
Table des matières v
Liste des figures vii
Liste des tableaux ix
Liste des abréviations x
1. INTRODUCTION 1
1.1 Restriction de Croissance Intra-Utérine 3
1.1.1 Paramètres de la Restriction de croissance Intra-Utérine 3
1.1.2 Théorie de programmation fœtale 5
1.1.3 Modèles de Restriction de croissance Intra-Utérine 6
1.1.3.1 Différents modèles 6
1.1.3.2 Le modèle RCIU développé au laboratoire 9
1.2 Le placenta 14
1.2.1 Organogenèse et morphologie générale 14
1.2.2 Transfert de nutriments et autres fonctions 14
1.3 Le cœur 16
1.3.1 Organogenèse 16
1.3.2 Histologie 18
1.3.3 Substrats énergétiques 19
1.4 Métabolisme énergétique cardiaque 23
1.4.1 Glycolyse 24
1.4.1.1 Transport membranaire du glucose 25
1.4.1.2 Glycolyse 28
1.4.1.3 Étapes limitantes de la glycolyse, contrôle et régulation 29
a) Hexokinase 30
b) Phosphofructokinase 32
c) Pyruvate Kinase 33